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植物組織培養(yǎng)常用的抗生素及使用說明指南

2023-07-14 15:44 作者:達(dá)則兼濟(jì)天下  | 我要投稿

植物組織培養(yǎng)是一種將植物的細(xì)胞、組織或器官在無菌條件下培養(yǎng)和繁殖的技術(shù)。它通常使用人工制備的培養(yǎng)基,提供適當(dāng)?shù)酿B(yǎng)分和生長條件,以促進(jìn)植物細(xì)胞的增殖和分化。

植物組織培養(yǎng)可以通過以下幾種方式進(jìn)行:

胚培養(yǎng):將植物胚或種子表面消毒后,培養(yǎng)在含有適當(dāng)激素和營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上,促使其發(fā)育成植株。

分生組織培養(yǎng):從植物莖、葉、根等部位中取出細(xì)胞組織,將其培養(yǎng)在含有激素和營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上,通過細(xì)胞分裂和分化形成新的植株。

愈傷組織培養(yǎng):通過創(chuàng)傷或外界因素,如傷口、組織切片或激素添加,誘導(dǎo)植物細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織,然后將愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng),進(jìn)一步分化為新的植株。

植物組織培養(yǎng)過程中,會用到很多種抗生素,那么又該怎么去選擇合適的抗生素和使用呢?下面就對幾種常會用到的抗生素一一說明:

制霉菌素
制霉菌素是由鏈霉菌產(chǎn)生的一種抗真菌劑。其懸浮液具有殺菌和抑菌活性。制霉菌素只能微溶于水和乙醇。通過在少量二甲基亞砜(DMSO)中對粉末進(jìn)行表面除菌(以濕潤粉末),然后用無菌水,將粉末懸浮,來制備無菌懸浮液。該操作應(yīng)在無菌條件下使用無菌設(shè)備(玻璃器皿等)進(jìn)行。
制霉菌素制劑不耐熱。水懸浮液應(yīng)在 -0°C 下避光儲存。制霉菌素懸浮液的 pH 約為 6.5-8.0,在 pH 低于 2.0 或高于 9.0 下會分解。

羧芐青霉素鈉
羧芐青霉素是一種白色至灰白色的吸濕性粉末,溶于水和乙醇。羧芐青霉素對革蘭氏陰性菌最有效,對革蘭氏陽性菌也有一定的作用。據(jù)報(bào)道,羧芐青霉素水溶液在室溫下可穩(wěn)定 24 小時,在 0-5°C 下可穩(wěn)定 72 小時。

頭孢噻肟鈉
頭孢噻肟是一種白色至灰白色粉末,易溶于水。新制備溶液的顏色變化不一定表示效價的變化。本品需避光存儲于密閉容器中。頭孢噻肟水溶液 0-5°C 存儲時,pH 保持在 4.3-6.2,保持 14-21 天。頭孢噻肟對革蘭氏陰性菌非常有效。

G-418 硫酸鹽
雖然 G-418 硫酸鹽與慶大霉素有關(guān),但通常不作為標(biāo)準(zhǔn)抗生素使用。它通常用于分子生物學(xué)中的篩選。G-418 硫酸鹽對細(xì)菌、酵母、原生動物、蠕蟲和哺乳動物細(xì)胞來說有毒??顾幮允怯蓛蓚€細(xì)菌起源的顯性基因中的一個產(chǎn)生的,這些基因可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。
G418 硫酸鹽是水溶性的,可在室溫下儲存 1 年。其水溶液應(yīng)冷凍保存。選擇所需的 G418 硫酸鹽的量將隨細(xì)胞類型和生長周期的不同而變化。雖然相比非擴(kuò)增階段的細(xì)胞,生長期的細(xì)胞對 G418 的反應(yīng)更迅速,但是處于對數(shù)期的細(xì)胞仍然需要 3-7 天來進(jìn)行篩選。

潮霉素 B
濕霉素 B 是一種氨基糖苷類抗生素,對原核、真核的微生物和細(xì)胞均有效。與 G418 硫酸氫鹽一樣,通常用于分子生物學(xué)中的篩選。昆蟲和哺乳動物細(xì)胞可以表達(dá) hph 基因,該編碼了潮霉素-B-磷酸轉(zhuǎn)移酶,抗?jié)衩顾?B。濕霉素 B 呈粉末狀,用于抗生素篩選時,推薦使用濃度為 10-400 μg/ml。

抗生素參考指南

XX:對大多數(shù)物種有效
X:對某些物種有效
CC=愈傷組織培養(yǎng);PR=植株再生;EC=子葉、下胚軸或葉盤培養(yǎng);TS=轉(zhuǎn)化選擇;SE=體胚胎發(fā)生;SSC=莖選擇培養(yǎng);PC=原生質(zhì)體培養(yǎng);TEC=塊莖外植體培養(yǎng);STM=莖尖微繁殖

以上就是今天AbMole生物帶給大家的科普內(nèi)容了,希望對植物專業(yè)的科研用戶能有所幫助。

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