炎癥性疼痛模型|動物模型構(gòu)建|誘導(dǎo)的炎性痛模型(CFA)
弗氏完全佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏完全佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
完全弗氏佐劑(CFA)是一種常用的致炎劑。完全弗氏佐劑(CFA)被廣泛應(yīng)用于腳掌皮膚、踝關(guān)節(jié)炎癥痛等慢性疼痛模型的制作。
完全弗氏佐劑 (CFA) 可誘導(dǎo)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫,并作為免疫增強劑增強免疫球蛋白的產(chǎn)生。CFA 誘導(dǎo)的這些反應(yīng)導(dǎo)致注射部位的組織炎癥和細(xì)胞因子的釋放。
建模方法:
用微量進(jìn)樣器抽取20μL完全弗氏佐劑(CFA)溶液,從小鼠一側(cè)后爪足趾部位進(jìn)針,將完全弗氏佐劑(CFA)溶液緩慢注射至小鼠掌心皮下位置,在皮下形成皮丘;停針20s緩慢旋轉(zhuǎn)出針,避免液體滲出。

檢測方法和結(jié)果
機械痛測定方法(Ascending測試法)
1.將試驗動物放置在機械痛金屬網(wǎng)架上靜置30 min-1 h,待動物不再張望、探究、較安靜后開始測試;
2.試驗動物安靜后用Von-Frey纖維絲緩慢輕柔的刺激待測后肢足底使纖維絲彎曲,持續(xù)2-3s觀察動物縮足反應(yīng)。按照纖維絲克數(shù)從小到大的順序逐一刺激受試動物,每一個克數(shù)的纖維絲連續(xù)刺激5次,每次刺激間隔至少10s。若出現(xiàn)的陽性反應(yīng)小于3次,則使用較大一級的纖維絲重復(fù)上述操作,當(dāng)測試第一次出現(xiàn)3次或3次以上的陽性反應(yīng),則該纖維絲為該動物的疼痛閾值(每只動物測2次測試,取其平均值)。
3.動物若由于刺激而出現(xiàn)抬足、躲避或舔足動作反應(yīng),則標(biāo)記為陽性(×),由于身體活動而引起的縮足反應(yīng)則不算在內(nèi);若沒有上述表現(xiàn),則標(biāo)記為陰性(О)。
纖維絲克數(shù):Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切斷值為2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切斷值為15.0g。


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