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血清熱滅火介紹!胎牛血清是否需要熱滅活

2023-06-16 11:27 作者:健微講堂  | 我要投稿


胎牛血清是細胞培養(yǎng)液中,一種重要的添加成分,中含有諸多細胞生長因子,維生素,氨基酸等物質,在細胞貼壁、生長、繁殖過程中,發(fā)揮著重要作用。

我們常會看到,胎牛血清的標注上,有對產品滅活也有沒有滅活的。在我們的常規(guī)細胞實驗中,胎牛血清究竟要不要滅活?本期內容將做詳細解答。

01 血清的滅活指的是什么?

一般情況下,血清的滅活是在血清解凍后進行的,通過水浴加熱的方式來處理,溫度和時間控制在56℃加熱30分鐘或40℃加熱20分鐘。

02 為什么有的血清需要熱滅活?

很多人會認為,血清的熱滅活是為了殺滅血清中的細菌和病毒等微生物,其實不然。正規(guī)且合格的血清,會嚴格監(jiān)控血清中的微生物指標,理論上,用戶買到手的血清,都是無菌的、解凍后可直接使用的。

熱滅活顯然不是針對病原微生物,而是為了滅活血清中的補體。

補體是一種血清蛋白質,存在于人和脊椎動物血清及組織液中,不耐熱,可組成龐大的補體系統(tǒng),可介導免疫應答和炎癥反應。激活的補體參與溶解細胞過程,刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此,如果你的實驗涉及以下這些情況時,建議去除血清可能帶來的補體系統(tǒng)的干擾。

1、免疫學研究
2、誘導胚胎干細胞分化
3、利用昆蟲細胞研究病毒感染
4、培養(yǎng)平滑肌細胞
5、其他補體參與的細胞培養(yǎng)過程

因此,當涉及到一些對補體比較敏感實驗、且血清中補體濃度相對比較高,可能存在對實驗的影響時,需要考慮對血清進行熱滅活。

03 胎牛血清是否需要熱滅活?

正規(guī)的胎牛血清,要求對5-8月胎齡(一般牛在10個月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心臟穿刺的方法采血,隨后進行其他制備步驟,得到胎牛血清。因此:

靠譜的胎牛血清,沒有形成一個完整的補體系統(tǒng),不會真正地干預免疫!

血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對于血清而言,也是一種不小的傷害,會導致一些營養(yǎng)成分流失,進而影響細胞狀態(tài)。所以常規(guī)實驗中,選擇合規(guī)的胎牛血清,無需對血清進行熱滅活。

如果實驗中涉及到一些其他特殊的“神秘活性物質”,必須要滅活,根據血清廠家多年來總結的經驗,常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能多地保留營養(yǎng)成分。

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