高通量蛋白篩選,科研利器—Luminex液相蛋白芯片
1、液相芯片技術(shù)的原理
液相芯片體系由許多大小均一的圓形微球(直徑5.5~5.6 μm)為主要基質(zhì)構(gòu)成,每種微球上固定有不同的探針分子,將這些微球懸浮于一個(gè)液相體系中,就構(gòu)成了一個(gè)液相芯片系統(tǒng),利用這個(gè)系統(tǒng)可以對(duì)同一個(gè)樣品中的多種不同分子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè),這種被稱之為xMAP的檢測(cè)技術(shù)是1997年由美國Luminex公司開發(fā)出來的。

液相蛋白芯片原理
2、液相芯片技術(shù)的特點(diǎn)
液相芯片技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)在于:僅需少量樣本即可同時(shí)定性、定量檢測(cè)同一樣本中的多種不同目的分子,即多重檢測(cè)(multiplexing)。
2.1 高通量
可對(duì)同一樣本中的多種不同目的分子同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)、定性、定量分析。從理論上說,如果不存在交叉反應(yīng),檢測(cè)的通量等于微球的種類數(shù),目前最多可達(dá)到100種。這遠(yuǎn)勝過一次只能檢測(cè)一個(gè)項(xiàng)目的傳統(tǒng)免疫分析法。
2.2 樣本用量少
由于在同一個(gè)反應(yīng)孔中可以同時(shí)完成100種不同的生物學(xué)反應(yīng),所以大大節(jié)省了樣本用量,少至1μl的樣本即可檢測(cè),非常適合分析小體積稀有樣品。
2.3 操作簡(jiǎn)單、快速
由于是基于液相反應(yīng)動(dòng)力學(xué),因此反應(yīng)速度快,孵育時(shí)間比傳統(tǒng)的固相檢測(cè)短。進(jìn)行免疫學(xué)分析時(shí),若使用高親和力抗體,2~3 h內(nèi)即完成檢測(cè),而核酸雜交分析在PCR擴(kuò)增后1 h內(nèi)可得到結(jié)果。
2.4 靈敏度高
微球表面積大,每個(gè)微球上可包被100 000個(gè)捕獲抗體,如此高密度的捕獲抗體保證了能夠最大程度地與樣本中的抗原分子結(jié)合,提高檢測(cè)靈敏度。最低檢測(cè)濃度可達(dá)到0.1 pg/ml.
2.5 檢測(cè)范圍廣
可達(dá)3~5個(gè)數(shù)量級(jí)(如BioRad公司細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)范圍達(dá)到0.2~32 000 pg/ml,樣品無需濃縮或稀釋。
2.6 特異性強(qiáng)
無需洗滌就能夠自行將和微球結(jié)合的與未結(jié)合的分子區(qū)分開來,只讀取單個(gè)微球上的熒光信號(hào),信噪比好。
2.7 準(zhǔn)確性高
微球上的報(bào)告分子熒光強(qiáng)度與結(jié)合的待測(cè)分子成正比。由于液相芯片技術(shù)的檢測(cè)范圍大,因此不需要象ELISA檢測(cè)中那樣需將樣本多倍稀釋,從而減小了誤差。
2.8 重復(fù)性好
這是由于:第一,與ELISA依靠酶放大作用的比色讀數(shù)相比,液相芯片技術(shù)中的熒光讀值更加直接、穩(wěn)定、靈敏;第二,每種微球檢測(cè)100個(gè),最終取熒光強(qiáng)度的中值作為結(jié)果,這相當(dāng)于對(duì)每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)了100次,而ELISA僅為雙復(fù)孔或三復(fù)孔,因此液相芯片檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性是ELISA無法比擬的。
3、液相芯片技術(shù)的應(yīng)用
3.1 定量檢測(cè)細(xì)胞因子
3.2 檢測(cè)SNP
3.3 檢測(cè)病原體和診斷感染性疾病
4、實(shí)驗(yàn)流程
1. 客戶確定指標(biāo)信息、物種信息、樣品信息
2. 我司根據(jù)客戶指標(biāo)信息定制Luminex試劑盒
3. 客戶收樣、郵寄到我公司進(jìn)行檢測(cè)
5、公司服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1、專業(yè)化的技術(shù)服務(wù)檢測(cè)團(tuán)隊(duì),真實(shí)反饋實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2、配套設(shè)備先進(jìn),使用LX100/LX200進(jìn)行檢測(cè)
3、實(shí)驗(yàn)周期短,按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)
6、常見樣品類型

7、檢測(cè)及出具報(bào)告

定量檢測(cè)標(biāo)曲