第三章???酶與輔酶

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一、知識(shí)要點(diǎn)

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在生物體的活細(xì)胞中每分每秒都進(jìn)行著成千上萬(wàn)的大量生物化學(xué)反應(yīng)，而這些反應(yīng)卻能有條不紊地進(jìn)行且速度非?？欤辜?xì)胞能同時(shí)進(jìn)行各種降解代謝及合成代謝，以滿足生命活動(dòng)的需要。生物細(xì)胞之所以能在常溫常壓下以極高的速度和很大的專(zhuān)一性進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，這是由于生物細(xì)胞中存在著生物催化劑——酶。酶是生物體活細(xì)胞產(chǎn)生的具有特殊催化能力的蛋白質(zhì)。

酶作為一種生物催化劑不同于一般的催化劑，它具有條件溫和、催化效率高、高度專(zhuān)一性和酶活可調(diào)控性等催化特點(diǎn)。酶可分為氧化還原酶類(lèi)、轉(zhuǎn)移酶類(lèi)、水解酶類(lèi)、裂解酶類(lèi)、異構(gòu)酶類(lèi)和合成酶類(lèi)六大類(lèi)。酶的專(zhuān)一性可分為相對(duì)專(zhuān)一性、絕對(duì)專(zhuān)一性和立體異構(gòu)專(zhuān)一性，其中相對(duì)專(zhuān)一性又分為基團(tuán)專(zhuān)一性和鍵專(zhuān)一性，立體異構(gòu)專(zhuān)一性又分為旋光異構(gòu)專(zhuān)一性、幾何異構(gòu)專(zhuān)一性和潛手性專(zhuān)一性。

影響酶促反應(yīng)速度的因素有底物濃度（S）、酶液濃度（E）、反應(yīng)溫度（T）、反應(yīng)pH值、激活劑（A）和抑制劑（I）等。其中底物濃度與酶反應(yīng)速度之間有一個(gè)重要的關(guān)系為米氏方程，米氏常數(shù)（Km）是酶的特征性常數(shù)，它的物理意義是當(dāng)酶反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用和反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用分別對(duì)Km值與Vmax的影響是各不相同的。

酶的活性中心有兩個(gè)功能部位，即結(jié)合部位和催化部位。酶的催化機(jī)理包括過(guò)渡態(tài)學(xué)說(shuō)、鄰近和定向效應(yīng)、鎖鑰學(xué)說(shuō)、誘導(dǎo)楔合學(xué)說(shuō)、酸堿催化和共價(jià)催化等，每個(gè)學(xué)說(shuō)都有其各自的理論依據(jù)，其中過(guò)渡態(tài)學(xué)說(shuō)或中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)為大家所公認(rèn)，誘導(dǎo)楔合學(xué)說(shuō)也為對(duì)酶的研究做了大量貢獻(xiàn)。

胰凝乳蛋白酶是胰臟中合成的一種蛋白水解酶，其活性中心由Asp102、His57及Ser195構(gòu)成一個(gè)電荷轉(zhuǎn)接系統(tǒng)，即電荷中繼網(wǎng)。其催化機(jī)理包括兩個(gè)階段，第一階段為水解反應(yīng)的?；A段，第二階段為水解反應(yīng)的脫酰階段。

同工酶和變構(gòu)酶是兩種重要的酶。同工酶是指有機(jī)體內(nèi)能催化相同的化學(xué)反應(yīng)，但其酶蛋白本身的理化性質(zhì)及生物學(xué)功能不完全相同的一組酶；變構(gòu)酶是利用構(gòu)象的改變來(lái)調(diào)節(jié)其催化活性的酶，是一個(gè)關(guān)鍵酶，催化限速步驟。

酶技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的，現(xiàn)在的基因工程、遺傳工程、細(xì)胞工程、酶工程、生化工程和生物工程等領(lǐng)域都有酶技術(shù)的參與。

維生素是生物生長(zhǎng)和生命活動(dòng)中所必需的微量有機(jī)物，在天然食物中含量極少，人體自身不能合成，必須從食物中攝取。這些維生素既不是構(gòu)成各種組織的主要原料，也不是體內(nèi)能量的來(lái)源，它們的生理功能主要是在物質(zhì)代謝過(guò)程中起著非常重要的作用，因代謝過(guò)程離不開(kāi)酶，而結(jié)合蛋白酶中的輔酶和輔基絕大多數(shù)都含有維生素成份。機(jī)體缺乏某種維生素時(shí)，代謝受阻，表現(xiàn)出維生素缺乏癥，而植物體內(nèi)能合成維生素。

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二、習(xí)??題

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（一）名詞解釋

1．米氏常數(shù)（Km值）

2．底物專(zhuān)一性（substrate specificity）

3．輔基（prosthetic group）

4．單體酶（monomeric enzyme）

5．寡聚酶（oligomeric enzyme）

6．多酶體系（multienzyme system）

7．激活劑（activator）

8．抑制劑（inhibitor inhibiton）

9．變構(gòu)酶（allosteric enzyme）

10．同工酶（isozyme）

11．誘導(dǎo)酶（induced enzyme）

12．酶原（zymogen）

13．酶的比活力（enzymatic compare energy）

14．活性中心（active center）

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（二）英文縮寫(xiě)符號(hào)

1．NAD+（nicotinamide adenine dinucleotide）?

2．FAD（flavin adenine dinucleotide）

3．THFA（tetrahydrofolic acid）

4．NADP+（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate）

5．FMN（flavin mononucleotide）

6．CoA（coenzyme A）

7．ACP（acyl carrier protein）??

8．BCCP（biotin carboxyl carrier protein）

9．PLP（pyridoxal phosphate）

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（三）填空題

1．酶是???????????產(chǎn)生的，具有催化活性的????????????????????????。

2．酶具有?????????、??????????、???????????和???????????等催化特點(diǎn)。

3．影響酶促反應(yīng)速度的因素有???????、????????、????????、???????、???????和???????????。

4．胰凝乳蛋白酶的活性中心主要含有??????、??????、和??????基，三者構(gòu)成一個(gè)氫鍵體系，使其中的???????上的??????成為強(qiáng)烈的親核基團(tuán)，此系統(tǒng)稱(chēng)為???????????系統(tǒng)或????????????????。

5．與酶催化的高效率有關(guān)的因素有??????????????、?????????????、?????????????、

???????????????????、???????????????????等。

6．丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脫氫酶的????????????????????抑制劑。

7．變構(gòu)酶的特點(diǎn)是：（1）???????????，（2）??????????????????????，它不符合一般的?????????，當(dāng)以V對(duì)[S]作圖時(shí)，它表現(xiàn)出??????型曲線，而非??????曲線。它是??????????????酶。

8．轉(zhuǎn)氨酶的輔因子為????即維生素????????。其有三種形式，分別為??????、????????、???????，其中??????在氨基酸代謝中非常重要，是???????、????????和?????????的輔酶。

9．葉酸以其??????起輔酶的作用，它有??????和??????兩種還原形式，后者的功能作為???????載體。

10．一條多肽鏈Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg經(jīng)胰蛋白酶水解可得到???個(gè)多肽。

11．全酶由?????和??????組成，在催化反應(yīng)時(shí)，二者所起的作用不同，其中??????決定酶的專(zhuān)一性和高效率，??????起傳遞電子、原子或化學(xué)基團(tuán)的作用。

12．輔助因子包括?????、??????和???????等。其中?????與酶蛋白結(jié)合緊密，需要??????除去，???????與酶蛋白結(jié)合疏松，可以用??????????除去。

13．T．R．Cech和S.Alman因各自發(fā)現(xiàn)了????????而共同獲得1989年的諾貝爾獎(jiǎng)（化學(xué)獎(jiǎng)）。

14．根據(jù)國(guó)際系統(tǒng)分類(lèi)法，所有的酶按所催化的化學(xué)反應(yīng)的性質(zhì)可分為六類(lèi)????????、????????、????????、????????、????????、????????和?????????。

15．根據(jù)國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)的規(guī)定，每一種酶都有一個(gè)唯一的編號(hào)。醇脫氫酶的編號(hào)是EC1.1.1.1，EC代表?????????????????，4個(gè)數(shù)字分別代表????????????、???????????????、????????????和????????????。

16．根據(jù)酶的專(zhuān)一性程度不同，酶的專(zhuān)一性可以分為????????、????????、????????????和?????????????。?

17．酶的活性中心包括?????????????和??????????兩個(gè)功能部位，其中???????????直接與底物結(jié)合，決定酶的專(zhuān)一性，????????????????是發(fā)生化學(xué)變化的部位，決定催化反應(yīng)的性質(zhì)。

18．酶活力是指???????????，一般用????????????????表示。

19．通常討論酶促反應(yīng)的反應(yīng)速度時(shí)，指的是反應(yīng)的????????速度，即?????????時(shí)測(cè)得的反應(yīng)速度。

20．解釋別構(gòu)酶作用機(jī)理的假說(shuō)有??????????模型和?????????模型兩種。

21．固定化酶的優(yōu)點(diǎn)包括??????????????????，???????????????????，???????????????????等。

22．pH值影響酶活力的原因可能有以下幾方面：影響????????????????????????????，影響????????????????????????????，影響??????????????????????????????????。

23．溫度對(duì)酶活力影響有以下兩方面：一方面?????????????????????，另一方面?????????????????。

24．脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有?????????????專(zhuān)一性；甘油激酶可以催化甘油磷酸化，僅生成甘油-1-磷酸一種底物，因此它具有?????????????專(zhuān)一性。

25．酶促動(dòng)力學(xué)的雙倒數(shù)作圖（Lineweaver-Burk作圖法），得到的直線在橫軸的截距為??????????，縱軸上的截距為???????????????????????。

26．磺胺類(lèi)藥物可以抑制????????????????????????酶，從而抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。

27．判斷一個(gè)純化酶的方法優(yōu)劣的主要依據(jù)是酶的?????????????和??????????????。

28．維生素是維持生物體正常生長(zhǎng)所必需的一類(lèi)_________有機(jī)物質(zhì)。主要作用是作為_(kāi)________的組分參與體內(nèi)代謝。

29．根據(jù)維生素的____________性質(zhì)，可將維生素分為兩類(lèi)，即____________和____________。

30．維生素B1由__________環(huán)與___________環(huán)通過(guò)__________相連，主要功能是以__________形式，作為_(kāi)___________和____________的輔酶，轉(zhuǎn)移二碳單位。

31．維生素B2的化學(xué)結(jié)構(gòu)可以分為二部分，即____________和____________，其中____________原子上可以加氫，因此有氧化型和還原型之分。

32．維生素B3由__________與_________通過(guò)___________相連而成，可以與__________，_________和___________共同組成輔酶___________，作為各種____________反應(yīng)的輔酶，傳遞____________。

33．維生素B5是_________衍生物，有_________，_________兩種形式，其輔酶形式是________與_________，作為_(kāi)______酶的輔酶，起遞______作用。

34．生物素可看作由____________，____________，____________三部分組成，是____________的輔酶，在____________的固定中起重要的作用。

35．維生素B12是唯一含____________的維生素，由____________，____________和氨基丙酸三部分組成，有多種輔酶形式。其中____________是變位酶的輔酶，____________是轉(zhuǎn)甲基酶的輔酶。

36．維生素C是____________的輔酶，另外還具有____________作用等。

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（四）選擇題

1．酶的活性中心是指：

A．酶分子上含有必需基團(tuán)的肽段??????B．酶分子與底物結(jié)合的部位

C．酶分子與輔酶結(jié)合的部位????????D．酶分子發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵性結(jié)構(gòu)區(qū)

E．酶分子有絲氨酸殘基、二硫鍵存在的區(qū)域

2．酶催化作用對(duì)能量的影響在于：

A．增加產(chǎn)物能量水平???????B．降低活化能???????C．降低反應(yīng)物能量水平

D．降低反應(yīng)的自由能???????E．增加活化能

3．競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑作用特點(diǎn)是：

A．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)激活劑????????B．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心

???C．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的輔基??????D．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的必需基團(tuán)；?

E．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的變構(gòu)劑

4．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑抑制程度與下列那種因素?zé)o關(guān)：

A．作用時(shí)間????????????B．抑制劑濃度???????????C．底物濃度

D．酶與抑制劑的親和力的大小???????E．酶與底物的親和力的大小

5．哪一種情況可用增加[S]的方法減輕抑制程度：

A．不可逆抑制作用?????B．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用?????C．非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用

D．反競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用?????E．無(wú)法確定

6．酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑可以使：

A．Vmax減小，Km減小???????B．Vmax增加，Km增加???

C．Vmax不變，Km增加???????D．Vmax不變，Km減小???

E．Vmax減小，Km增加

7．下列常見(jiàn)抑制劑中，除哪個(gè)外都是不可逆抑制劑：

A ?有機(jī)磷化合物????????????B ?有機(jī)汞化合物????????????C ?有機(jī)砷化合物?

D ?氰化物??????????????????E ?磺胺類(lèi)藥物

8．酶的活化和去活化循環(huán)中，酶的磷酸化和去磷酸化位點(diǎn)通常在酶的哪一種氨基酸殘基上：

A．天冬氨酸???????????Ｂ．脯氨酸?????????Ｃ．賴(lài)氨酸??

D．絲氨酸?????????????Ｅ．甘氨酸

9．在生理?xiàng)l件下，下列哪種基團(tuán)既可以作為H+的受體，也可以作為H+的供體：

A．His的咪唑基??????B．Lys的ε氨基??????C．Arg的胍基

D．Cys的巰基????????E．Trp的吲哚基

10．對(duì)于下列哪種抑制作用，抑制程度為50%時(shí)，[I]=Ki ：

A．不可逆抑制作用???????????B．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用?

C．非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用?????D．反競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用?????E．無(wú)法確定

11．下列輔酶中的哪個(gè)不是來(lái)自于維生素：

A．CoA ?????B．CoQ ??C．PLP ????D．FH2 E．FMN

12．下列敘述中哪一種是正確的：

A．所有的輔酶都包含維生素組分?

B．所有的維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分

C．所有的B族維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分

D．只有B族維生素可以作為輔酶或輔酶的組分

13．多食糖類(lèi)需補(bǔ)充：

A．維生素B1 ???????B．維生素B2 ?? C．維生素B5???

D．維生素B6???????E．維生素B7

14．多食肉類(lèi)，需補(bǔ)充：

A．維生素B1???????B．維生素B2 ?????C．維生素B5???

D．維生素B6???????E．維生素B7

15．以玉米為主食，容易導(dǎo)致下列哪種維生素的缺乏：

A．維生素B1 ???????B．維生素B2 ?????C．維生素B5??

D．維生素B6???????E．維生素B7

16．下列化合物中除哪個(gè)外，常作為能量合劑使用：

A．CoA ????B．ATP ????C．胰島素?????D．生物素

17．下列化合物中哪個(gè)不含環(huán)狀結(jié)構(gòu)：

A．葉酸??????B．泛酸??????C．煙酸??????D．生物素?????E．核黃素

18．下列化合物中哪個(gè)不含腺苷酸組分：

A．CoA ?????B．FMN ?????C．FAD ?????D．NAD+ ??E．NADP+

19．需要維生素B6作為輔酶的氨基酸反應(yīng)有：

A．成鹽、成酯和轉(zhuǎn)氨??????? ?B．成酰氯反應(yīng)??????C．烷基化反應(yīng)?

D．成酯、轉(zhuǎn)氨和脫羧??????????E．轉(zhuǎn)氨、脫羧和消旋

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（五）是非判斷題

（?）1．酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度無(wú)關(guān)。?????

（?）2．當(dāng)?shù)孜锾幱陲柡退綍r(shí)，酶促反應(yīng)的速度與酶濃度成正比。???????

（?）3．某些酶的Km由于代謝產(chǎn)物存在而發(fā)生改變，而這些代謝產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上與底物無(wú)關(guān)。

（?）4．某些調(diào)節(jié)酶的V-[S]的S形曲線表明，酶與少量底物的結(jié)合增加了酶對(duì)后續(xù)底物分子的親和力。

（?）5．測(cè)定酶活力時(shí)，底物濃度不必大于酶濃度。

（?）6．測(cè)定酶活力時(shí)，一般測(cè)定產(chǎn)物生成量比測(cè)定底物消耗量更為準(zhǔn)確。

（?）7．在非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在下，加入足量的底物，酶促的反應(yīng)能夠達(dá)到正常Vmax。

（?）8．碘乙酸因可與活性中心-SH以共價(jià)鍵結(jié)合而抑制巰基酶，而使糖酵解途徑受阻。

（?）9．誘導(dǎo)酶是指當(dāng)細(xì)胞加入特定誘導(dǎo)物后，誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶，這種誘導(dǎo)物往往是該酶的產(chǎn)物。

（?）10．酶可以促成化學(xué)反應(yīng)向正反應(yīng)方向轉(zhuǎn)移。

（?）11．對(duì)于可逆反應(yīng)而言，酶既可以改變正反應(yīng)速度，也可以改變逆反應(yīng)速度。

（?）12．酶只能改變化學(xué)反應(yīng)的活化能而不能改變化學(xué)反應(yīng)的平衡常數(shù)。

（?）13．酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是酶的定量測(cè)定。

（?）14．從鼠腦分離的己糖激酶可以作用于葡萄糖（Km=6×10-6mol/L）或果糖（Km=2×10-3mol/L），則己糖激酶對(duì)果糖的親和力更高。

（?）15．Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶濃度無(wú)關(guān)

（?）16．Km是酶的特征常數(shù)，在任何條件下，Km是常數(shù)。

（?）17．Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶的底物無(wú)關(guān)。

（?）18．一種酶有幾種底物就有幾種Km值。

（?）19．當(dāng)[S]>>Km時(shí)，?V趨向于Vmax，此時(shí)只有通過(guò)增加[E]來(lái)增加V。

（?）20．酶的最適pH值是一個(gè)常數(shù)，每一種酶只有一個(gè)確定的最適pH值。

（?）21．酶的最適溫度與酶的作用時(shí)間有關(guān)，作用時(shí)間長(zhǎng)，則最適溫度高，作用時(shí)間短，則最適溫度低。

（?）22．金屬離子作為酶的激活劑，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。

（?）23．增加不可逆抑制劑的濃度，可以實(shí)現(xiàn)酶活性的完全抑制。

（?）24．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑一定與酶的底物結(jié)合在酶的同一部位。

（?）25．由1g粗酶制劑經(jīng)純化后得到10mg電泳純的酶制劑，那么酶的比活較原來(lái)提高了100倍。

（?）26．酶反應(yīng)的最適pH值只取決于酶蛋白本身的結(jié)構(gòu)。

（?）27．所有B族維生素都是雜環(huán)化合物。

（?）28．B族維生素都可以作為輔酶的組分參與代謝。

（?）29．脂溶性維生素都不能作為輔酶參與代謝。

（?）30．除了動(dòng)物外，其他生物包括植物、微生物的生長(zhǎng)也有需要維生素的現(xiàn)象。

（?）31．植物的某些器官可以自行合成某些維生素，并供給植物整體生長(zhǎng)所需。

（?）32．維生素E不容易被氧化，因此可做抗氧化劑。

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（六）問(wèn)答題及計(jì)算題

1．怎樣證明酶是蛋白質(zhì)？

2．簡(jiǎn)述酶作為生物催化劑與一般化學(xué)催化劑的共性及其個(gè)性？

3．簡(jiǎn)述Cech及Altman是如何發(fā)現(xiàn)具有催化活性的RNA的？

4．試指出下列每種酶具有哪種類(lèi)型的專(zhuān)一性？

（1）脲酶（只催化尿素NH2CONH2的水解，但不能作用于NH2CONHCH3）；

（2）β-D-葡萄糖苷酶（只作用于β-D-葡萄糖形成的各種糖甘，但不能作用于其他的糖苷，例如果糖苷）；

（3）酯酶（作用于R1COOR2的水解反應(yīng)）；

（4）L-氨基酸氧化酶（只作用于L-氨基酸，而不能作用于D-氨基酸）；

（5）反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸（延胡索酸），而不能作用于順丁烯二酸（馬來(lái)酸）]；

（6）甘油激酶（催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸）。

5．稱(chēng)取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液測(cè)得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液測(cè)酶活力，結(jié)果每小時(shí)可以水解酪蛋白產(chǎn)生1500μg酪氨酸，假定1個(gè)酶活力單位定義為每分鐘產(chǎn)生1μg酪氨酸的酶量，請(qǐng)計(jì)算：

（1）酶溶液的蛋白濃度及比活。

（2）每克純酶制劑的總蛋白含量及總活力。

6．Vmax與米氏常數(shù)可以通過(guò)作圖法求得，試比較V~[S]圖，雙倒數(shù)圖，V~V/[S]作圖，[S]/V~[S]作圖及直接線性作圖法求Vmax和Km的優(yōu)缺點(diǎn)？

7．（1）為什么某些腸道寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)在體內(nèi)不會(huì)被消化道內(nèi)的胃蛋白酶、胰蛋白酶消化？

???（2）為什么蠶豆必須煮熟后食用，否則容易引起不適？

8．使用下表數(shù)據(jù)，作圖判斷抑制劑類(lèi)型（競(jìng)爭(zhēng)性還是非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑）？

9．甘油醛-3-磷酸脫氫酶（Mr 150 000）的活性位點(diǎn)有一個(gè)Cys殘基，假定為使5mL的1.2mg/mL的酶溶液完全失活，需要3.0×10 -2mg碘乙酰胺（Mr 185），計(jì)算酶的催化亞基的數(shù)目？

10．對(duì)活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)測(cè)定表明，酶的底物濃度通常就在這種底物的Km值附近，請(qǐng)解釋其生理意義？為什么底物濃度不是大大高于Km或大大低于Km呢？

11．有時(shí)別構(gòu)酶的活性可以被低濃度的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑激活，請(qǐng)解釋?zhuān)?/p>

12．（1）對(duì)于一個(gè)遵循米氏動(dòng)力學(xué)的酶而言，當(dāng)[S]=Km時(shí)，若V=35μmol/min，Vmax是多少μmol/min？

???（2）當(dāng)[S]=2×10?-5mo/L，V=40μmol/min，這個(gè)酶的Km是多少？

???（3）若I表示競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，KI=4×10-5mol/L，當(dāng)[S]=3×10-2mol/L和[I]=3×10-5mol/L時(shí)，V是多少？

???（4）若I是非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，在KI、[S]和[I]條件與（3）中相同時(shí)，V是多少？

（2）計(jì)算[S]=1.0×10-6mol/L和[S]=1.0×10-1mol/L時(shí)的v？

（3）計(jì)算[S]=2.0×10-3mol/L或[S]=2.0×10-6mol/L時(shí)最初5min內(nèi)的產(chǎn)物總量？

（4）假如每一個(gè)反應(yīng)體系中酶濃度增加到4倍時(shí)，Km，Vmax是多少？

13．在很多酶的活性中心均有His殘基參與，請(qǐng)解釋?zhuān)?/p>

22．將下列化學(xué)名稱(chēng)與B族維生素及其輔酶形式相匹配？

（A）泛酸；（B）煙酸；（C）葉酸；（D）硫胺素；（E）核黃素；（F）吡哆素；（G）生物素。

（1）B1?；（2）B2?；（3）B3 ；（4）B5 ；（5）B6?；?（6）B7 ；（7）B11；?（8）B12。

(Ⅰ)FMN；(Ⅱ)FAD；(Ⅲ)NAD+；(Ⅳ)NADP+；(Ⅴ)CoA；(Ⅵ)PLP；(Ⅶ)PMP；(Ⅷ)FH2，F(xiàn)H4；(Ⅸ)TPP。

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三、習(xí)題解答

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（一）名詞解釋

1．米氏常數(shù)（Km值）：用Ｋm值表示，是酶的一個(gè)重要參數(shù)。Ｋm值是酶反應(yīng)速度（V）達(dá)到最大反應(yīng)速度（Vmax）一半時(shí)底物的濃度（單位M或mM）。米氏常數(shù)是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，不受底物濃度和酶濃度的影響。

2．底物專(zhuān)一性：酶的專(zhuān)一性是指酶對(duì)底物及其催化反應(yīng)的嚴(yán)格選擇性。通常酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)或一類(lèi)相似的反應(yīng)，不同的酶具有不同程度的專(zhuān)一性，酶的專(zhuān)一性可分為三種類(lèi)型：絕對(duì)專(zhuān)一性、相對(duì)專(zhuān)一性、立體專(zhuān)一性。

3．輔基：酶的輔因子或結(jié)合蛋白質(zhì)的非蛋白部分，與酶或蛋白質(zhì)結(jié)合得非常緊密，用透析法不能除去。

4．單體酶：只有一條多肽鏈的酶稱(chēng)為單體酶，它們不能解離為更小的單位。分子量為13,000——35,000。

5．寡聚酶：有幾個(gè)或多個(gè)亞基組成的酶稱(chēng)為寡聚酶。寡聚酶中的亞基可以是相同的，也可以是不同的。亞基間以非共價(jià)鍵結(jié)合，容易為酸堿，高濃度的鹽或其它的變性劑分離。寡聚酶的分子量從35 000到幾百萬(wàn)。

6．多酶體系：由幾個(gè)酶彼此嵌合形成的復(fù)合體稱(chēng)為多酶體系。多酶復(fù)合體有利于細(xì)胞中一系列反應(yīng)的連續(xù)進(jìn)行，以提高酶的催化效率，同時(shí)便于機(jī)體對(duì)酶的調(diào)控。多酶復(fù)合體的分子量都在幾百萬(wàn)以上。

7．激活劑：凡是能提高酶活性的物質(zhì)，都稱(chēng)激活劑，其中大部分是離子或簡(jiǎn)單的有機(jī)化合物。

8．抑制劑：能使酶的必需基團(tuán)或酶活性部位中的基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)改變而降低酶的催化活性甚至使酶的催化活性完全喪失的物質(zhì)。

9．變構(gòu)酶：或稱(chēng)別構(gòu)酶，是代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶，它的催化活性受其三維結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象變化的調(diào)節(jié)。

10．同工酶：是指有機(jī)體內(nèi)能夠催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)組成卻有所不同的一組酶。

11．誘導(dǎo)酶：是指當(dāng)細(xì)胞中加入特定誘導(dǎo)物后誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶，它的含量在誘導(dǎo)物存在下顯著增高，這種誘導(dǎo)物往往是該酶底物的類(lèi)似物或底物本身。

12．酶原：酶的無(wú)活性前體，通常在有限度的蛋白質(zhì)水解作用后，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂谢钚缘拿浮?/p>

13．酶的比活力：比活力是指每毫克蛋白質(zhì)所具有的活力單位數(shù)，可以用下式表示：

?

14．活性中心：酶分子中直接與底物結(jié)合，并催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的部位，稱(chēng)為酶的活性中心。

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（二）英文縮寫(xiě)符號(hào)

1．NAD+?（nicotinamide adenine dinucleotide）：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；輔酶Ⅰ。

2．FAD（flavin adenine dinucleotide）：黃素腺嘌呤二核苷酸。

3．THFA（tetrahydrofolic acid）：四氫葉酸。

4．NADP+（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate）：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸；輔酶Ⅱ。

5．FMN（flavin mononucleotide）：黃素單核苷酸。

6．CoA（coenzyme A）：輔酶A。

7．ACP（acyl carrier protein）：?；d體蛋白。

8．BCCP（biotin carboxyl carrier protein）：生物素羧基載體蛋白。

9．PLP（pyridoxal phosphate）：磷酸吡哆醛。

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（三）填空題

1．活細(xì)胞；蛋白質(zhì)??

2．高效性；專(zhuān)一性；作用條件溫和；受調(diào)控??

3．[E]；[S]；pH；T（溫度）；I（抑制劑）；A（激活劑）

4．Ser195；His57；Asp102；Ser195；氧原子；電荷轉(zhuǎn)接；電荷中繼網(wǎng)

5．鄰近效應(yīng)；定向效應(yīng)；誘導(dǎo)應(yīng)變；共價(jià)催化；活性中心酸堿催化

6．競(jìng)爭(zhēng)性

7．由多個(gè)亞基組成；除活性中心外還有變構(gòu)中心；米氏方程；S；雙；寡聚酶

8．磷酸吡哆醛；VB6；磷酸吡哆醛；磷酸吡哆胺；磷酸吡哆醇；磷酸吡哆醛；轉(zhuǎn)氨酶；脫羧酶；消旋酶

9．還原性產(chǎn)物；DHFA；THFA；一碳單位

10．三

11．酶蛋白；輔助因子；酶蛋白；輔助因子

12．輔酶；輔基；金屬離子；輔基；化學(xué)方法處理；輔酶；透析法

13．核酶（具有催化能力的RNA）

14．氧化還原酶類(lèi)；轉(zhuǎn)移酶類(lèi)；水解酶類(lèi)；裂合酶類(lèi)；異構(gòu)酶類(lèi)；合成酶類(lèi)

15．酶學(xué)委員會(huì)；氧化還原酶類(lèi)；作用-CHOH基團(tuán)的亞類(lèi)；受體NAD+或NADP+的亞亞類(lèi)；序號(hào)為1

16．絕對(duì)專(zhuān)一性；相對(duì)專(zhuān)一性；立體專(zhuān)一性

17．結(jié)合部位；催化部位；結(jié)合部位；催化部位

18．酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力；一定條件下，酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度

19．初；底物消耗量<5%

20．齊變；序變

21．穩(wěn)定性好；可反復(fù)使用；易于與反應(yīng)液分離

22．底物分子的解離狀態(tài)；酶分子的解離狀態(tài)；中間復(fù)合物的解離狀態(tài)

23．溫度升高，可使反應(yīng)速度加快；溫度太高，會(huì)使酶蛋白變性而失活

24．絕對(duì)；立體

25．-1/Km；1/Vmax

26．二氫葉酸合成酶

27．比活力；總活力

28．微量；輔酶

29．溶解；水溶性維生素；脂溶性維生素

30．嘧啶；噻唑；亞甲基；TPP；脫羧酶；轉(zhuǎn)酮酶

31．二甲基異咯嗪基；核糖醇基；1，10位氮

32．丁酸衍生物；β-丙氨酸；酰胺鍵；巰基乙胺；焦磷酸；3’-AMP；CoA；?；?；酰基

33．吡啶；煙酸；煙酰胺；NAD+；NADP+；脫氫；氫

34．尿素；噻吩；戊酸側(cè)鏈；羧化酶；CO2

35．金屬元素；咕啉環(huán)；核苷酸；5’-脫氧腺苷鈷胺素；甲基鈷胺素

36．羥化；解毒

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（四）選擇題

1．D：酶活性中心有一個(gè)結(jié)合部位和一個(gè)催化部位，分別決定專(zhuān)一性和催化效率，是酶分子發(fā)揮作用的一個(gè)關(guān)鍵性小區(qū)域。

2．B：酶是生物催化劑，在反應(yīng)前后沒(méi)有發(fā)生變化，酶之所以能使反應(yīng)快速進(jìn)行，就是它降低了反應(yīng)的活化能。

3．B：酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與酶作用的底物的結(jié)構(gòu)基本相似，所以它與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，從而抑制酶的活性，阻止酶與底物反應(yīng)。

4．A：競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑抑制程度與底物濃度、抑制劑濃度、酶與抑制劑的親和力、酶與底物的親和力有關(guān)，與作用時(shí)間無(wú)關(guān)。??

5．B：競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用可用增加[S]的方法減輕抑制程度。

6．C：酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑可以使Vmax不變，Km增加。

7．E：磺胺類(lèi)藥物是競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑。

8．D：蛋白激酶可以使ATP分子上的γ-磷酸轉(zhuǎn)移到一種蛋白質(zhì)的絲氨酸殘基的羥基上，在磷酸基的轉(zhuǎn)移過(guò)程中，常伴有酶蛋白活性的變化，例如肝糖原合成酶的磷酸化與脫磷酸化兩種形式對(duì)糖原合成的調(diào)控是必需的。

9．A：His咪唑基的pK值在6.0~7.0之間，在生理?xiàng)l件下一半解離，一半未解離，解離的部分可以作為H+的受體，未解離的部分可以作為H+的供體。

10．C：對(duì)于非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用，抑制程度為50%時(shí)，[I]=Ki。

11．B：CoQ不屬于維生素，CoA是維生素B3的衍生物，PLP是維生素B6的衍生物，F(xiàn)H2是維生素B11的衍生物，F(xiàn)MN是維生素B2的衍生物。

12．C：很多輔酶不包含維生素組分，如CoQ等；有些維生素不可以作為輔酶或輔酶的組分，如維生素E等；所有的B族維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分，但并不是只有B族維生素可以作為輔酶或輔酶的組分，如維生素K也可以作為γ-羧化酶的輔酶。

13．A：維生素B1以輔酶TPP的形式參與代謝，TPP是丙酮酸脫氫酶系、α-酮戊二酸脫氫酶系、轉(zhuǎn)酮酶等的輔酶，因此與糖代謝關(guān)系密切。多食糖類(lèi)食物消耗的維生素B1增加，需要補(bǔ)充。

14．D：維生素B6以輔酶PLP，PMP的形式參與氨基酸代謝，是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶、脫羧酶和消旋酶的輔酶，因此多食用蛋白質(zhì)類(lèi)食物消耗的維生素B6增加，需要補(bǔ)充。

15．C：玉米中缺少合成維生素B5的前體—色氨酸，因此以玉米為主食，容易導(dǎo)致維生素B5的缺乏。

16．D：CoA、ATP和胰島素常作為能量合劑使用。

17．B：泛酸是B族維生素中唯一不含環(huán)狀結(jié)構(gòu)的化合物。

18．B：FMN是黃素單核苷酸，不含腺苷酸組分。

19．E：VB6以輔酶PLP，PMP的形式參與氨基酸代謝，是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶、脫羧酶和消旋酶的輔酶。

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（五）是非判斷題

1．錯(cuò)：酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度是有關(guān)的，當(dāng)其它反應(yīng)條件滿足時(shí)，酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度成正比。

2．對(duì)：當(dāng)?shù)孜镒銐驎r(shí)，酶濃度增加，酶促反應(yīng)速度也加快，成正比。

3．對(duì)：Km是酶的特征性常數(shù)，反應(yīng)的代謝產(chǎn)物可能影響酶性質(zhì)的改變從而影響Km的變化，而這些代謝產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上并不與底物一致。

4．對(duì)：調(diào)節(jié)酶大多數(shù)為變構(gòu)酶，變構(gòu)酶是利用構(gòu)象的改變來(lái)調(diào)節(jié)其催化活性的酶，是一個(gè)關(guān)鍵酶，催化限速步驟，當(dāng)少量底物與酶結(jié)合后，使酶的構(gòu)象發(fā)生改變從而能結(jié)合更多的底物分子。

5．錯(cuò)：底物應(yīng)該過(guò)量才能更準(zhǔn)確的測(cè)定酶的活力。

6．對(duì)：產(chǎn)物生成量比底物消耗量更易測(cè)得且準(zhǔn)確。

7．錯(cuò)：非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑只和酶與底物反應(yīng)的中間產(chǎn)物結(jié)合，酶促反應(yīng)的Vmax是減小的，不能通過(guò)增加底物來(lái)達(dá)到正常的Vmax。而競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑可以通過(guò)增加底物的濃度來(lái)達(dá)到Vmax。

8．對(duì)：碘乙酸是糖酵解過(guò)程中的一個(gè)抑制劑，與半胱氨酸或蛋氨酸的-SH結(jié)合，使糖酵解途徑受阻。

9．錯(cuò)：誘導(dǎo)物一般為酶的作用底物，可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生特定的誘導(dǎo)酶。

10．錯(cuò)：對(duì)于可逆反應(yīng)而言，酶既可以改變正反應(yīng)速度，也可以改變逆反應(yīng)速度，但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)。

11．對(duì)。

12．對(duì)：酶通過(guò)降低化學(xué)反應(yīng)的活化能加快化學(xué)的反應(yīng)速度，但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡常數(shù)。

13．對(duì)：檢查酶的含量及存在，不能直接用重量或體積來(lái)表示，常用它催化某一特定反應(yīng)的能力來(lái)表示，即用酶的活力來(lái)表示，因此酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是酶的定量測(cè)定。

14．錯(cuò)：Km值可以近似地反應(yīng)酶與底物親和力，Km越低，親和力越高，因此已糖激酶對(duì)葡萄糖的親和力更高。

15．對(duì)：Km是酶的特征常數(shù)之一，一般只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶濃度無(wú)關(guān)。不同的酶，Km值不同。????

16．錯(cuò)：Km作為酶的特征常數(shù)，只是對(duì)一定的底物、一定的pH值、一定的溫度條件而言。

17．錯(cuò)：見(jiàn)上題，同一種酶有幾種底物就有幾種Km值，其中Km值最小的底物一般稱(chēng)為酶的最適底物。

18．對(duì)。

19．對(duì)：當(dāng)[S]>>Km時(shí)，V趨向于Vmax，因此v=K3[E]，所以可以通過(guò)增加[E]來(lái)增加V。

20．錯(cuò)：酶的最適pH值有時(shí)因底物種類(lèi)、濃度及緩沖液成分不同而不同，并不是一個(gè)常數(shù)。

21．錯(cuò)：酶最適溫度與酶的作用時(shí)間有關(guān)，作用時(shí)間越長(zhǎng)，則最適溫度低，作用時(shí)間短，則最適溫度高。

22．對(duì)：金屬離子作為酶的激活劑，有的可以相互取代，如Mg2+作為激酶等的激活劑可以被Mn2+取代；有的可以相互拮抗，如Na+抑制K+?的激活作用。

23．對(duì)：不可逆抑制劑通常以比較牢固的共價(jià)鍵與酶結(jié)合，而使酶失活，不能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而恢復(fù)酶的活性，因此增加不可逆抑制劑的濃度，可以實(shí)現(xiàn)酶活性的完全抑制。

24．錯(cuò)：競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑可以與酶的底物結(jié)合在酶的同一部位，也可以與酶的底物結(jié)合在酶的不同部位，由于空間位阻或構(gòu)象改變的原因而不能同時(shí)結(jié)合。

25．錯(cuò)：因?yàn)椴恢兰兓昂蟮谋然罘謩e是多少，因此無(wú)法計(jì)算比活的提高倍數(shù)。

36．錯(cuò)：酶反應(yīng)的最適pH值不僅取決于酶蛋白本身的結(jié)構(gòu)，還與底物種類(lèi)、濃度及緩沖液成分有關(guān)。

27．錯(cuò)：B族維生素中維生素B3不含環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其余都是雜環(huán)化合物。

28．對(duì)：所有B族維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分參與代謝。

29．錯(cuò)：維生素K可以作為γ-羥化酶的輔酶，促進(jìn)凝血。

30．對(duì)：如酵母的生長(zhǎng)需要維生素B6等，植物的生長(zhǎng)也有需要維生素的現(xiàn)象。

31．對(duì)：如豌豆子葉可以合成維生素C，供整體使用；去除子葉后，則豌豆子葉生長(zhǎng)不良。

32．錯(cuò)：維生素E極易被氧化，因此可做抗氧化劑。

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（六）問(wèn)答題及計(jì)算題（解題要點(diǎn)）

1．答：（1）酶能被酸、堿及蛋白酶水解，水解的最終產(chǎn)物都是氨基酸，證明酶是由氨基酸組成的。

（2）酶具有蛋白質(zhì)所具有的顏色反應(yīng)，如雙縮脲反應(yīng)、茚三酮反應(yīng)、米倫反應(yīng)、乙醛酸反應(yīng)。

（3）一切能使蛋白質(zhì)變性的因素，如熱、酸堿、紫外線等，同樣可以使酶變性失活。

（4）酶同樣具有蛋白質(zhì)所具有的大分子性質(zhì)，如不能通過(guò)半透膜、可以電泳等。

（5）酶同其他蛋白質(zhì)一樣是兩性電解質(zhì)，并有一定的等電點(diǎn)。

總之，酶是由氨基酸組成的，與其他已知的蛋白質(zhì)有著相同的理化性質(zhì)，所以酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

2．答：（1）共性：用量少而催化效率高；僅能改變化學(xué)反應(yīng)的速度，不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)，酶本身在化學(xué)反應(yīng)前后也不改變；可降低化學(xué)反應(yīng)的活化能。

??（2）個(gè)性：酶作為生物催化劑的特點(diǎn)是催化效率更高，具有高度的專(zhuān)一性，容易失活，活力受條件的調(diào)節(jié)控制，活力與輔助因子有關(guān)。

3．（1）1982年，美國(guó)的T.Cech發(fā)現(xiàn)原生動(dòng)物四膜蟲(chóng)的26S rRNA前體能夠在完全沒(méi)有蛋白質(zhì)的情況下，自我加工、拼接，得到成熟的rRNA。

??（2）1983年，S.Atman和Pace實(shí)驗(yàn)室研究RNase P時(shí)發(fā)現(xiàn)，將RNase P的蛋白質(zhì)與RNA分離，分別測(cè)定，發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)部分沒(méi)有催化活性，而RNA部分具有與全酶相同的催化活性。

??（3）1986年，T.Cech發(fā)現(xiàn)在一定條件下，L19 RNA可以催化Poly C的切割與連接。

4．答：（1）絕對(duì)專(zhuān)一性；（2）相對(duì)專(zhuān)一性（族專(zhuān)一性）；（3）相對(duì)專(zhuān)一性（鍵專(zhuān)一性）；

（4）立體專(zhuān)一性（旋光異構(gòu)專(zhuān)一性）；（5）立體專(zhuān)一性（順?lè)串悩?gòu)專(zhuān)一性）；（6）立體專(zhuān)一性（識(shí)別從化學(xué)角度看完全對(duì)稱(chēng)的兩個(gè)基團(tuán)）。

5．答：（1）蛋白濃度=0.2×6.25mg/2mL=0.625mg/mL；

??（2）比活力=（1500/60×1ml/0.1mL）÷0.625mg/mL=400U/mg；

??（3）總蛋白=0.625mg/mL×1000mL=625mg；

??（4）總活力=625mg×400U/mg=2.5×105U。

6．答：（1）V~[S]圖是雙曲線的一支，可以通過(guò)其漸近線求Vmax，V=1/2Vmax時(shí)對(duì)應(yīng)的[S]為Km；優(yōu)點(diǎn)是比較直觀，缺點(diǎn)是實(shí)際上測(cè)定時(shí)不容易達(dá)到Vmax，所以測(cè)不準(zhǔn)。

??（2）1/V~1/[S]圖是一條直線，它與縱軸的截距為1/Vmax，與橫軸的截距為-1/Km，優(yōu)點(diǎn)是使用方便，Vmax和Km都較容易求，缺點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)得到的點(diǎn)一般集中在直線的左端，作圖時(shí)直線斜率稍有偏差，Km就求不準(zhǔn)。

??（3）V~V/[S]圖也是一條直線，它與縱軸的截距為Vmax，與橫軸的截距為Vmax/Km，斜率即為-Km，優(yōu)點(diǎn)是求Km比較方便，缺點(diǎn)是作圖前計(jì)算較繁。

??（4）[S]/V~[S]圖也是一條直線，它與縱軸的截距為Km/Vmax，與橫軸的截距為-Km，優(yōu)缺點(diǎn)與V~V/[S]圖相似。

??（5）直接線性作圖法是一組交于一點(diǎn)的直線，交點(diǎn)的橫坐標(biāo)為Km，縱坐標(biāo)為Vmax，是求Vmax和Km的最好的一種方法，不需計(jì)算，作圖方便，結(jié)果準(zhǔn)確。

7．答：（1）一些腸道寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)等可以產(chǎn)生胃蛋白酶和胰蛋白酶的抑制劑，使它在動(dòng)物體內(nèi)不致被消化。

??（2）蠶豆等某些植物種子含有胰蛋白酶抑制劑，煮熟后胰蛋白酶抑制劑被破壞，否則食用后抑制胰蛋白酶活性，影響消化，引起不適。

8．答：作1/V~1/[S]圖，可知是競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑。

9．答：（1）酶量（mmol）=1.2×5/150 000=4.0×10-5mmol；

（2）碘乙酰胺量（mmol）=3.0×10-2/185=1.6×10-4mmol，所以酶的催化亞基數(shù)為4。

10．答：據(jù)V~[S]的米氏曲線，當(dāng)?shù)孜餄舛却蟠蟮陀贙m值時(shí)，酶不能被底物飽和，從酶的利用角度而言，很不經(jīng)濟(jì)；當(dāng)?shù)孜餄舛却蟠蟾哂贙m值時(shí)，酶趨于被飽和，隨底物濃度改變，反應(yīng)速度變化不大，不利于反應(yīng)速度的調(diào)節(jié)；當(dāng)?shù)孜餄舛仍贙m值附近時(shí)，反應(yīng)速度對(duì)底物濃度的變化較為敏感，有利于反應(yīng)速度的調(diào)節(jié)。

11．答：底物與別構(gòu)酶的結(jié)合，可以促進(jìn)隨后的底物分子與酶的結(jié)合，同樣競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與酶的底物結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，也可以促進(jìn)底物分子與酶的其它亞基的進(jìn)一步結(jié)合，因此低濃度的抑制劑可以激活某些別構(gòu)酶。

12．答：（1）當(dāng)[S]=Km時(shí)，V=1/2Vmax，則Vmax=2×35=70μmol/min；

?????（2）因?yàn)閂=Vmax/(1+Km/[s]),所以Km=(Vmax/V-1)[s]=1.5×10 -5mol/L；

?????（3）因?yàn)閇S]>>Km,[I],所以V=Vmax=70μmol/min；

?????（4）V=Vmax/(1+[I]/Ki)=40μmol/min。

13．答：酶蛋白分子中組氨酸的側(cè)鏈咪唑基pK值為6.0~7.0,在生理?xiàng)l件下，一半解離，一半不解離，因此既可以作為質(zhì)子供體（不解離部分），又可以作為質(zhì)子受體（解離部分），既是酸，又是堿，可以作為廣義酸堿共同催化反應(yīng)，因此常參與構(gòu)成酶的活性中心。

14．答：（A）―（3）―（Ⅴ）；

（B）―（4）―（Ⅲ），（Ⅳ）；

（C）―（7）―（Ⅷ）；

（D）―（1）―（Ⅸ）；

（E）―（2）―（Ⅰ），（Ⅱ）；

（F）―（5）―（Ⅵ），（Ⅶ）；

（G）―（6）。