速凍保存的組織樣本適用于單細(xì)胞核的抽提實(shí)驗(yàn)，高質(zhì)量的單細(xì)胞核，可用于隨后的單細(xì)胞核測序（snRNA-Seq）以及單細(xì)胞染色質(zhì)可及性測序（scATAC-Seq）等實(shí)驗(yàn)。如因?qū)嶒?yàn)時(shí)間或?qū)嶒?yàn)條件所限，不能立即進(jìn)行單細(xì)胞核抽提實(shí)驗(yàn)，可選擇將組織樣本進(jìn)行速凍保存和運(yùn)輸。

一、動(dòng)物組織樣本的速凍保存

???將動(dòng)物組織樣本（保證每份樣本濕重＞100mg）放入盛有預(yù)冷的PBS的培養(yǎng)皿中，反復(fù)潤洗以去除組織表面的筋膜和血塊。最后用干凈紗布或吸水紙吸干液體（防止液體在組織表面形成冰晶），注意操作迅速，全程保持在冰上操作。

???將動(dòng)物組織樣本放入事先做好標(biāo)記的凍存管（管壁與管蓋上都做好標(biāo)記），立即投入液氮速凍2min以上，隨后可置于-80℃短暫保存（1周內(nèi)）。

???將裝有樣本的凍存管轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存，并記錄相應(yīng)樣本信息和凍存位置信息。

???速凍保存的組織樣本：建議置于干冰環(huán)境中維持冷凍運(yùn)輸（-78℃），寄送前請(qǐng)先預(yù)估運(yùn)輸時(shí)間，確保運(yùn)輸過程中保留有足夠干冰，運(yùn)輸過程中注意做好緩沖保護(hù)。

二、植物組織樣本的速凍保存

?? 選取生長狀態(tài)良好，幼嫩部位的植物組織（保證每份樣本＞1g），放入盛有預(yù)冷ddH2O的培養(yǎng)皿中，反復(fù)潤洗以去除組織表面的泥土等雜質(zhì)。最后用干凈紗布或吸水紙吸干液體（防止液體在組織表面形成冰晶），注意操作迅速，全程保持在冰上操作。

?? 將組織樣本放入事先做好標(biāo)記的凍存管（管壁與管蓋上都做好標(biāo)記），立即投入液氮速凍2min以上，隨后可置于-80℃短暫保存（1周內(nèi)）。

?? 將裝有樣本的凍存管轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存，并記錄相應(yīng)樣本信息和凍存位置信息。

?? 速凍保存的組織樣本：建議置于干冰環(huán)境中維持冷凍運(yùn)輸（-78℃），寄送前請(qǐng)先預(yù)估運(yùn)輸時(shí)間，確保運(yùn)輸過程中保留有足夠干冰，運(yùn)輸過程中注意做好緩沖保護(hù)。

三、速凍樣本的注意事項(xiàng)

???需保證組織狀態(tài)良好，離體后立即速凍，并且保存和運(yùn)輸條件良好。

???珍貴樣本可以減少用量，但每份樣本量至少要保證能獲得10萬個(gè)細(xì)胞核。

???為確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，推薦每個(gè)樣本準(zhǔn)備3份，每份單獨(dú)分裝，一份為預(yù)實(shí)驗(yàn)樣本，因?yàn)椴煌锓N、不同組織的實(shí)驗(yàn)參數(shù)需要優(yōu)化；一份為正式實(shí)驗(yàn)樣本；一份為備份。?

?? 請(qǐng)同時(shí)在管壁與管蓋上標(biāo)記樣品信息，并且標(biāo)記清晰。

?? 為避免速凍的離心管在運(yùn)輸過程中破碎，建議使用凍存管運(yùn)輸。如使用1.5mL離心管，請(qǐng)確保其質(zhì)量良好，或者運(yùn)輸時(shí)將1.5mL離心管裝入15mL離心管中。

?? 對(duì)生物樣本進(jìn)行速凍過程中，會(huì)頻繁使用液氮。請(qǐng)佩戴護(hù)目鏡等安全保護(hù)措施，并避免液氮飛濺潑灑，以免燙傷。