LC/MS-MS質(zhì)譜法定量檢測皮質(zhì)醇
原理
皮質(zhì)醇是人體循環(huán)中含量最多的類固醇。皮質(zhì)醇參與蛋白質(zhì)、糖和脂質(zhì)分解,維持血壓,調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)。
皮質(zhì)醇不足可能會(huì)引起體重減輕、肌肉無力、疲勞、血壓過低和腹痛。另一方面,皮質(zhì)醇在體內(nèi)持續(xù)過量將會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)被過度分解,造成肌肉萎縮以及骨骼變形,還會(huì)導(dǎo)致女性月經(jīng)周期異常,以及兒童生長發(fā)育遲緩。
皮質(zhì)醇在血液中的含量能夠反映腎上腺皮質(zhì)功能。對(duì)血液中皮質(zhì)醇進(jìn)行檢測可用于輔助診斷庫欣綜合征、垂體功能減退癥、腎上腺增生和癌癥等等。通過對(duì)皮質(zhì)醇水平進(jìn)行檢測,可以明確病因,以便臨床精準(zhǔn)干預(yù),避免糖皮質(zhì)激素的不必要使用。
2、實(shí)驗(yàn)介紹
皮質(zhì)醇是一種重要的壓力激素,在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和心理學(xué)等領(lǐng)域具有廣泛的研究價(jià)值。液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS-MS)是目前測定皮質(zhì)醇濃度的最常用方法之一。
3、檢測指標(biāo)

4、實(shí)驗(yàn)步驟
1.樣品制備:采集待測生物樣品,如血清、尿液等,加入內(nèi)標(biāo)穩(wěn)定同位素皮質(zhì)醇,進(jìn)行蛋白質(zhì)沉淀或提取等樣品前處理步驟。
2.液相色譜分離:將經(jīng)過樣品制備處理的樣品進(jìn)入液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行分離。常用的分離柱為C18反相柱。
3.質(zhì)譜檢測:將分離后的物質(zhì)通過電離源進(jìn)行電離產(chǎn)生離子,并進(jìn)入質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行質(zhì)量/荷比值的分析。常用的離子化方式為電噴霧(ESI)或大氣壓化學(xué)電離(APCI)。
]4.?dāng)?shù)據(jù)分析:利用LC/MS-MS軟件對(duì)測得的離子質(zhì)荷比和離子峰強(qiáng)度進(jìn)行分析,并通過內(nèi)標(biāo)法計(jì)算樣品中皮質(zhì)醇的濃度。