眼科基因治療

近日，又有一款新的基因療法產(chǎn)品VG901通過了歐洲藥品管理局（EMA）的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)，通過玻璃體內(nèi)注射遞送CNGA1基因，用以治療視網(wǎng)膜色素變性（Retinitis Pigmentosa, RP）。當(dāng)前基因治療在眼科領(lǐng)域蓬勃發(fā)展，展現(xiàn)出生物醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè)的嶄新力量，但接觸創(chuàng)新技術(shù)的同時(shí)也意味著更多的未知與挑戰(zhàn)。

走近眼科基因治療，或許你需要了解這些：

常見的眼科遺傳性疾病的特點(diǎn)及其治療靶點(diǎn)有哪些？

眼科基因治療臨床前研究如何評(píng)價(jià)效果？

視網(wǎng)膜下注射和玻璃體腔注射AAV各有什么特點(diǎn)？

如何提高藥物的靶向性？

……

在眼科疾病藥物研發(fā)中，通常會(huì)使用小鼠疾病模型進(jìn)行潛在藥物的藥理藥效評(píng)價(jià)。賽業(yè)生物眼科基因治療平臺(tái)由資深博士團(tuán)帶領(lǐng)，擁有眼科精細(xì)化操作的技術(shù)人才、國(guó)際知名的精密小動(dòng)物眼科儀器設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)化的眼科基因治療研究整體服務(wù)體系，可為客戶提供眼科疾病模型構(gòu)建、眼部注射給藥、眼部活體表型檢測(cè)和分子病理表型藥效檢測(cè)等一站式服務(wù)。

AI輔助的載體研制

AAV衣殼蛋白在基因治療和疫苗開發(fā)中發(fā)揮著重要作用，但傳統(tǒng)定向進(jìn)化篩選技術(shù)存在著文庫(kù)容量有限、成功率低、篩選效率低等諸多局限性，為此，我們通過深度學(xué)習(xí)建立了可預(yù)測(cè)的AI模型，以高效篩選用于基因治療藥物多目標(biāo)性的AAV突變體，實(shí)現(xiàn)大腦靶向、全眼表達(dá)能力、眼部穿透力等多部位靶向預(yù)測(cè)。相比于傳統(tǒng)定向進(jìn)化，AI輔助篩選AAV完成了多維度突破，即：

（1）文庫(kù)容量從有限到無限；

（2）使用AI模型而非濕實(shí)驗(yàn)來輸出新序列；

（3）周期由至少3年縮短至1年左右，篩選效率提高3-6倍。

豐富的眼科疾病模型

針對(duì)LCA2型、LCA10型、視網(wǎng)膜色素變性、視網(wǎng)膜血管增生、角膜內(nèi)皮營(yíng)養(yǎng)不良等眼科疾病，賽業(yè)生物開發(fā)了一系列基因編輯和人源化小鼠模型，同時(shí)針對(duì)您的需求，也可定制或合作開發(fā)基因編輯小鼠模型，如基因敲除、基因敲入、點(diǎn)突變、人源化小鼠模型，加速藥效學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的開展。

?已完成驗(yàn)證的眼科模型精選

?其他眼科模型精選

?高智能的眼科疾病模型定制

（1）TurboKnockout-Pro技術(shù)：可構(gòu)建眼科基因敲除、基因敲入、全人源化等復(fù)雜小鼠模型，無脫靶效應(yīng)、無專利風(fēng)險(xiǎn)、高同源重組效率，是基因治療藥物、抗體藥物、小分子藥物的重要研究工具！

（2）CRISPR-Pro技術(shù)：可構(gòu)建眼科基因敲除、基因敲入、點(diǎn)突變等小鼠模型，周期短、效率高、高嵌合率、生殖遺傳穩(wěn)定，同源重組效率高。

?眼科疾病模型研究——以小鼠視紫紅質(zhì)基因（Rhodopsin, RHO）人源化模型為例

（更多小鼠模型詳情及其驗(yàn)證數(shù)據(jù)，可點(diǎn)擊【閱讀原文】查看）

本模型利用基因編輯技術(shù)將小鼠內(nèi)源性Rho基因替換為對(duì)應(yīng)的人源RHO基因片段。而Mut-hRHO（P23H）小鼠是一個(gè)RHO全人源化且攜帶P23H位點(diǎn)突變的模型。

hRHO小鼠表型與野生型相似，Mut-hRHO小鼠視網(wǎng)膜厚度減小，ERG暗適應(yīng)a波和b波顯著降低。

專業(yè)的眼科藥效學(xué)分析平臺(tái)

賽業(yè)生物專業(yè)的眼科藥效學(xué)分析平臺(tái)可為您提供從眼部注射給藥、眼部活體檢測(cè)、眼部組織取材、到病理學(xué)分析和基因與蛋白表達(dá)分子檢測(cè)等全流程的眼科藥效學(xué)分析服務(wù)，為您解決眼科基因治療困境。

?精細(xì)化眼部注射給藥

賽業(yè)生物培養(yǎng)了一批眼科精細(xì)化操作技術(shù)人才，能進(jìn)行小鼠視網(wǎng)膜下注射、玻璃體腔注射和結(jié)膜下注射等高難度給藥方式。

在C57小鼠眼球上使用hamilton微量注射器進(jìn)行不同方式注射，注射物為可見染料。

?眼部活體表型檢測(cè)

賽業(yè)生物培養(yǎng)了一批眼科精細(xì)化操作技術(shù)人才，可熟練掌握活體眼部檢測(cè)技術(shù)，如熒光眼底成像、眼前節(jié)拍照、光學(xué)相干斷層掃描（OCT）、視網(wǎng)膜電圖（ERG）、閃光視覺誘發(fā)電位（F-VEP）、熒光素眼底血管造影（FFA）、激光光凝術(shù)、視覺水迷宮、視覺明暗箱、OptoTrack 小動(dòng)物視覺刺激動(dòng)態(tài)跟蹤等。

視網(wǎng)膜下和玻璃體腔注射表達(dá)GFP的AAV后3周進(jìn)行檢測(cè)，眼底可見較強(qiáng)GFP信號(hào)，鋪片結(jié)果可見視網(wǎng)膜下注射后視網(wǎng)膜、RPE和脈絡(luò)膜區(qū)域均見較強(qiáng)GFP信號(hào)，玻璃體腔注射后再視網(wǎng)膜靠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層區(qū)域見較強(qiáng)GFP信號(hào)。

?分子病理表型驗(yàn)證

賽業(yè)生物專業(yè)的眼科藥效學(xué)分析平臺(tái)除了提供眼部注射給藥和活體表型檢測(cè)外，同時(shí)積累了包括眼科專業(yè)采樣技術(shù)（如角膜、晶狀體、視網(wǎng)膜、RPE、脈絡(luò)膜+鞏膜、視神經(jīng)組織取材），以及專業(yè)病理及分子檢測(cè)技術(shù)（如Western Blot、qPCR、ELISA、視網(wǎng)膜/脈絡(luò)膜鋪片、視網(wǎng)膜切片、H&E染色、免疫組化、免疫熒光等）等全流程的眼科藥效學(xué)分析服務(wù)，為您解決眼科基因治療困境。

左上-小鼠眼球玻璃體腔注射AAV-CMV-GFP后3周鋪片GFP鏡檢結(jié)果；中上-小鼠進(jìn)行CNV激光造模后D7進(jìn)行脈絡(luò)膜鋪片IB4染色結(jié)果；右上-CNV造模后脈絡(luò)膜單個(gè)激光點(diǎn)雙標(biāo)染色I(xiàn)B4+Collagen I+DAPI；左下-C57小鼠眼球H&E染色20×；中下-C57小鼠眼球視網(wǎng)膜H&E染色400×；右下-視網(wǎng)膜雙標(biāo)染色RPE65+CHX10+DAPI。