固體核磁共振技術(shù)應(yīng)用——在膜蛋白上的應(yīng)用
固體核磁共振作為常用測試之一，但仍有許多同學不太了解固體核磁測試的原理及應(yīng)用，本篇文章由科學指南針科研服務(wù)平臺給大家介紹固體核磁共振在膜蛋白上的應(yīng)用。
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Daryl 等合成了一種新型的動態(tài)核極化(DNP)核磁共振(NMR)極化劑TOSMTSL-PTE，它是一種具有雙底端端基的 TOTAPOL 的磷脂，用來增強脂質(zhì)重組整體膜蛋白質(zhì)變形菌視紫質(zhì)（PR）的固態(tài)核磁共振(SSNMR)信號[4]。與傳統(tǒng)的將 TOTAPOL 分散在玻璃狀的甘油/水基質(zhì)中的制劑相比，DNP 的無基質(zhì) PR 制劑將核磁共振信號的絕對靈敏度提高了約 4 倍。在 400MHz/263 GHz 和 600MHz/395 GHz 下測量到的DNP 增強表現(xiàn)出很強的場依賴性，但在兩個場中都保持中等，與用ToSMTSL 共價修飾的 PR 所獲得的增強效果相當。附加連續(xù)波(CW) x波段電子順磁共振(EPR)實驗表明，在溶液和脂質(zhì)雙分子層中ToSMTSL-PTE 連接劑不利的構(gòu)象變化可能是 DNP 中度增強的原因之一。此外，差示掃描量熱法(DSC)和連續(xù)波 EPR 實驗表明，當極化劑濃度增加到 20mol %時，DMPC:DMPA 雙分子層中 ToSMTSL-PTE 的分布不均勻，且/或可能部分聚集。因此，構(gòu)象的改變和脂質(zhì)雙分子層中脂質(zhì)雙分子的不均勻分布成為進一步開發(fā)這種無基質(zhì)的膜蛋白 DNP 方法的重要因素。
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