動物小鼠實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)-MCE
Hello,大家好,我叫小白 ,是一只平平無奇的實(shí)驗(yàn)室小白鼠,我有好多兄弟姐妹,小黑 (黑鼠)、小灰 (褐鼠)、小肉 (裸鼠),還有幾位有著洋氣外文名的族人,NOG、NCG/NOG/NSG,看了下面這個圖,相信一定分得清了。后面三位是重點(diǎn)保護(hù)對象,不僅心靈脆弱,身體也很脆弱,管它努不努力,生命周期全靠天意。

卓越的天資讓我們家族成為少數(shù)模式生物之一 (OS: 請把“優(yōu)秀”打在公屏上?。?,本小白終歸是承受了這個年紀(jì)不該承受的生命之重。今日我們現(xiàn)身吐槽大會,就是要澄清一些誤會 (嚴(yán)肅臉),列了幾宗罪狀,特地請了小象萌 Cece? 作為見證者,希望主人們引以為戒。
■ 第一宗罪:給藥體積不是你想給多少就給多少
小白: 以腹腔給藥為例,建議的最佳體積在 5 mL-10 mL/kg,算下來 100-200? μL 左右 (PS: 敢情您打 1 mL 是為了少喂點(diǎn)水么?),很多時候,這些液體里還有很大比例的 DMSO 等毒性溶劑,是藥三分毒,況且它還只是個和 (huo) 藥的,給多了就叫啥?得之要我命,失之我高興。
萌 Cece 建議:小鼠單次腹腔給藥最佳體積 5 mL-10 mL/kg,在溶解度允許情況下適當(dāng)減少給藥體積,用 DMSO 配制的母液時,對于正常小鼠或大鼠,建議 DMSO 的終濃度不要大于 10%;對于裸鼠或體弱小鼠或大鼠,建議 DMSO 的終濃度盡量不要超過 2%;對于正常小鼠,如果給藥頻率超過一天三次,建議 DMSO 的終濃度盡量不要超過 5%。也建議把動物的周齡/月齡考慮在內(nèi),酌情調(diào)整。
■ 第二宗罪:有明顯肉眼可見的顆粒進(jìn)行腹腔給藥
小白: 主人對小伙伴的身體進(jìn)行了“深入”地探索后發(fā)現(xiàn),腸道附近有多處“蛋花”樣的沉積物,或固體顆粒。
萌 Cece 建議:優(yōu)先建議選擇能溶解澄清的方案,當(dāng)然確實(shí)有一些產(chǎn)品不溶于水,但還是會用生理鹽水/PBS 溶解成混懸狀態(tài)或沉淀給藥的報(bào)道,這種情況要慎重,一方面可借助研缽或超聲的方式將固體粉末研磨/超聲成盡可能的小顆粒,給藥體積也要盡可能小,調(diào)整合理的給藥頻次和劑量,強(qiáng)烈建議做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
■ 第三宗罪:連續(xù)多天用同一管稀釋液給藥
小白: 曾有主,欲以苞谷油腹腔一兄,置多日,中有不明物。予之,遂死……
萌 Cece:請說鼠話。
小白: 曾經(jīng)有位主人,用玉米油給我的小伙伴進(jìn)行腹腔給藥,我眼見那管玉米油溶好的藥物都擱好多天了,似乎還有些細(xì)小的不明物,小伙伴沒扛過一周就去了。主人說小伙伴是因?yàn)楦腥舅赖?,還說文獻(xiàn)里都是騙人的。
萌 Cece 建議:玉米油、橄欖油、花生油和礦物油比較容易受污染,有研究論證,長期腹腔給藥會導(dǎo)致動物腹膜炎癥,其中花生油和礦物油引起較嚴(yán)重的腹膜炎癥,玉米油和橄欖油較輕 (減少巨噬細(xì)胞),一方面,建議分裝密封保存,新鮮配置,另一方面優(yōu)先采用灌胃的給藥方式,如需腹腔注射,參照我們官網(wǎng)的建議,周期、給藥頻次、單次給藥體積都需謹(jǐn)慎設(shè)置。詳情可參考 MCE 官網(wǎng)的信息。
■ 第四宗罪:每天給藥多次,有機(jī)溶劑總比例高
小白: 腹腔給藥用 5% DMSO 配置,就打 100 μL,咋就快癱瘓了呢,主人很困惑。本小白也很困惑 (癱瘓都忍不住爬起來叉腰吐槽),主人,您一天打 6 次咋不說?氣鼓鼓,變大鼠,現(xiàn)在請叫我大白謝謝。本文轉(zhuǎn)載自:http://www.activeinhibitor.com/xw/829.html
萌 Cece 建議:我們以雨蛙素 (Ceruletide) 這個產(chǎn)品為例吧。雨蛙素用于急性胰腺癌模型是需要隔一小時給一次藥,一天給藥 5-7 次,如果用 DMSO 配置,需要將 DMSO 終濃度降到很低很低,重要的是,雨蛙素本身水溶性非常好,這種情況首先建議用生理鹽水/PBS 現(xiàn)配給藥的。友情提醒,遇到雨蛙素這種產(chǎn)品,以及聯(lián)合用藥的情況,要按照比例和頻次及時、靈活調(diào)整給藥溶劑。
■ 第五宗罪:用藥劑量太高
小白: 主人用高出腫瘤模型用藥的劑量直接用于關(guān)節(jié)炎模型,小伙伴發(fā)生傷殘,也有的沒頂住撒手鼠寰,唉,終究是太難。
萌 Cece 建議:優(yōu)先參考文獻(xiàn)中同類動物模型的劑量信息,如沒有,建議多做幾組劑量做比較。
■ 第六宗罪:過于粗暴,沒有考慮“鼠的尊嚴(yán)”
小白: 肌注打穿腿,灌胃戳破食管,腹腔戳進(jìn)內(nèi)臟,本小白都想大聲說,放開那只鼠,讓我來!害,咱說點(diǎn)能改善的,天冷時給藥前加熱一下吧,咱都看到實(shí)驗(yàn)室的水浴鍋了,本小白也想要被溫柔對待
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PEG300
是一種中性的生物相容性親水聚合物。
Tween 80
是一種表面活性劑,可以減少細(xì)菌附著并抑制生物膜的形成。
SBE-β-CD
是磺基丁基醚 β-cyclodextrin 衍生物,其用作賦形劑或配制劑以增加難溶性藥物的溶解度。
Corn oil
是從玉米胚芽中提取出來的一種油,可作為藥物分子的載體。