熒光光譜分析
熒光光譜法(又稱(chēng)熒光分析法或分光熒光測(cè)定)是一種電磁光譜法,可以測(cè)量樣品吸收光子后發(fā)出的光子強(qiáng)度。實(shí)際上,大多數(shù)熒光分子是芳香族的,如蛋白質(zhì)/肽中的色氨酸。光學(xué)技術(shù),如UV-Vis、圓二色譜(CD)、傅立葉變換紅外(FTIR)和熒光光譜,都被用于獲取被測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)、相互作用和動(dòng)力學(xué)信息。熒光光譜是研究溶液狀態(tài)和顯微鏡下蛋白質(zhì)/肽的實(shí)時(shí)結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)的重要研究工具。

生物制藥,特別是蛋白質(zhì)和多肽類(lèi)藥物,在整個(gè)研發(fā)過(guò)程中都面臨著獨(dú)特的挑戰(zhàn)。在成功批準(zhǔn)和上市之前,需要對(duì)治療性蛋白質(zhì)/肽的生物物理、生化特性和3D結(jié)構(gòu)有透徹的了解,因?yàn)楫a(chǎn)品的活性、穩(wěn)定性、毒性、功效和保質(zhì)期會(huì)因結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系而受到影響。與小分子不同,這些大分子需要多種分析方法結(jié)合進(jìn)行分析。
熒光光譜法可應(yīng)用于:
1,通過(guò)改變熒光強(qiáng)度來(lái)探測(cè)結(jié)構(gòu)變化或兩個(gè)分子的結(jié)合;
2,通過(guò)色氨酸熒光的波長(zhǎng)定位色氨酸殘基(在蛋白質(zhì)表面或深埋在蛋白質(zhì)內(nèi)部);
3,通過(guò)熒光偏振和各向異性研究熒光團(tuán)遷移率。
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