Advanced Targeting Systems艾美捷丨Fab-ZAP小鼠ZAP標(biāo)記物
Fab-ZAP使用您的主要小鼠單克隆IgG抗體來靶向并消除識(shí)別您的主要抗體的細(xì)胞。Fab-ZAP由單價(jià)二級(jí)抗體制成,消除了帽形成的可能性,同時(shí)保留了作為有效體外診斷工具的所有品質(zhì)。所用抗體是針對(duì)小鼠IgG重鏈和輕鏈的親和純化多克隆抗體。本品中使用的抗體將在同一物種的免疫球蛋白類和亞類之間發(fā)生交叉反應(yīng),因?yàn)樗鼈児蚕硐嗤妮p鏈(κ或λ)。在細(xì)胞毒性試驗(yàn)中,與Mab-ZAP相比,其EC50也有所提高。
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Fab-ZAP小鼠是山羊抗小鼠單價(jià)抗體和核糖體失活蛋白saporin的化學(xué)偶聯(lián)物。它使用您的小鼠初級(jí)抗體來靶向和消除細(xì)胞。該二級(jí)綴合物用于評(píng)估一級(jí)抗體內(nèi)化的潛力。
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Advanced Targeting Systems艾美捷Fab-ZAP小鼠ZAP標(biāo)記物特異性和制備:
該二級(jí)綴合物識(shí)別您的小鼠抗體。Fab-ZAP是山羊抗鼠單價(jià)抗體和核糖體失活蛋白saporin的化學(xué)偶聯(lián)物。用于制造FabZAP小鼠的抗體是針對(duì)小鼠IgG重鏈和輕鏈的親和純化多克隆抗體。
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本品中使用的抗體將在免疫球蛋白類別和亞類之間發(fā)生交叉反應(yīng),因?yàn)樗鼈児蚕硐嗤妮p鏈(kappa或lambda)。
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Advanced Targeting Systems/ATSbio艾美捷Fab-ZAP小鼠ZAP標(biāo)記物使用和儲(chǔ)存:
Fab-ZAP使用小鼠的一級(jí)抗體來靶向和消除細(xì)胞。該次級(jí)標(biāo)記物用于評(píng)估一級(jí)抗體內(nèi)化的潛力。材料可能有很多不同;工作稀釋度必須由最終用戶確定。如果這是一個(gè)新的批次,您必須評(píng)估在開始完整的實(shí)驗(yàn)方案之前進(jìn)行工作稀釋。
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使用前輕輕旋轉(zhuǎn)材料;5-10秒的縮微膠片就足夠了。材料應(yīng)為儲(chǔ)存在-20°C的未稀釋等分試樣中。材料應(yīng)按方便的體積和數(shù)量進(jìn)行等分避免反復(fù)冷凍和解凍,否則會(huì)損害蛋白質(zhì)含量。在這些條件下具有非常穩(wěn)定的保質(zhì)期。解凍應(yīng)在室溫或冰上進(jìn)行。解凍的溶液應(yīng)在使用前保持在冰上。請(qǐng)勿將還原劑(如二硫蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸)用于此材料。它將使毒素失活。
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如果一級(jí)抗體識(shí)別人受體,則綴合物將對(duì)人細(xì)胞有毒表達(dá)適當(dāng)?shù)氖荏w。應(yīng)由經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行搬運(yùn)。手套和安全處理本產(chǎn)品時(shí)需要戴眼鏡。處置時(shí)必須小心;高壓滅菌或暴露于0.2
M氫氧化鈉會(huì)使材料失活。所有與該材料接觸的實(shí)驗(yàn)室器皿應(yīng)同樣地處理。
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注:當(dāng)用于細(xì)胞毒性試驗(yàn)時(shí),未結(jié)合的一級(jí)抗體將與一級(jí)抗體競爭
結(jié)合Fab-ZAP,并可通過競爭性抑制初級(jí)抗體-次級(jí)偶聯(lián)物復(fù)合物來降低細(xì)胞毒性。
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圖:PC12細(xì)胞以5000個(gè)細(xì)胞/90μl/孔接種孵育過夜。在細(xì)胞中進(jìn)行皂素稀釋向每個(gè)孔中加入10μl。OX7抗體(AB-N08)在細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋濃度,4.5 nM/10μl Fab ZAP,添加10μl每個(gè)井。培養(yǎng)板72小時(shí)。這個(gè)使用XTT/PMS溶液開發(fā)板在450nm下讀取。通過比較處理井與對(duì)照井的井讀數(shù)井,以百分比表示。活細(xì)胞數(shù)通過細(xì)胞測量發(fā)育當(dāng)天的剩余量比色分子在細(xì)胞內(nèi)的代謝開發(fā)試劑。
Advanced Targeting Systems/ATSbio艾美捷Fab-ZAP小鼠ZAP標(biāo)記物文獻(xiàn)參考:
1. Kohls MD, Lappi DA (2000) Mab-ZAP: A tool for evaluating antibody efficacy for use in an immunotoxin.
BioTechniques 28(1):162-165.
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Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究領(lǐng)域包含神經(jīng)靶向毒素,神經(jīng)生物學(xué)研究方面的抗體/蛋白,靶向劑內(nèi)化水平檢測工具等。艾美捷科技是ATSbio的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。