Cyanine3 NHS酯是一種常用的熒光探針，適用于熒光標記蛋白質(zhì)和其他含有游離氨基（-NH2）的生物分子。標記蛋白質(zhì)的過程通常如下：

1. 蛋白質(zhì)預處理：首先，要確保蛋白質(zhì)在標記前處于合適的條件，如適當?shù)木彌_液和pH值。如果蛋白質(zhì)含有含硫氨基酸（半胱氨酸，Cys），它們可以被用于標記。

2. 準備Cyanine3 NHS酯：將Cyanine3 NHS酯溶解在適當?shù)挠袡C溶劑中，使其得以與蛋白質(zhì)反應。

3. 反應：將Cyanine3 NHS酯加入到蛋白質(zhì)溶液中，讓其與蛋白質(zhì)中的游離氨基發(fā)生共價反應。這個過程通常在室溫下進行。

4. 去除未反應探針：反應結(jié)束后，使用某種方法（比如凝膠過濾、離心等）去除未反應的Cyanine3 NHS酯。

5. 蛋白質(zhì)的后續(xù)處理：標記后的蛋白質(zhì)可能需要進行純化和洗滌，以去除未反應探針和其他雜質(zhì)。

6. 熒光標記蛋白質(zhì)的檢測：使用熒光光譜儀或熒光顯微鏡等設備檢測標記后蛋白質(zhì)的熒光信號。

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5-FAM tetrazine

5-FAM Maleimide

FITC-MAL

CY3 hydrazide

Sulfo-CY5 maleimide

CY5.5 maleimide

FITC-PEG-NH2

5-FAM azide

CY5.5 COOH

Sulfo-CY5.5 COOH

FITC-Alkyne

FITC-NHS

FITC-COOH

Sulfo-CY5 NHS ester

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