高效檢測(cè)——艾美捷PKA激酶活性檢測(cè)方案
激酶背景:
1968年,化學(xué)家H. Fischer和Edwin G. Krebs發(fā)現(xiàn)了蛋白激酶A,更確切地說是腺苷3’, 5’-單磷酸(環(huán)AMP)依賴性蛋白激酶。他們因在磷酸化和去磷酸化以及它與蛋白激酶A活性的關(guān)系方面的工作而獲得了1992年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。
?
PKA是研究得最廣泛的蛋白激酶之一,部分原因在于它的獨(dú)特性;在組成人類激酶組(kinome)的540個(gè)不同的蛋白激酶基因中,只有一個(gè)其他的蛋白激酶,酪蛋白激酶2,已知在生理?xiàng)l件下以四聚體形式的存在。
?
哺乳動(dòng)物PKA亞基的多樣性是在Stan Knight博士和其他人鑒定出可能的四個(gè)C亞基基因和四個(gè)R亞基基因之后被意識(shí)到的。1991年,Susan Taylor等人結(jié)晶了PKA Cα亞基,首次揭示了蛋白激酶核心的雙葉結(jié)構(gòu),為基因組中所有其它蛋白激酶(“激酶組”)提供了藍(lán)圖。
?
已發(fā)現(xiàn)的蛋白激酶約有400多種,分子內(nèi)都存在一個(gè)同源的由約270氨基酸殘基構(gòu)成的催化結(jié)構(gòu)區(qū)。在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等系統(tǒng)中,蛋白激酶形成了縱橫交錯(cuò)的網(wǎng)絡(luò)。這類酶催化從ATP轉(zhuǎn)移出磷酸并共價(jià)結(jié)合到特定蛋白質(zhì)分子中某些絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的羥基上,從而改變蛋白質(zhì)、酶的構(gòu)象和活性。
?
艾美捷PKA激酶活性試劑盒(ADI-EKS-390A)是一種高效的檢測(cè)方法,使用很少的樣品量。該試劑盒使您能夠在方便的基于?96 孔板的檢測(cè)中讀取終點(diǎn)或動(dòng)力學(xué)檢測(cè),并提供簡(jiǎn)單的樣品處理方案。該測(cè)定還提供高信噪比。

圖:用EKS-390A分析純化的活性PKA活性。使用PKA基質(zhì)微量滴定板測(cè)定不同數(shù)量的純化活性PKA。試驗(yàn)在300℃下孵育60分鐘
?
PKA激酶活性試劑盒(ADI-EKS-390A)參數(shù):
替代名稱:?蛋白激酶A,cAMP依賴性蛋白激酶
應(yīng)用:?比色檢測(cè)
活性測(cè)定
應(yīng)用說明:?用于定量測(cè)定任何物種的部分純化、純化或粗酶制劑中的PKA激酶活性。
物種反應(yīng)性:?物種獨(dú)立
使用/穩(wěn)定性:?將所有組分儲(chǔ)存在?4°C,活性激酶在 -80°C 下儲(chǔ)存。
航運(yùn):?用干冰運(yùn)輸
內(nèi)容:?微量滴定板、抗體、偶聯(lián)物、抗體稀釋緩沖液、激酶測(cè)定稀釋緩沖液、ATP、活性激酶、洗滌緩沖液濃縮液、TMB 底物、終止液 2
?
PKA激酶活性試劑盒部分文獻(xiàn):
神經(jīng)炎癥介導(dǎo)的線粒體失調(diào)涉及術(shù)后認(rèn)知功能障礙:Y.自由拉迪克。生物學(xué) 178, 134 (2022);
蛋白激酶C(PKC)-θ核易位的選擇性靶向可減少間充質(zhì)基因特征并重振免疫治療耐藥性和轉(zhuǎn)移性癌癥中功能失調(diào)的CD8 + T細(xì)胞:J. Dunn等人;癌癥 14, 1596 (2022);
佛司可林通過TLR4作用在體外調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞通透性:L. Liu, et al.;摩爾細(xì)胞。生化。476, 4487 (2021);
羅氟司特改善淀粉樣蛋白發(fā)生和taupath小鼠模型中的認(rèn)知缺陷:參與一氧化氮狀態(tài),Aβ擠出轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCB1,以及PKA抑制劑H89逆轉(zhuǎn):N.H. Ashour等人;神經(jīng)精神藥理學(xué)。生物學(xué)精神病學(xué)111,110366(2021);
cAMP/PKA/CREB 通路和β-阻滯蛋白 1 在妊娠大鼠 LH 誘導(dǎo)黃體溶解中的作用:A. Vashishta等;復(fù)制 162, 21 (2021);