基因工程相關(guān)名詞釋義
Gene Engineering基因工程:按照人們的意愿,進(jìn)行嚴(yán)密的設(shè)計(jì),通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),有目的地改造生物種性,生產(chǎn)生物活性物質(zhì),甚至創(chuàng)造新物種的技術(shù)。
Vector載體:將外源DNA或基因攜帶進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增或表達(dá)的工具。
plasmid質(zhì)粒:質(zhì)粒是細(xì)菌的染色體外能夠自我復(fù)制的環(huán)狀 DNA 分子。
shuttle vector穿梭載體:能夠在兩類不同的宿主中復(fù)制、選擇和增殖的載體。
質(zhì)粒不相容性:兩種質(zhì)粒在同一宿主細(xì)胞中不能共存的現(xiàn)象。
Cosmid柯斯質(zhì)粒:是一類用于克隆大片段DNA的載體,是由(入)噬菌體的cos末端及質(zhì)粒重組而成的載體。
人工染色體載體:利用染色體的復(fù)制元件來(lái)驅(qū)動(dòng)外源DNA片段復(fù)制的載體稱之為人工染色體載體。
BAC細(xì)菌人工染色體:是指一種以F質(zhì)粒為基礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體,常用來(lái)克隆150kb左右大小的DNA片段,最多可保存300kb個(gè)堿基對(duì)。
YAC酵母人工染色體:是一種能夠克隆長(zhǎng)達(dá)400Kb的DNA片段的載體,含有酵母細(xì)胞中必需的端粒、著絲點(diǎn)和復(fù)制起始序列。
R-M System限制與修飾系統(tǒng):限制性內(nèi)切酶將侵入細(xì)菌體內(nèi)的外源DNA切成小片斷,細(xì)菌自身的DNA堿基被甲基化酶甲基化修飾所保護(hù),不能被自身的限制性內(nèi)切酶識(shí)別切割。
同裂酶:來(lái)源不同但識(shí)別相同靶序列的核酸內(nèi)切酶,同裂酶進(jìn)行同樣的切割產(chǎn)生同樣的末端。
同尾酶:來(lái)源不同,識(shí)別靶序列不同,但產(chǎn)生相同的粘性末端的核酸內(nèi)切酶。
star activity星活性: 在極端非標(biāo)準(zhǔn)條件下,限制酶能切割與識(shí)別序列相似的序列,這個(gè)改變的特殊性稱星活性。
Klenow 酶:是大腸桿菌聚合酶I的大片斷。它保留了DNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,但缺少完整的Klenow酶的5'→3'外切酶活性。Klenow酶的3'→5'外切酶活性保證了其合成DNA時(shí)的準(zhǔn)確性。
基因表達(dá):是指細(xì)胞在生命過(guò)程中,把儲(chǔ)存在DNA順序中的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。
Northern 雜交:是指將RNA分子變性及電泳分離后、從電泳凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物上進(jìn)行核酸雜交的方法。
Southern雜交:是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈。
Western印跡:是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上,然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測(cè),可說(shuō)明基因是否進(jìn)行了表達(dá)。
PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng): 是模仿細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的DNA 復(fù)制過(guò)程進(jìn)行的,在體外由酶催化合成特異性DNA 片段的方法。這種方法以DNA互補(bǔ)鏈聚合反應(yīng)互補(bǔ)鏈聚合反應(yīng)為基礎(chǔ),通過(guò)DNA 變性 、 引物與模板DNA一側(cè)的互補(bǔ)序列復(fù)性雜交 、 耐熱性DNA 聚合酶催化引物延伸等過(guò)程的多次循環(huán),獲得待擴(kuò)增的持異性等過(guò)程的多次循環(huán),獲得待擴(kuò)增的特異性DNA 片段。
基因組文庫(kù):指將某種生物體的全部基因組DNA用限制性內(nèi)切酶或機(jī)械力量切割成一定長(zhǎng)度范圍的DNA片段,在與合適的載體在體外重組,并轉(zhuǎn)化相應(yīng)的宿主細(xì)胞,獲得的所有陽(yáng)性菌落,這個(gè)群體就稱為該生物基因組文庫(kù)。
cDNA library cDNA文庫(kù):指將某種生物體基因組轉(zhuǎn)錄的全部mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的cDNA片段,分別與克隆載體重組,儲(chǔ)存于某種受體菌中,該群體就稱該生物基因組的cDNA文庫(kù)。
Tow-Hybrid System酵母雙雜交系統(tǒng):①研究蛋白質(zhì)相互作用的高靈敏度的分子遺傳學(xué)新工具、新方法;②用來(lái)分離新的基因或新的能與一種已知的蛋白質(zhì)相互作用的蛋白質(zhì)及其編碼基因。
感受態(tài):細(xì)胞處于能夠吸收DNA的狀態(tài)稱感受態(tài)。
Competent Cell感受態(tài)細(xì)胞:用理化方法人工誘導(dǎo)細(xì)胞,使之處于易于吸收和容納外源 DNA 分子的狀態(tài)。
Transformation轉(zhuǎn)化:指將質(zhì)?;蚱渌庠碊NA導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主菌,并使其獲得新的表型的過(guò)程。
Transduction轉(zhuǎn)導(dǎo):由噬菌體將一個(gè)細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過(guò)程。它是細(xì)菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的方式之一。其具體含義是指一個(gè)細(xì)胞的DNA或RNA通過(guò)病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞中。
轉(zhuǎn)染:指真核細(xì)胞主動(dòng)攝取或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過(guò)程。常用的方法有電穿孔法,磷酸鈣共沉淀法,脂質(zhì)體融合法等。