鏈霉親和素(結(jié)構(gòu)式、用法及應(yīng)用)
Streptavidin 是一種 55kDa 四聚體蛋白,由 Streptomyces avidinii 分泌,可與生物素 (sc-204706) 牢固結(jié)合。鏈霉親和素因其對(duì)生物素獨(dú)特的高親和力而廣泛用于分子生物學(xué)。生物素-鏈霉親和素復(fù)合物的解離常數(shù) (Kd) 約為 ~10^15M. 生物素和生物素化分子的強(qiáng)親和力使鏈霉親和素成為診斷和實(shí)驗(yàn)室試劑盒中最重要的成分之一。鏈霉親和素/生物素系統(tǒng)具有迄今為止觀察到的最大的結(jié)合自由能之一,用于水溶液中蛋白質(zhì)和小配體的非共價(jià)結(jié)合。配合物在很寬的溫度和 pH 值范圍內(nèi)也非常穩(wěn)定。與天然鏈霉抗生物素相比,鏈霉抗生物素制劑包含 N 和 C 末端縮短的變體(核心鏈霉抗生物素蛋白),其在同質(zhì)性、溶解度、對(duì)蛋白水解降解的抗性和生物素結(jié)合袋的可及性方面具有改進(jìn)的特性。鏈霉親和素的分子量為 55kDa。
鏈霉親和素結(jié)構(gòu)式
鏈霉親和素用法
特定活動(dòng):大于15.7 U/mg,1個(gè)單位結(jié)合1μg生物素。
蛋白水解活性:小于10^-3 U/mg蛋白(Azocoll,25°C,24 H,pH 8.0)。
鏈霉親和素雖然在4°C下穩(wěn)定3周,但應(yīng)在-18°C以下儲(chǔ)存。
對(duì)于溶解形式的更長的存儲(chǔ),添加1mm EDTA和/或0.02%NAN3或通過無菌過濾器將溶液傳遞。
請(qǐng)防止凍融周期。
鏈霉親和素應(yīng)用
*酶標(biāo)記 (HRP, AP)?
*酶免疫測定 (EIA)
*使用生物素化抗體的酶聯(lián)免疫吸附測定 (ELISA)
*?細(xì)胞和組織染色(用于光學(xué)顯微鏡)
*蛋白質(zhì)印跡 (WB) 和其他基于膜的生物素檢測應(yīng)用
?*用于熒光標(biāo)記(FITC、TRITC 或 Texas Red* 熒光標(biāo)記)等。