DNA交叉的Holliday模型
被廣泛接受的DNA交叉模型最早是由Robin Holliday于1964年提出的。它包括如下圖所示的幾個(gè)步驟。
圖1.DNA交叉的霍利迪模型:
(a) 兩個(gè)同源 DNA 分子排成一行(例如,兩個(gè)非姐妹染色單體在減數(shù)分裂期間排成一行)。
(b) 切割兩條 DNA 的一條鏈。
(c) 切割的鏈交叉并連接同源鏈,形成 Holliday 結(jié)構(gòu)(或 Holliday 連接)。
(d) 異源雙鏈體區(qū)域由分支遷移形成。
(e) 霍利迪結(jié)構(gòu)的決議。 圖1e 是與圖 1d 不同的霍利迪路口視圖。 DNA 鏈可以沿垂直線(xiàn)或水平線(xiàn)切割。
(f) 垂直切割將導(dǎo)致 f-f' 和 F-F' 區(qū)域之間的交叉。 異源雙鏈區(qū)域最終將通過(guò)錯(cuò)配修復(fù)得到糾正。
(g) 錯(cuò)配修復(fù)后水平切割不會(huì)導(dǎo)致交叉。 但是,它可能會(huì)導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)換。
圖2.RecA 六聚體 (PDB ID = 2REC) 的結(jié)構(gòu),它可以包裹單鏈 DNA 并引導(dǎo)它形成 Holliday 結(jié)構(gòu)。
同源重組的詳細(xì)機(jī)制主要是從大腸桿菌的研究中獲得的。 雖然細(xì)菌不經(jīng)歷減數(shù)分裂,但同源重組可能在 DNA 復(fù)制期間或之后立即發(fā)生。 它也可能發(fā)生在稱(chēng)為共軛的交配過(guò)程中。
在大腸桿菌中,重組由 RecBCD 酶啟動(dòng),該酶由三個(gè)亞基組成:RecB、RecC 和 RecD。 該酶同時(shí)具有解旋酶和核酸酶活性。 該酶首先利用其解旋酶活性解開(kāi) DNA。 當(dāng)它擊中 Chi 位點(diǎn)(序列為 GCTGGTGG)時(shí),其中一條暴露的鏈將被其核酸酶活性切斷。 這個(gè)特殊站點(diǎn)之所以被稱(chēng)為“Chi站點(diǎn)”,是因?yàn)橄ED字母χ(chi)看起來(lái)像一個(gè)交叉點(diǎn)。 氣位是霍利迪交界的位置,也是十字路口的位置。
DNA 鏈被 RecBCD 切割后,鏈入侵被 RecA 蛋白催化,它可以包裹單鏈 DNA 并引導(dǎo)它形成 Holliday 結(jié)構(gòu)。
最后,分支遷移由 RuvA 和 RuvB 催化。 Holliday 結(jié)構(gòu)由蛋白質(zhì) RuvC 解析。