血沉棕黃層定義及應(yīng)用
血沉棕黃層定義
血沉棕黃層懸浮液是白細(xì)胞和血小板的濃縮懸浮液,它們構(gòu)成通過(guò)密度梯度離心過(guò)程獲得的抗凝血液樣品的一部分。
術(shù)語(yǔ)血沉棕黃層源于這樣一個(gè)事實(shí),即懸浮液具有類似于淺黃色的顏色(黃米色)。
當(dāng)通過(guò)離心從全血樣本中分離時(shí),血沉棕黃層主要包含白細(xì)胞和血小板。
從全血樣本中生成血沉棕黃層有助于濃縮大量血液樣本,從而減少細(xì)胞分離和處理過(guò)程中的下游。
在裝有全血的試管中,在血漿和血細(xì)胞比容之間形成一層薄薄的灰白色血沉棕黃層,由白細(xì)胞和血小板組成,密度均低于紅細(xì)胞。
血沉棕黃層約占試管中總血量的 1%。
為了將血沉棕黃層與血漿和紅細(xì)胞分離,通常將全血樣品作為預(yù)處理進(jìn)行分級(jí)。
離心后,血沉棕黃層根據(jù)其密度保留在血漿和紅細(xì)胞之間。
血沉棕黃層的顏色通常保持在黃色到淺棕色之間,但顏色可能會(huì)有所不同,因?yàn)轭伾Q于中性粒細(xì)胞的濃度。
中性粒細(xì)胞濃度高時(shí)顏色更偏綠,濃度低時(shí)顏色仍為黃色。
血沉棕黃層應(yīng)用
血沉棕黃層對(duì)于從血液樣本中分離 DNA 很重要。特別是在具有無(wú)核紅細(xì)胞的哺乳動(dòng)物血液樣本的情況下,從白細(xì)胞中提取 DNA,因?yàn)榘准?xì)胞是有核細(xì)胞的濃縮來(lái)源的大約十倍。
該技術(shù)還可用于從相對(duì)較小的樣本中純化大量 gDNA。
血沉棕黃層制備還允許白細(xì)胞分化,因?yàn)樗鼈冊(cè)谘磷攸S層中比在全血樣本中更集中。
從全血樣本中生成血沉棕黃層有助于濃縮大量血液樣本,從而減少細(xì)胞分離和處理過(guò)程中的下游。
使用血沉棕黃層減少了供體的變異性,因?yàn)楣w特異性可溶性血清因子與其余的丟棄物一起被消除。
富含血小板的血沉棕黃層已成為血小板濃縮方法的替代來(lái)源,因?yàn)檠磷攸S層制備導(dǎo)致的血小板活化和損傷較少。
定量血沉棕黃層是檢測(cè)瘧疾或其他血液寄生蟲(如錐蟲、利什曼原蟲和組織胞漿菌)感染的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。
血細(xì)胞分離法是一種成本較低的血細(xì)胞分離方法,也是滿足血小板應(yīng)急需求的理想方法。