美國約翰霍普金斯大學Taekjip Ha、Bin Wu等研究人員合作開發(fā)出超快CRISPR技術(shù)。該項研究成果發(fā)表在2020年6月12日出版的《科學》雜志上。

研究人員開發(fā)了一種籠狀的RNA策略，該策略能夠讓Cas9結(jié)合DNA，但在光誘導的激活作用下才能剪切。這種方法被稱為超快CRISPR（vfCRISPR），可在亞微米和秒級產(chǎn)生雙鏈斷裂（DSB）。同步切割改善了對DNA修復的動力學分析，揭示了細胞在幾分鐘內(nèi)對Cas9誘導的DSB作出反應，并且在DNA連接后可以保留MRE11。DNA損傷后H2AX的磷酸化每分鐘傳播100多個堿基，達到30兆堿基。

使用單細胞熒光成像，研究人員表征了53BP1修復灶形成和溶解的多個周期，第一個周期比隨后的周期更長，并且其持續(xù)時間受修復抑制作用的調(diào)節(jié)。成像引導的亞細胞Cas9激活進一步促進了單等位基因分辨率的基因組操作。vfCRISPR可以在空間、時間和基因組坐標上進行高分辨率的DNA修復研究。

據(jù)悉，CRISPR-Cas系統(tǒng)提供了用于可編程基因組編輯的多功能工具。

期刊信息

Science：《科學》，創(chuàng)刊于1880年。隸屬于美國科學促進會，最新IF：41.037