前言：

橫向流動(dòng)免疫分析?(LFIA)?廣泛用于快速檢測各種樣品類型中的特定分析物。J著名的例子之一可能是?Clearblue??妊娠試驗(yàn)，它可以檢測尿液中的人絨毛膜促性腺激素?(hCG)，從而在短短?1?分鐘內(nèi)確認(rèn)懷孕。側(cè)向流動(dòng)免疫測定的速度和簡單性使其成為即時(shí)檢測的理想解決方案。然而，為了使側(cè)向流動(dòng)免疫分析有效地執(zhí)行，它們必須由正確的組件配置。

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這期的主題是Jackson ImmunoResearch公司為大家講解：側(cè)向流動(dòng)免疫分析在床旁檢測中的優(yōu)勢。

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一、Jackson：為什么我們需要即時(shí)檢測？

護(hù)理點(diǎn)?(POC)?測試是一個(gè)術(shù)語，用于描述在患者護(hù)理現(xiàn)場進(jìn)行的任何實(shí)驗(yàn)室測試，無論是在家中、醫(yī)生辦公室還是在醫(yī)院環(huán)境中。與需要將血液、尿液或唾液等樣本送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析的傳統(tǒng)檢測不同，POC?檢測幾乎可以立即提供結(jié)果，確保及時(shí)采取適當(dāng)?shù)拇胧?。POC?檢測不僅可以降低個(gè)體傳播感染的風(fēng)險(xiǎn)（例如，通過確認(rèn)患者被診斷患有?COVID-19?時(shí)需要一段時(shí)間的自我隔離），而且在某些情況下（例如敗血癥），它可以意思是生與死的區(qū)別。

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二、Jackson公司：在?POC?測試中，LFIA?與?ELISA?相比有哪些優(yōu)勢？

LFIA?在?POC?測試中優(yōu)于?ELISA?的主要優(yōu)勢在于其速度和簡單性。考慮到這一點(diǎn)，請考慮?ELISA?涉及幾個(gè)關(guān)鍵步驟：在微孔板孔表面捕獲目標(biāo)分析物，阻斷以防止非特異性結(jié)合，以及檢測/量化。其中每一個(gè)通常至少需要一個(gè)小時(shí)，并且各個(gè)步驟都穿插著多次洗滌，這意味著即使是J基本的?ELISA?也需要大約半天才能產(chǎn)生結(jié)果。ELISA?的另一個(gè)限制是運(yùn)行它的人員必須經(jīng)過專門培訓(xùn)，并且經(jīng)常需要使用專用設(shè)備（例如液體分配器/洗板機(jī)、讀板機(jī)）；這在很大程度上將?ELISA?限制在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中，并可能在測試需求高的地方造成瓶頸。

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在?LFIA?期間，測試以基于硝酸纖維素膜的橫向形式進(jìn)行，而不是在微孔板中進(jìn)行。由于樣品被簡單地添加到側(cè)向流動(dòng)條的一端并讓其遷移，LFIA?可在幾分鐘內(nèi)提供結(jié)果，無需使用專門的設(shè)備。除了快速且易于運(yùn)行之外，LFIA?還可以生成更易于解釋的數(shù)據(jù)——在傳統(tǒng)的橫向流動(dòng)免疫分析中，結(jié)果通常包含一個(gè)或多個(gè)肉眼清晰可見的彩色條紋；在更現(xiàn)代的系統(tǒng)中，數(shù)據(jù)越來越多地被數(shù)字化以顯示書面的“是”或“否”答案。

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三、Jackson公司：LFIA?如何工作？

盡管橫向流動(dòng)免疫分析可以配置為直接、夾心或競爭形式，就像?ELISA?一樣，但一般設(shè)置保持不變。在?LFIA?的一端，樣品材料通過塑料設(shè)備外殼上的一個(gè)小孔施加到樣品墊上。除此之外，結(jié)合墊包含檢測和/或控制試劑（取決于選擇的格式），這些試劑與報(bào)告分子（如膠體金或彩色乳膠珠）結(jié)合。結(jié)合墊之外是硝酸纖維素膜，上面有抗體和/或抗原條紋，以產(chǎn)生測試線和對照線。J后，在?LFIA?的另一端，芯吸墊繼續(xù)通過條帶吸取材料，直到樣品耗盡或芯吸墊飽和。側(cè)向流動(dòng)免疫測定簡介頁面。

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四、Jackson公司：LFIA?的關(guān)鍵組成部分是什么？

側(cè)流免疫測定的成功取決于幾個(gè)關(guān)鍵試劑。首先，任何分析物特異性抗體都必須對目標(biāo)分子具有高親和力和特異性，這樣即使是稀有的分析物也能在不受脫靶結(jié)合干擾的情況下被檢測到。理想情況下，分析物特異性抗體也應(yīng)該表現(xiàn)出快速的?kon?速率和慢的?koff?速率，因?yàn)橹挥蟹浅Ｓ邢薜臅r(shí)間（僅幾秒鐘）可用于發(fā)生抗體-抗原相互作用。

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用作對照試劑的抗體同樣重要，并且與?LFIA?中使用的其他抗體的交叉反應(yīng)J小。通常的做法是用旨在結(jié)合偶聯(lián)雞?IgY?對照的抗雞二抗對陽性對照線進(jìn)行條帶化；由于與哺乳動(dòng)物免疫球蛋白相比，雞?IgY?的同源性和序列同一性較低，這有助于避免非特異性相互作用。

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膠體金、乳膠珠和熒光染料經(jīng)常用作?LFIA?的報(bào)告分子。在許多情況下，膠體金是推薦，因?yàn)樗跈M向流動(dòng)條帶上產(chǎn)生強(qiáng)烈的顏色，易于共軛，并且質(zhì)量始終如1。雖然膠體金有多種尺寸，但40 nm?膠體金顆粒是J受歡迎的顆粒之一，因?yàn)樾≈睆皆试S它們在測試或控制線處密集堆積，產(chǎn)生明確無誤的彩色讀數(shù)。

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Jackson公司專注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務(wù)領(lǐng)域覆蓋各大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動(dòng)物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。艾美捷科技是Jackson公司的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。