Kamiya艾美捷小鼠血紅蛋白ELISA預(yù)期用途：

小鼠血紅蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）小鼠生物樣品中血紅蛋白的測(cè)定。僅供研究使用。

引言

血紅蛋白（HM）是紅細(xì)胞中的含鐵氧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。它吸收肺部的氧氣將其遞送至組織以維持細(xì)胞的活力。血紅蛋白的每個(gè)亞基都是一個(gè)球狀蛋白質(zhì)嵌入血紅素組。每個(gè)血紅素基團(tuán)含有一個(gè)鐵原子并負(fù)責(zé)氧的結(jié)合。減少血紅蛋白導(dǎo)致貧血癥狀。

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Kamiya艾美捷小鼠血紅蛋白ELISA試驗(yàn)原理：

在該測(cè)定中，血紅蛋白存在于樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定表面的抗血紅蛋白抗體反應(yīng)

井。通過(guò)洗滌除去未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，與辣根過(guò)氧化物酶綴合的抗HM抗體（HRP）被添加。該HRP綴合的抗體與先前結(jié)合的血紅蛋白形成復(fù)合物。以下另一個(gè)洗滌步驟，通過(guò)添加顯色底物來(lái)測(cè)定與免疫吸附劑結(jié)合的酶，3,3'，5,5'- TMB。結(jié)合酶的數(shù)量與血紅蛋白濃度成正比測(cè)試樣品；因此，450nm處的吸光度是測(cè)試樣品中血紅蛋白濃度的量度。測(cè)試樣品中血紅蛋白的量可以從由校準(zhǔn)品，并針對(duì)樣品稀釋進(jìn)行校正。

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Kamiya艾美捷小鼠血紅蛋白ELISA試驗(yàn)試劑制備：

1.稀釋劑濃縮物

提供的稀釋劑溶液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水1:5稀釋。

2.洗滌液濃縮物

提供的洗滌溶液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋。水晶當(dāng)儲(chǔ)存溫度低時(shí)，濃縮物中的形成并不少見(jiàn)。將濃縮物升溫至稀釋前30-35°C可溶解晶體。

3.酶-抗體綴合物濃縮物

通過(guò)添加10μL計(jì)算每個(gè)微量滴定板測(cè)試條所需的工作共軛溶液量對(duì)于用于測(cè)試的每個(gè)測(cè)試條，酶-抗體與990μL1X稀釋劑綴合。均勻，但輕輕混合。避免起泡。使用前立即稀釋并避光。

4.TMB底物溶液

隨時(shí)可用。

5.微量滴定板

隨時(shí)可用。密封微量滴定袋并從袋中取出板。去除所有會(huì)不用于測(cè)定并放回袋中并與干燥劑一起重新密封。

6.小鼠血紅蛋白校準(zhǔn)器

向凍干的小鼠血紅蛋白校準(zhǔn)器中加入1.0 mL蒸餾水或去離子水，輕輕混合直至溶解。校準(zhǔn)器現(xiàn)在的濃度為3.40μg/mL（重組校準(zhǔn)器應(yīng)等分如果打算將來(lái)使用，則凍結(jié)）。小鼠血紅蛋白校準(zhǔn)器需要在使用前立即準(zhǔn)備好在每個(gè)步驟之間混合均勻。避免起泡。

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測(cè)定方案：

稀釋樣品

用于定量樣品中血紅蛋白的測(cè)定需要在使用前稀釋每個(gè)測(cè)試樣品。稀釋1：?4000適用于大多數(shù)血清/血漿樣品。對(duì)于絕對(duì)量化，樣本產(chǎn)生的結(jié)果以外校準(zhǔn)曲線的范圍，可能需要較小或較大的稀釋度。如果不確定樣品水平，則進(jìn)行連續(xù)稀釋強(qiáng)烈建議在運(yùn)行整個(gè)盤(pán)子之前使用一個(gè)或兩個(gè)代表性樣品。

要制備1:4000稀釋的樣品，將5μL樣品轉(zhuǎn)移至495μL1X稀釋劑中。這給你一個(gè)1:100稀釋。

接下來(lái)，通過(guò)將10μL轉(zhuǎn)移至390μL1X稀釋劑稀釋1:100樣品。你現(xiàn)在有一個(gè)1:4000稀釋你的樣品。在每個(gè)階段徹底混合。

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Kamiya基于免疫比濁技術(shù)的臨床診斷和研究免疫分析工具，用于脂質(zhì)評(píng)估、凝血、炎癥、糖尿病、營(yíng)養(yǎng)評(píng)估和血清蛋白測(cè)量。艾美捷科技是Kamiya的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。