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細(xì)胞實驗室細(xì)胞有支原體污染怎么辦?

2022-08-11 16:59 作者:消毒小飛俠  | 我要投稿

當(dāng)今,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床試驗研究、生物制品的研發(fā)和生產(chǎn)領(lǐng)域。大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞是生物制藥和疫苗生產(chǎn)領(lǐng)域中的一項基礎(chǔ)工作,更是整個生產(chǎn)工藝過程中的中心環(huán)節(jié),這項技術(shù)受多種因素的影響,如工作環(huán)境是否無菌、操作 手法是否正確以及維持細(xì)胞所需的培養(yǎng)液等。

體外細(xì)胞的培養(yǎng)近乎苛刻,不但要求所使用的物品材料要潔凈無菌,所有的操作過程也要在無菌的條件下進(jìn)行,這也意味著細(xì)胞培養(yǎng)的過程中無時不刻受到微生物污染的威脅。細(xì)胞污染是細(xì)胞培養(yǎng)失敗的關(guān)鍵誘因之一。在細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中,最常見的污染源是支原體、細(xì)菌和霉菌污染,而其中支原體污染率竟高達(dá)30%~60%。

細(xì)菌和霉菌污染在顯微鏡下甚至是肉眼就很容易識別。細(xì)菌污染時,培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)液變酸、變渾濁。在顯微鏡下,細(xì)胞間大量活躍運動的細(xì)小顆粒,細(xì)胞大量死亡。霉菌污染時, 嚴(yán)重時可見霉菌團(tuán)塊,漂浮在培養(yǎng)液中,顯微鏡下可見不同形態(tài)的霉菌菌絲。然而支原體污 染的時候,初期比較難被識別出來。支原體的大小為 0.1~0.3μm,在普通的光學(xué)顯微鏡下不容易被觀察到,并且可穿過絕大部分的濾膜,因其沒有細(xì)胞壁,作用于細(xì)胞壁的抗生素對它無效。

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細(xì)胞培養(yǎng)皿一旦感染支原體后,通常不會有顏色變化。支原體附著在細(xì)胞株表面,通過搶奪細(xì)胞培養(yǎng)基中的養(yǎng)分實現(xiàn)增殖。在其繁殖的過程中除了消耗培養(yǎng)基中的各種養(yǎng)分,同時還會改變培養(yǎng)基中的pH值,甚至產(chǎn)生對細(xì)胞株有毒害的代謝產(chǎn)物,從而導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)的改變并影響其宿主細(xì)胞的生理、遺傳等多方面的正常功能,用這些污染后貌似正常的細(xì)胞做試驗或生產(chǎn),將會嚴(yán)重影響結(jié)果。

預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)過程被支原體污染一直是個讓人頭疼的問題,保持無菌狀態(tài),無論對于新手亦或是老手,都是一個巨大的挑戰(zhàn)。體外培養(yǎng)的細(xì)胞缺乏免疫系統(tǒng),因此,控制污染的方式是預(yù)防污染!

細(xì)胞實驗室傳統(tǒng)的消毒流程是:1.用消毒酒精擦拭臺面;2.打開超凈工作臺和細(xì)胞房的紫外燈,照射1~2h。值得注意的是,紫外燈開啟后,人不能進(jìn)入實驗室內(nèi),紫外線對眼睛和裸露的皮膚均有危害。若要進(jìn)入,操作人員一定要先關(guān)閉紫外燈,待人離開后再重新打開。
相比之下,比林科漢智能化干霧消毒設(shè)備操作簡單、設(shè)備體積小、重量輕,通電后即開即用,隨時啟停,消毒者可在實驗室外可遠(yuǎn)程控制,完成整個消毒過程,從而避免在正常時間及突發(fā)狀況下,操作人員為關(guān)閉設(shè)備而暴露在消毒過程中。

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