Pluriselect提出了一種新的結(jié)腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)篩選方法，使用攜帶腫瘤相關(guān)EpCAM抗體的多鏈抗體。

該方法基于非磁性細(xì)胞分離技術(shù)。它不需要任何樣品預(yù)處理。EpCAM-pluriBead可以直接加入到全血樣品中。該方法也適用于從不同的生物流體中分離單細(xì)胞。此外，還可以通過增加樣品體積來提高其靈敏度。結(jié)合的EpCAM陽性結(jié)腸癌細(xì)胞可以容易地參與進(jìn)一步的分子遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)旨在檢測它們的突變狀態(tài)。在結(jié)腸癌的情況下，K-ras突變狀態(tài)是響應(yīng)抗癌治療的預(yù)測工具。因此，該新方法可被認(rèn)為是用于早期癌癥診斷的快速有效的工具。

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結(jié)果

圖1a和1b:用抗EpCAM-PE染色的Caco-2細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)分析。

圖2a:EPC am-pluriBead捕獲的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞。
圖2b:捕獲的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞，用鈣黃綠素染色。
圖2c:用50萬EpCAM-pluriBead在30 ml全血中摻入捕獲的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞

圖3:使用將BsTN1限制性酶位點(diǎn)引入PCR產(chǎn)物的引物，通過PCR篩選結(jié)腸癌細(xì)胞系中K-ras癌基因12h密碼子突變的存在。

圖4a:在已知數(shù)量的摻入Caco-2細(xì)胞中檢測K-ras原絲原的PCR方法的靈敏度。圖4b:通過EpCAM-pluriBead捕獲的從Caco-2細(xì)胞分離的EpCAM和CK 20 mRNA的RT-PCR產(chǎn)物(作為陰性對照，使用來自全血的mRNA)。

結(jié)論和展望

Pluriselect開發(fā)了一種新的方法，使用EpCAM-pluriBead檢測血液中的循環(huán)結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。捕獲的細(xì)胞適于與腫瘤形成相關(guān)的特定標(biāo)記的進(jìn)一步分子遺傳篩選。所開發(fā)的“原位免疫珠pcr”方法不需要預(yù)先的RNA/DNA分離，并且可以有效地節(jié)省分析時(shí)間。這項(xiàng)工作的進(jìn)一步目標(biāo)是提高方法的靈敏度，增加樣品體積，改變細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系和/或抗體特異性。