如有神助!畫圖不走彎路,2個(gè)小工具搞定復(fù)雜的信號通路圖!
一般我們在文獻(xiàn)上看到的精美的示意圖,膜拜的同時(shí)心里也會想,這肯定是專業(yè)選手用專業(yè)軟件畫出來的,我跟這種圖應(yīng)該是無緣了。
NO,千萬不要這樣想,非專業(yè)選手借用工具也能畫出好看的圖。推薦2個(gè)示意圖工具給大家,分分鐘搞定高級的信號通路圖和各種模型圖。
之前已經(jīng)給大家分享了PPT插件ScienceSlide來繪制通路圖,使用和安裝和看以下文章!
這個(gè)神器實(shí)驗(yàn)室全員使用!畫科研插圖真的好用到離譜!ScienceSlides 2016?
推薦的第2個(gè)工具是我珍藏的畫圖軟件-Pathway?Builder?Tool,包含了多個(gè)生物醫(yī)學(xué)相關(guān)模板,自帶了分子生物學(xué)會用到的所有元素,如不同的細(xì)胞、細(xì)胞器、分子等等。免安裝,點(diǎn)擊程序就能使用。
本文后半部分的畫圖案例(包括成圖思路)可以作為參考教程!
Pathway?Builder?Tool?2.0安裝包,在科研根號三公眾號回復(fù)“繪圖02”下載!

Pathway?Builder?Tool?2.0
優(yōu)點(diǎn):軟件輕便,操作簡單,任何系統(tǒng)下都能使用。 素材雖然不多,但是通過變換、組合之后可以滿足基本需求!
缺點(diǎn):分子結(jié)果不夠全面,比如沒有LncRNA與 microRNA分子圖。
一、Pathway Builder Tool?2.0?素材包詳情
Pathway Builder Tool?2.0?軟件右側(cè)包括5個(gè)板塊的素材:
Templetes
Organelles(細(xì)胞器)
Molecules (分子)
Arrows
Miscellaneous
1.下拉Templetes對話框,是各種信號通路模式圖。
①PATHWAY TEMPLATES下方四張圖為簡單的信號通路模式圖;
②PREMADE PATHWAYS下方為已完成的信號通路。

2.下拉Organelles(細(xì)胞器)對話框,是各種細(xì)胞器結(jié)構(gòu)。
①M(fèi)AMMALIAN MEMBRANS為哺乳動物膜
②MEMBRANES(OTHER ORGANISMS)為其他生物體的膜
③CELL ORGANELLES 為細(xì)胞器
注:若不知道相應(yīng)圖片的結(jié)構(gòu),可將鼠標(biāo)拉至圖片中,軟件會自動顯示對應(yīng)的結(jié)構(gòu)名。

3.下拉Molecules (分子)對話框,是各種分子結(jié)構(gòu)。
①ACCESSORY MOLECULES表示附屬分子
②RECEPTORS表示受體分子
③MOLECULES表示各類生物大分子
④CHEMICAL STRUCTURES表示化學(xué)方程式

4.Arrows對話框下為各類箭頭
①ACTIVATION ARROWS為起激活或促進(jìn)作用的箭頭,箭頭指向被激活或促進(jìn)的一方
②INHIBITION ARROWS為起抑制的箭頭,箭頭所指為被抑制的 一方
③BINDING ARROWS為捆綁箭頭,箭頭指向被捆綁或結(jié)合的一方
④LINES表示線性箭頭,當(dāng)上游信號分子作用于多個(gè)下游信號分子時(shí),可用線性箭頭表示分支。

5.Miscellaneous對話框中的結(jié)構(gòu)是對以上列表的補(bǔ)充
①ACCEDDORY ITEMS 表示對人體、器官、組織、細(xì)胞或分子的作用,如剪切、輻射、藥物處理或者注射等
②CELLS表示不同類型的細(xì)胞
③ORGANISMS表示不同物種的形態(tài)結(jié)構(gòu)
④BODY ORGANS表示人體的各類器官
⑤HUMAN ANATOMY表示人體結(jié)構(gòu)

二、快捷鍵
復(fù)制:Ctrl+C
粘貼:Ctrl+V
刪除:Delete
注意:
對任意部位進(jìn)行更改時(shí),必須左鍵單擊選中所更改的對象,再做更改。
更改過程需謹(jǐn)慎,軟件無法撤銷更改。
三、通用作圖思路
1.查找文獻(xiàn)
查找信號通路的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,如:MicroRNA或IncRNA對靶基因的作用機(jī)制以及靶基因?qū)ο掠涡盘柾返淖饔脵C(jī)制。
?
2.確定模板
解壓Pathway Builder Tool?2.0壓縮包,雙擊pbtoolv2.exe,打開軟件后,在軟件右側(cè)Templates選項(xiàng)下選擇最適合的通路模板,在適合的通路模板下進(jìn)行修改。
若軟件中的信號通路模板與自己想要做的信號通路的相似性不大,直接開始空白頁作圖。
?
3.選擇背景
建議一開始將背景選為白色或其他淺色系,因?yàn)楹谏尘安环奖闾砑游谋尽?
?
4.畫圖思路
建議作圖的時(shí)候由外(細(xì)胞膜外)及內(nèi)(膜內(nèi)),由上游至下游。
可先將信號通路機(jī)制做出來之后,再將MicroRNA或LncRNA對靶基因的作用機(jī)制以及靶基因?qū)ο掠涡盘柾返淖饔脵C(jī)制放在之后做,這樣思路清晰就不容易出錯(cuò)。
四、案例實(shí)操
以“miR-143-5p靶向Runx2調(diào)控OPG/RANKL信號通路在人牙髓干細(xì)胞向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化和牙髓損傷修復(fù)中的作用”為例。
?1、查找文獻(xiàn)
通過文獻(xiàn):“RANK/RANKL/OPG信號通路的研究進(jìn)展”,查找到信號通路,并進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)制。同時(shí)下調(diào)miR-143-5p可促進(jìn)Runx2表達(dá)并調(diào)控OPG/RANKL信號通路,從而促進(jìn)人牙髓干細(xì)胞向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化,進(jìn)而修復(fù)牙髓損傷。

2、開始作圖
①打開Pathway??Builder?Tool?2.0壓縮包,雙擊pbtoolv2.exe,打開軟件。?

②理清思路:根據(jù)從由外(細(xì)胞膜外)及內(nèi)(膜內(nèi)),由上游至下游的方法,首先加入細(xì)胞膜與膜上的受體;根據(jù)參考文獻(xiàn)得知,PANK為Ⅰ型跨膜蛋白,RANKL為配體,以三聚體的形式與RANK結(jié)合,從而激活RANK啟動信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。而OPG以二聚體的形式競爭性結(jié)合RANKL三聚體,使RANKL失活。
?
3、畫圖步驟詳解
①點(diǎn)擊MAMMALLAN MEMBRANES對話框中第一排第二個(gè)細(xì)胞膜圖。
②插入RANK與OPG受體:下拉Molecules對話框,插入RECEPTORS下方第二排第三張和第四張圖,插入之后將圖片拉大拉寬,并點(diǎn)擊軟件上方帶“T"的圖標(biāo),在出來的"Text"框中,分別輸入RANK、OPG等文本,拖動文本,移至對應(yīng)分子上。
③插入RANKL分子:下拉Molecules對話框,插入MOLECULES下方第五排第張圖,插入之后出來的會是像箭頭所指的單個(gè)分子形式,點(diǎn)擊圖片,粘貼多個(gè)分子圖片,每三個(gè)分子均重疊一部分以表示三聚體結(jié)構(gòu)。將分子移至對應(yīng)的位置,最終效果如上方所示。
④點(diǎn)擊Arrows下來列表中的ACTIVATION ARROWS選擇單向箭頭(第二個(gè)),將箭頭移至對應(yīng)的位置,并根據(jù)需要改變箭頭形態(tài)(點(diǎn)中箭頭后操作)。
注:分子模型的選擇須最符合文獻(xiàn)中所描述的分子形態(tài),顏色則可以根據(jù)自己的圖片背景等各種因素自己做出調(diào)整。

⑤接下來需要表示出RANK下游信號分子之一JNK的作用方式
按照之前的方法,加入對應(yīng)的信號分子并讓其與RANK結(jié)合,下游信號通路之一即為JNK分子,按照J(rèn)NK的結(jié)構(gòu),選擇兩個(gè)與結(jié)構(gòu)相結(jié)合的圖形,并插入箭頭,因?yàn)榧?xì)胞增殖與分化的過程是非常復(fù)雜,所以可以直接用英文表示其作用的結(jié)果。
注:用線性箭頭表示移動

⑥再表示出RANK下游信號分子之一NF-kB的作用方式
插圖的方法同上,根據(jù)需要調(diào)動細(xì)胞核、DNA分子與其余分子的位置和大小,并且加入文本,在分子結(jié)構(gòu)上輸入對應(yīng)的名稱
注:NF-kB與DNA分子結(jié)合的表示如下,箭頭所指表示轉(zhuǎn)錄過程,最后應(yīng)寫明Osteoclastogenesis(破骨細(xì)胞生成
基因)轉(zhuǎn)錄之后的作用是Induced osteoclast formation(誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成)

⑦表示出miR-143-5p、靶基因Runx2與OPG/RANKL信號通路的關(guān)系。

4、更換背景并保存文件
在軟件的菜單欄點(diǎn)擊background可以把選擇把背景設(shè)置成黑色背景,也可以是其它顏色的背景。
①源文件保存:
點(diǎn)擊左上角“File”,選擇“Save project”,進(jìn)行保存,在此操作基礎(chǔ)上保存的文件是可以修改的。
②Jpg/Png格式保存:
點(diǎn)擊Save as Image,在彈出的對話框中對文件進(jìn)行命名,并選擇保存類型為jpg格式,將保存為jpg格式的圖片以畫圖軟件打開,裁剪信號通路圖并進(jìn)行保存。 或者也可以直接用截圖軟件截取信號通路圖。

5、信號通路機(jī)制圖細(xì)節(jié)說明
如下圖所示,針對畫好的通路圖,對一些細(xì)節(jié)進(jìn)行了說明,方便大家看的更明白。

注意:分子之間的作用與結(jié)合全部需要按照文獻(xiàn)的描述做正確的調(diào)整,如MAPK信號通路中大部分蛋白都會經(jīng)過磷酸化與去磷酸化過程,此過程與單純的因結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行結(jié)合是不同的,需要在分子相應(yīng)的蛋白質(zhì)分子上另外加入代表磷酸基團(tuán)的圖案,代表磷酸基團(tuán)的圖案如下圖框選所示。

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