? ? ??蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng)（實(shí)驗(yàn)原理簡(jiǎn)單、比較容易操作。）是一個(gè)反應(yīng)原理較為簡(jiǎn)單，較為容易進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)。這里介紹一下這個(gè)反應(yīng)的原理，實(shí)驗(yàn)過程十分安全，大家有實(shí)驗(yàn)條件的可以自行在家中嘗試。

? ? ? ?首先，當(dāng)尿素加熱到180℃時(shí)，2分子尿素縮合，放出1分子氨，形成雙縮脲。反應(yīng)方程如圖1所示：

? ? ? ?雙縮脲中含有-CO-NH-，在堿性條件下可以與Cu2+螯合形成螯合物，該螯合物為紫紅色。其結(jié)構(gòu)如圖2所示：

? ? ? ?看到這里，大家應(yīng)該能意識(shí)到該實(shí)驗(yàn)檢測(cè)蛋白質(zhì)的依據(jù)是什么了。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)是由多個(gè)氨基酸以肽鍵鏈接而成的，所以二肽以上的多肽分子中含有多個(gè)與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的結(jié)構(gòu)。固蛋白質(zhì)或二肽以上的多肽也可以在堿性條件下與Cu2+反應(yīng)生成紫紅色物質(zhì)，且顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正相關(guān)。但是這同時(shí)說明，具有相似結(jié)構(gòu)的物質(zhì)都會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，如含有-CS-NH2、-CH2-NH2、-CRH-NH2等基團(tuán)的物質(zhì)或含有過量銨鹽的物質(zhì)都會(huì)對(duì)此反應(yīng)產(chǎn)生干擾。

? ? ? ?從上述實(shí)驗(yàn)原理我們可以看出，氨基酸并不能進(jìn)行此反應(yīng)，所以該反應(yīng)也可以用來檢測(cè)蛋白質(zhì)的水解程度。

詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟如下：

①取1支試管，加入少許尿素，試管口放一片濕潤(rùn)的石蕊試紙，加熱至試紙變?yōu)樗{(lán)色，且試管內(nèi)物質(zhì)蒸干后停止加熱。冷卻后用吸量管加入10%的NaOH試劑1ml搖勻，再加入2~4滴1%的CuSO4，搖勻觀察溶液顏色變化。

②取1支試管，加入稀釋后的雞蛋清。用吸量管加入10%的NaOH試劑1ml搖勻，再加入2~4滴1%的CuSO4，搖勻觀察溶液顏色變化。（需要準(zhǔn)備：藥匙、吸量管、洗耳球、試管夾、試管架、尿素、NaOH、CuSO4）

自己在家中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的話，可以用雞蛋清的稀釋液進(jìn)行蛋白質(zhì)的檢測(cè)。在實(shí)驗(yàn)過程中需要注意的是，配制雙縮脲試劑時(shí)，應(yīng)避免CuSO4過量生成藍(lán)色的Cu（OH）2，其顏色會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。有條件的可以嘗試用氨基酸和雙縮脲進(jìn)行反應(yīng)。

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?作者：神州

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??審核：未名

文章來自APC編輯部科普組

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