Fluo-8, AM鈣離子熒光探針;(CalciFluor? Fluo-8, AM) 是一種綠色熒光鈣結(jié)合染料，是一種優(yōu)于傳統(tǒng) Fluo-4, AM 的 Ca2+ 熒光探針，亮度大約是 Fluo-4 的兩倍。已開發(fā)用于改善細(xì)胞負(fù)載和鈣響應(yīng)，同時(shí)保持便利的 Fluo-3 和 Fluo-4 光譜波長，最大激發(fā)波長~490 nm 和最大發(fā)射波長 ~520 nm。??與 Fluo 4 AM 類似，陰離子羧基被乙酰氧基甲酯保護(hù)，允許膜滲透，隨后被細(xì)胞內(nèi)酯酶去除 - 允許 Ca2+ 檢測(cè)。

使用案例

Fluo-8 AM,? --?熒光細(xì)胞成像

U2OS 細(xì)胞在 96 孔黑壁/透明底部 costar 板中以每 100 μL/孔 40,000 個(gè)細(xì)胞過夜播種。 去除生長培養(yǎng)基，將細(xì)胞與 100 μl 4 μM Fluo-4 AM 或 Fluo-8? AM 在 HHBS 中在 37 °C、5% CO2 培養(yǎng)箱中孵育 1 小時(shí)。 細(xì)胞用 200 μl HHBS 洗滌兩次，然后使用 FITC 通道在熒光顯微鏡下成像。