Worthington丨艾美捷Worthington乙醇脫氫酶研究方案
源自酵母的醇脫氫酶是一種金屬酶,每個(gè)分子含有四個(gè)緊密結(jié)合的鋅原子(Vallee and Hoch, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 41, 327, 1955)。乙醇酶促氧化的最佳?pH?值為?8.6-9.0,乙醛還原的最佳?pH?值接近?7.0。
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醇脫氫酶?(ADH)?是氧化還原酶家族的一部分,它使用?NAD +或?NADP +作為電子受體來(lái)催化醇的氧化(White and White 1997)。該反應(yīng)是可逆的,底物可以是各種伯醇或仲醇以及半縮醛。酒精脫氫酶存在于大多數(shù)生物體中,酵母是酶的最活躍形式。以下數(shù)據(jù)適用于面包酵母、釀酒酵母的酒精脫氫酶。
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穩(wěn)定性/儲(chǔ)存:在?2-8°C?下穩(wěn)定?3-5?個(gè)月。
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單位定義:
在?25°C、pH 8.8?條件下,一個(gè)單位每分鐘可減少?1?微摩爾?NAD。
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艾美捷Worthington乙醇脫氫酶特異性:
酵母?ADH?的特異性比肝酶的特異性更窄。它接受乙醇,對(duì)直鏈伯醇有一定的活性。它對(duì)某些仲醇和支鏈醇的作用非常有限(Dickinson?和?Dalziel 1967a)。
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艾美捷Worthington乙醇脫氫酶應(yīng)用:
伯醇和醛的酶法測(cè)定
手性化合物的合成
縮醛磷脂酶的分光光度測(cè)定
有機(jī)溶劑中的酶催化
NAD +、NADH、NADP +和?NADPH的研究
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CATH分類(lèi):
類(lèi)別:阿爾法貝塔
架構(gòu):Alpha-Beta?復(fù)合體和?3?層?(aba)?三明治
拓?fù)洌乎趸€原酶;鏈?A,域?1?和羅斯曼折疊
分子量:
146.8 kDa(理論值)
X佳?pH:
5.4(肖爾和?Theorell 1966)
消光系數(shù):
189,320 cm -1 M -1(理論值)
E 1%,280 = 12.89(理論值)
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試劑:
0.1 M焦磷酸鈉緩沖液,pH 9.2
2 M乙醇。用試劑級(jí)水將12.12 ml 95%乙醇稀釋至100 ml。
直徑0.025 M。注:NAD可能因鹽的形式和水合程度而異。應(yīng)小心使用分析等級(jí)和正確的分子量。
0.1 M磷酸鹽緩沖液,pH 7.5
0.1%白蛋白(BSA)
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艾美捷Worthington乙醇脫氫酶部分參考文獻(xiàn):
Abdallah, M. , Biellmann, J. , Cedergren-Zeppezauer, E. , Gerber, M. , Dietrich, H. , Zeppezauer, M. , Koerber, S. , MacGibbon, A. and Dunn, M.
Reaction of the Z Isomer of 4-trans-(N,N-dimethylamino)cinnaldoxime with the Liver Dehydrogenase-Oxidized Nicotinamide Dinucleotide Complex , Biochemistry 23 , 1003 , 1984
Ainslie, G. and Cleland, W.
Isotope Exchange Studies on Liver Alcohol Dehydrogenase with Cyclohexamol and Cyclohexanone as Reactants , J Biol Chem 247 , 946 , 1972
Anderson, B. and Reynolds, M.
Multiple Inhibition of Yeast Alcohol Dehydrogenase by Heterocyclic Nitrogen Bases , Arch Biochem Biophys 114 , 299 , 1965
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Worthington核心酶用于生命科學(xué)研究、原代細(xì)胞和干細(xì)胞分離、生物加工、生物制藥、診斷和生物技術(shù)應(yīng)用。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。