細(xì)胞攻略 | Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)培養(yǎng)教程
細(xì)胞基本信息

細(xì)胞名稱:Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:HaCAT;HACAT;Hacat
細(xì)胞貨號:SNL-163
生長特性:貼壁
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)環(huán)境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃
細(xì)胞簡介:Hacat細(xì)胞來源于一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚,是在體外培養(yǎng)后自然轉(zhuǎn)化的永生化的人角質(zhì)細(xì)胞,也是第一株永生化的表皮細(xì)胞。Hacat細(xì)胞角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽性,可用于人表皮細(xì)胞角化的研究。
Hacat細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
01消化時間長
Hacat細(xì)胞傳代時消化時間較長,可能需要5min或者更久,具體時間因胰酶濃度、效價、消化條件有所不同,第一次對該細(xì)胞進(jìn)行消化時要摸索最佳時間(具體步驟見后文)。
02黑點(diǎn)較多
Hacat細(xì)胞的胞體內(nèi)黑色顆粒較多,這是該細(xì)胞的特性。同時細(xì)胞外也有少量黑點(diǎn),這些黑點(diǎn)是細(xì)胞碎片粘附在瓶底,換液時用PBS潤洗即可。
03不可過度生長
如果Hacat細(xì)胞長滿后沒有及時傳代,任其過度生長,可能造成不可逆轉(zhuǎn)的損傷,導(dǎo)致傳代后細(xì)胞碎片增多,細(xì)胞變形,不生長等情況。
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