艾美捷worthington方法和材料之研磨&酶促細胞收獲&細胞粘附和收獲詳情解析。

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一、研磨（通過溫和的泵送作用分散細胞）

這可能是一個至關(guān)重要的過程。它用于在解離混合物中孵育后分解組織碎片。如果做得太猛烈，細胞會被破壞，降低活力；太弱，組織碎片將保持完整，從而降低產(chǎn)量。使用?10 ml?移液器輕輕研磨，以每秒約?3.0 ml?的速度填充和排空桶。用戶可以通過反復(fù)試驗確定最適合的組織速率。避免使細胞懸液起泡。

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二、艾美捷worthington酶促細胞收獲

大多數(shù)在體外生長的非惡性細胞四處移動并分裂，直到它們形成一個細胞厚的單層，完全覆蓋培養(yǎng)容器的表面。當(dāng)達到匯合時，運動和增殖通常會停止。為研究、加工或繼代培養(yǎng)而收獲細胞需要解離和分離單層。用胰蛋白酶對細胞層進行有限處理是最常用的方法。

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以前認(rèn)為胰蛋白酶制劑只是水解一種蛋白質(zhì)粘合物質(zhì)，這種粘合物質(zhì)負責(zé)使細胞牢固地附著在它們的基質(zhì)上，從而使細胞從培養(yǎng)容器中分離出來?，F(xiàn)在認(rèn)為胰蛋白酶在細胞收獲中的作用機制更為復(fù)雜。

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三、艾美捷worthington細胞粘附和收獲

在間期，培養(yǎng)中的成纖維細胞樣細胞以特征性的紡錘形結(jié)構(gòu)分布在基質(zhì)上。關(guān)于細胞粘附的實際區(qū)域是分布在細胞的大部分下表面還是位于細胞邊緣附近的相對狹窄的斑塊中，主要是在起皺活動附近，存在意見分歧。在任何一種情況下，這些粘附區(qū)域似乎都是由附著點簇組成，每個附著點的直徑約為?1 μm。各個附著點顯然是與基質(zhì)結(jié)合的細胞骨架結(jié)構(gòu)的遠端部分。

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在將培養(yǎng)的細胞置于低溫、螯合劑或胰蛋白酶溶液后幾分鐘內(nèi)，它們會通過四舍五入和起泡而急劇改變形狀。電子顯微照片顯示許多直徑為?0.25 - 0.5 μm?的長回縮纖維從圓形細胞體的表面延伸到先前位于扁平細胞下表面的擴大的末端燈泡附著點。

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細胞保持附著在基質(zhì)上，直到纖維斷裂，或者通過敲擊或搖動培養(yǎng)容器進行機械斷裂，或者通過螯合劑和/或胰蛋白酶的持續(xù)作用進行化學(xué)反應(yīng)。（單獨的低溫足以圍成圓形，但不足以分離。這些條件也大大減少了胰蛋白酶進入細胞。）細胞從培養(yǎng)容器表面分離后不久，傳代培養(yǎng)到含有無胰蛋白酶培養(yǎng)基的新容器中，細胞質(zhì)流入斷裂的回縮纖維并重新填充它們。一個小時內(nèi)，圓形細胞開始呈現(xiàn)出它們特有的形狀。

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Worthington專注于高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。其核心酶產(chǎn)品包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。