重組鏈霉親和素3 r-SA3實(shí)現(xiàn)與生物素可逆結(jié)合和解離
品???名:
重組鏈霉親和素3(Recombinant Streptavidin 3, r-SA3)
規(guī)???格:
10 mg,100 mg,500 mg
產(chǎn)品形式:
凍干粉,凍干前溶液為5mM PB?(4mM Na
2
HPO
4
, 1mM NaH
2
PO
4
, pH7.4)溶液
分 子 量:
?16.7?kDa
等 電 點(diǎn):
6.06
純???度:
≥95%(SDS-PAGE檢測(cè))
濃度測(cè)定:
280nm吸收法,摩爾吸光系數(shù)為4.19×10
4
(mol/L)
-1
·cm
-1
,即c(g/L) = A
280nm
/2.51
內(nèi) 毒 素:
≤5EU/mg
來(lái)???源:
大腸桿菌
保存條件:
-20℃保存
有 效 期:
3年
?
相關(guān)介紹:
鏈霉親和素(Streptavidin,SA)與生物素具有很高的親和力,親和常數(shù)K
d
一般能達(dá)到10
-15
M,有活性的SA通常以四聚體形式存在。由于SA不含糖基,因此SA在檢測(cè)應(yīng)用中具有比親和素更低的非特異性結(jié)合水平,已被廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、免疫組織化學(xué)、時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)(TRFIA)、定量PCR、單鏈DNA制備、生物分子純化、單克隆抗體制備等生物技術(shù)領(lǐng)域。 但是SA與生物素的超高親和力,一般很難通過(guò)溫和的方法將結(jié)合后的SA與生物素分開,能分開的條件一般都會(huì)使SA失去活性,同樣生物素標(biāo)記的抗體、抗原也會(huì)失去活性,所以一般認(rèn)為SA與生物素的結(jié)合是不可逆的。重組鏈霉親和素3(r-SA3)在天然鏈霉親和素基礎(chǔ)上通過(guò)分子層面改造,大幅減弱與生物素的親和力(K
d
≈10
-8
M),同時(shí)保持四聚體結(jié)構(gòu),可實(shí)現(xiàn)與生物素可逆的結(jié)合和解離,可用于生物素化的蛋白、抗體、核酸等物質(zhì)溫和分離純化、回收利用等。r-SA3在分子內(nèi)含有半胱氨酸,一定條件下可實(shí)現(xiàn)定向偶聯(lián)。 ?