艾美捷Melanopsin-SAP特異性制備及相關用途介紹
Melanopsin在非洲爪蛙的黑素細胞(光敏皮膚細胞)中被發(fā)現(xiàn)是一種新型視蛋白。然后發(fā)現(xiàn)Melanopsin也存在于小鼠視網膜中,特別是在神經節(jié)細胞中,并且它介導非視覺光感受任務。Melanopsin也由Opn4編碼,在各種生物體中具有直系同源物。Melanopsin-SAP特異性地消除表達Melanopsin的固有光敏視網膜神經節(jié)細胞(ipRGC)。ipRGC具有驚人的長過程,參與明暗感知,是晝夜節(jié)律的決定因素。
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Melanopsin-SAP是親和純化的兔多克隆抗體對小鼠Melanopsin和核糖體滅活蛋白saporin的化學偶聯(lián)物。它特異性地消除表達Melanopsin的固有光敏視網膜神經節(jié)細胞(ipRGC)。
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Melanopsin-SAP [IT-44,?KIT-44]:一種用于消除小鼠固有光敏視網膜神經節(jié)細胞中表達黑視蛋白的細胞的工具;通過親和純化的兔多克隆抗體靶向小鼠黑視蛋白,通過皂苷消除。
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特異性和制備:
這種靶向毒素識別小鼠固有光敏視網膜神經節(jié)表達黑色素的細胞(ipRGCs)。黑色素蛋白SAP是一種親和純化兔的化學偶聯(lián)物抗小鼠黑素的多克隆抗體(Cat.#AB-N39)和核糖體失活蛋白saporin(Cat。#PR-01)。
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用途:
黑色素素SAP特異性清除本質光敏視網膜神經節(jié)細胞(ipRGCs)表達黑色素蛋白酶。Melanopsin-SAP的使用和效果在G?z等人。
材料的批量變化;工作稀釋度必須由最終用戶確定。如果這是一個新的地段,在開始一個完整的實驗方案之前,你必須評估正確的工作稀釋度
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saporin/抗黑素(UF008)綴合物(目錄#IT-44)以劑量依賴的方式破壞培養(yǎng)的RGC-5細胞。穩(wěn)定表達或不表達RGC-5細胞的培養(yǎng)物小鼠黑色素蛋白酶暴露于黑色素蛋白SAP 4天。偶聯(lián)物的濃度顯示在每列的上方實驗一式三份。每個面板代表從單個井中隨機選擇的場。
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儲存:
使用前,在微型冰箱中輕輕旋轉材料5-10秒。將材料儲存在未稀釋的環(huán)境中在–20°C下進行1-2個月的等分試樣。為了長期儲存,將材料儲存在–80°C的溫度下。材料應為等分到方便的體積和數(shù)量,以避免重復冷凍和解凍,從而損壞蛋白質含量。在這些條件下,該材料具有非常穩(wěn)定的保質期。解凍應在室溫或在冰上。解凍后的溶液在使用前應保持在冰上。不要將還原劑(如二硫代蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸)與此材料一起使用。它會使毒素失活。這種物質是一種極其強效的細胞毒素。應由經驗豐富的人員進行處理。手套和搬運本產品時需要佩戴安全眼鏡。處置時必須小心;高壓滅菌或暴露至0.2M的氫氧化鈉將使材料失活。所有與此材料接觸的實驗室用品應該是一樣的。
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參考文獻:
1. G?z D, Studholme K, Lappi DA, Rollag MD, Provencio I, Morin LP (2008) Targeted
destruction of photosensitive retinal ganglion cells with a saporin conjugate alters the effects of
light on mouse circadian rhythms. PLoS ONE 3(9):e3153.