“當用密切相關(guān)物種的抗體標記多個靶點時，你真的需要確定你的二級抗體是特異性的！”

請繼續(xù)閱讀，了解心臟病研究人員Elisabeth Ehler如何使用Jackson ImmunoResearch交叉吸附（最小X）二級抗體與來自密切相關(guān)宿主物種的一級抗體進行多重標記，從而使她能夠在原代心臟細胞培養(yǎng)物中區(qū)分細胞類型。

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自2003年以來，埃勒博士一直是倫敦國王學院醫(yī)學系的非臨床高級講師。她的研究在亞細胞水平上探索心臟細胞（心肌細胞）的組織；主要從細胞骨架和信號轉(zhuǎn)導的角度。這使她能夠闡明心臟發(fā)育過程中細胞結(jié)構(gòu)的組裝，以及如何適應(yīng)增加的工作量或心臟病期間。

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她的研究旨在回答的主要問題是：

肌原纖維和閏盤在發(fā)育過程中是如何在心肌細胞中組裝的？

病變心臟中的肌原纖維和閏盤如何（如果）受到影響？

心肌細胞在發(fā)育過程中適應(yīng)性的功能基礎(chǔ)是什么？

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Jackson艾美捷測定原代培養(yǎng)物中的不同細胞類型。?

通過抗體探測細胞類型特有的蛋白質(zhì)標記物，可以區(qū)分不同的細胞類型。使用針對每種一級抗體的不同宿主物種的二級抗體可以檢測到多種標記物。與二級抗體結(jié)合的不同顏色熒光探針可以識別每個標記，從而識別每個細胞類型。

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初級抗體通常僅在有限的物種中可用，并且可能無法避免使用密切相關(guān)的物種，如小鼠和大鼠。因此，重要的是你的二級抗體交叉吸附，以防止標記物的錯誤識別。

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圖1顯示了原代細胞培養(yǎng)中可能存在的各種細胞，“并非所有細胞都是心肌細胞，這是顯示次級抗體有多特異的關(guān)鍵?。?！”埃勒博士說。Jackson ImmunoResearch交叉吸附的二級抗體使密切相關(guān)的一級抗體宿主物種得以區(qū)分，從而能夠檢測到不同的細胞類型標記，并最終識別出細胞類型。使用大鼠抗微管蛋白（紅色）檢測原代心肌細胞培養(yǎng)物中的成纖維細胞，使用小鼠抗結(jié)蛋白（藍色）檢測平滑肌細胞，當使用兔抗肌球蛋白結(jié)合蛋白C（MyBP-C）（條綠色信號）檢測時，這兩種細胞都不會染色，這是心肌細胞特異性的。

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Jackson艾美捷?精細的特異性——區(qū)分老鼠和老鼠。

埃勒博士的工作清楚地顯示了杰克遜免疫研究交叉吸附（minX）二級抗體在區(qū)分小鼠和大鼠一級抗體的能力方面的獨特性。在圖3中，使用肌球蛋白結(jié)合蛋白-C（MyBP心臟）探測細胞，以識別心肌細胞（綠色）。圖中顯示了一個紅色和藍色的細胞，微管蛋白（紅色）和結(jié)蛋白（藍色）均呈陽性，但沒有綠色條紋表明這是一個平滑肌細胞。左邊的紅色鄰居是一個不起眼的成纖維細胞，鼠抗微管蛋白呈陽性。只有當二級抗體能夠區(qū)分密切相關(guān)的物種時，才能實現(xiàn)細胞類型之間的分化。

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Jackson相關(guān)研究：

Cy?2 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)(minX Hu, Ms, Rat Sr Prot)?Green?111-225-144

Cy?3 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG (H+L)(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Ms, Rb, Shp Sr Prot)?Red?712-165-153

Cy?5 AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)(min X Bov, Ck, Gt, GP, Sy Hms, Hrs, Hu, Rb, Rat, Shp Sr Prot)?Blue?715-175-151

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Jackson ImmunoResearch專注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務(wù)于大學科研所和醫(yī)院里的動物研究以及生物醫(yī)學研究機構(gòu)的科學家。艾美捷科技是Jackson的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。