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歐易生物生物信息分析——IGV快速上手教程

2022-03-23 10:19 作者:上海歐易生物  | 我要投稿

前不久,咱們給老師們介紹過(guò)基因表達(dá)可視化的多種實(shí)現(xiàn)方式,有windows操作的IGV,也有Linux環(huán)境下使用的工具。很快小歐在后臺(tái)收到很多老師的需求,希望有更詳細(xì)IGV教程。于是小歐馬不停蹄趕工出來(lái),咱們一起來(lái)看看吧~


IGV介紹


1、簡(jiǎn)介:Integrative Genomics Viewer (IGV) 是一種高性能、易于使用的交互式工具,用于對(duì)基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化探索。它支持所有常見(jiàn)類型的基因組數(shù)據(jù)和metadata的靈活集成。

2、功能:IGV支持各種各式的大型數(shù)據(jù)集的可視化,包括二代測(cè)序,芯片測(cè)序數(shù)據(jù)和基因組數(shù)據(jù)等。例如,查看轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)不同區(qū)域的Reads豐度,不同樣本的基因表達(dá)差異,查找SNP位點(diǎn),查看甲基化,查看基因結(jié)構(gòu)信息。


IGV 軟件安裝



官網(wǎng)下載即可,推薦使用內(nèi)置java版本,以方便安裝,如下圖:


IGV 有下載文件的需求,所以要通過(guò)網(wǎng)絡(luò)訪問(wèn)權(quán)限哦,然后根據(jù)提示一步步安裝即可。


下載好的IGV主窗口如下:



IGV軟件界面介紹



1、設(shè)置放大倍數(shù),設(shè)置在5-8之間可以比較清晰的查看reads的分布狀況,也可以通過(guò)雙擊選中區(qū)域進(jìn)行放大;

2、Fa 文件欄,顯示物種的Fasta文件,也就是基因組文件;

3、Read coverage: reads的覆蓋度,準(zhǔn)確表現(xiàn)該次測(cè)序reads的覆蓋度;

4、樣品bam文件:本次測(cè)序的reads經(jīng)與參考基因組比對(duì)后的結(jié)果,可得到其在染色體上的分布情況;

5、Sequence:注釋文件的核酸序列信息;

6、GTF注釋文件的注釋信息,此列展示注釋文件中的基因及外顯子的信息

7、選擇參考基因組,IGV上已有一部分物種基因組。

8、可以選擇基因組染色體,是一條還是全部。

9、顯示特定位點(diǎn)或特定基因,可對(duì)關(guān)注的基因及基因集進(jìn)行直接搜索。


查看轉(zhuǎn)錄組的比對(duì)數(shù)據(jù)


1、導(dǎo)入基因組


既可以導(dǎo)入IGV自帶的參考基因組文件,也可以從本地導(dǎo)入已下載好的參考基因組文件。


導(dǎo)入IGV自帶的基因示例:

可在基因組選擇框中選擇自己數(shù)據(jù)對(duì)應(yīng)的基因組,或下拉框中輸入關(guān)鍵詞選擇對(duì)應(yīng)的基因



從本地導(dǎo)入已下載好的參考基因組示例:

從本地導(dǎo)入基因組文件的同一路徑,還要準(zhǔn)備好基因組的gtf注釋文件或者gff注釋文件,基因組文件通過(guò)Genomes→Load Genome from File... 加載,注釋文件需要通過(guò)File→ Load from File... 加載;加載注釋文件過(guò)程中會(huì)有提示需要建立gff文件的索引,可根據(jù)提示操作即可。



2、導(dǎo)入bam 文件


bam文件也是通過(guò)File→ Load from File... 加載,準(zhǔn)備bam文件時(shí),要在相同目錄下同時(shí)存在bam.bai文件。


3、查看樣本的表達(dá)情況,可以通過(guò)不斷放大關(guān)注位點(diǎn)查看更多詳細(xì)信息。



注意:

要選擇自己對(duì)應(yīng)的參考基因組文件,且基因組文件較大,加載需要一定的時(shí)間。

選擇的基因組區(qū)域過(guò)大,reads覆蓋區(qū)會(huì)出現(xiàn)“Zoom in to see coverage” 的字樣,只需增加放大倍數(shù)即可。


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End本文系歐易生物原創(chuàng)

歐易生物生物信息分析——IGV快速上手教程的評(píng)論 (共 條)

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