WBC-LS02112中性蛋白酶分子特征及應(yīng)用介紹
概述:
蛋白質(zhì)由氨基酸組成,是自然界中發(fā)現(xiàn)的最復(fù)雜的有機化合物之一。由鹽酸和蛋白酶分解成易被高等動物的腸道和微生物有機體的細胞膜吸收的氨基酸包括人類在內(nèi)的每種動物,必須要有足夠的蛋自質(zhì)來維持自身生長,來生成每個細胞所必需的氫基酸,一些特種蛋自質(zhì)還是某些特殊細胞、腺體分泌物、度和激素的功能性組成元素蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能夠水解(斷裂)蛋白質(zhì),也稱為蛋白水解酶。蛋白水解酶在許多生理和病理過程中發(fā)揮重要作用,在食品和乳品加工業(yè)也有著廣泛應(yīng)用。
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工作機理:
蛋白水解酶制劑能在中性條件下水解蛋白質(zhì)食品中的縮氨酸鍵,釋放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黃油和醬油生產(chǎn)中,添加中性蛋白酶可澄清發(fā)酵液中的霧氣。酵母在發(fā)酵階段的生長可以通過懸浮蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化的氨基酸來加以促進,從而加速發(fā)酵并提高產(chǎn)量;
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艾美捷中性蛋白酶(Dispase?)是一種非哺乳動物來源的無(AOF)金屬中性蛋白酶,通過沃辛頓開發(fā)的方法純化。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于原代細胞和二次(亞培養(yǎng))細胞培養(yǎng)的制備,因為它對細胞膜溫和。這種蛋白酶還用作細胞分離和組織解離應(yīng)用中的二級酶,通常與膠原蛋白一起使用。
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中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)組成
已知該酶每g摩爾純化酶含有1g原子的鋅。如果通過EDTA或EGTA等螯合劑去除這種鋅成分,則會獲得無活性的載脂酶。鈣已在純化的蛋白質(zhì)中檢測到,并被認為在維持結(jié)構(gòu)和構(gòu)型以及防止自溶方面發(fā)揮作用(Griffin and Fogarty 1973 and Alvarez 2006)。
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分子特性
中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)由細胞外中性蛋白酶基因npr(GenBank入庫號BAA00734)產(chǎn)生,該基因與枯草芽孢桿菌具有62%的同一性(Koide等人,1986)。存在單個?978 bp?開放閱讀框,并且前序列的存在對于桿菌的所有分泌蛋白酶都是常見的。(竹川等人,1991年)。從Asn-287到Gly-590的Npr序列與中性蛋白酶序列具有相當大的同源性,例如來自熱蛋白水解芽孢桿菌的熱溶酶(55%相同)。
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中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)的應(yīng)用
組織分解和轉(zhuǎn)代培養(yǎng)
防止不必要的細胞聚集
培養(yǎng)細胞的制備
從真皮中分離完整的表皮,從基質(zhì)培養(yǎng)中分離完整的上皮片(Kurt等人,1989)
正常、二倍體細胞和細胞系的收獲和轉(zhuǎn)移(Matsumura?等人,1975?年)
溫和而完整的表皮細胞分離(北野和岡田1983)