發(fā)酵豆粕大豆胰蛋白酶抑制因子測定
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測樣本
胰蛋白酶抑制因子測定的適用樣品包括:初乳、豆豉、豆粕、大豆、大豆、蠶豆、紅豆、綠豆、黃豆、黑豆、豇豆、豌豆、刀豆、扁豆、蕓豆、鷹嘴豆、木豆,發(fā)酵豆粕、豆粕等豆制品。
為什么檢測大豆胰蛋白酶抑制因子
胰蛋白酶抑制因子是大豆中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子,現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的胰蛋白酶抑制因子有7~10種。胰蛋白酶抑制劑在大豆中的含量為2%左右。其中KTI含量為1.4%左右。當(dāng)動物采食未完全除去胰蛋白酶抑制因子的大豆飼料后,胰蛋白酶抑制因子一方面阻礙腸道內(nèi)蛋白水解酶的作用而使蛋白質(zhì)消化率下降,引起惡心、嘔吐等腸胃中毒癥狀;另一方面胰蛋白酶抑制因子還作用于胰腺本身,發(fā)生補償性反應(yīng),造成機能亢進,刺激胰腺分泌過多的胰腺酶,造成胰腺分泌的內(nèi)源性必需氨基酸缺乏,引起消化吸收功能失調(diào)或紊亂,嚴(yán)重時出現(xiàn)腹瀉,抑制機體生長和造成胰臟腫大等現(xiàn)象。

大豆胰蛋白酶抑制因子檢測方法
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測目前市場上主要是使用ELISA酶聯(lián)免疫法檢測,發(fā)酵豆粕中大豆胰蛋白酶抑制因子的測定,其原理是,胰蛋白酶可作用于底物苯甲酰一L-精氨酸對硝基苯胺(L-BAPA)結(jié)構(gòu)中精氨酸與對硝基苯胺的連接鍵,釋放出黃色的對硝基苯胺,該物質(zhì)在410nm有最大吸收值。大豆及其產(chǎn)品中的大豆胰蛋白酶抑制因子可抑制這一反應(yīng),使吸光度值下降,其下降程度與胰蛋白酶抑制劑活性成正比。用分光光度法在410nm處測定吸光度值的變化,可對胰蛋白酶抑制劑活性進行定量分析
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測步驟
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測是一個比較復(fù)雜的過程,這里就不詳細(xì)介紹了,下次找一個時間詳細(xì)的為大家介紹大豆胰蛋白酶抑制因子測定的詳細(xì)步驟,今天為簡單的介紹一下大豆胰蛋白酶抑制因子的步驟,主要分為9步
1、提取 2、稀釋 3、加樣 4、洗板 5、加酶 6、洗板 7、顯色 8、終止 9、計算
大豆胰蛋白酶抑制因子檢測注意事項
1、大豆胰蛋白酶抑制因子檢測試劑盒提前取出復(fù)溫
2、樣本粉碎到可以過60目篩,負(fù)責(zé)提取效率會降低
3、樣本和標(biāo)準(zhǔn)品需要做復(fù)孔,提高準(zhǔn)確度
4、移液器吸取不同試劑需要更換吸頭,防止交叉污染。