pull-down實驗和免疫共沉淀足夠證明分子互作嗎
Pull-down實驗和免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)都是研究蛋白質(zhì)分子相互作用的常用方法。根據(jù)二者的實驗原理可知,理論上是可以證明蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用的。
但是,根據(jù)兩種技術(shù)的局限性也不難排除以下情況:Co-IP可能無法檢測到蛋白質(zhì)之間的低親和力或短暫的相互作用;再者檢測結(jié)果不能確定交互作用是直接的還是間接的,因為不能排除其他蛋白在中間起橋梁作用的可能性。而Pull-down受外界條件影響較大,并不能真正反映蛋白質(zhì)在真實生理狀態(tài)條件下的相互作用,因為它們在體外相互結(jié)合并不意味著它們在體內(nèi)有生理結(jié)合。
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