這里有一個技術難題等你解鎖

卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病隱匿，致死率占各類婦科腫瘤的首位。研究卵巢癌發(fā)生、復發(fā)和耐藥機制等，有針對性地制定治療策略刻不容緩。如何高效地從卵巢癌中分離培養(yǎng)卵巢癌細胞，對卵巢癌的研究至關重要。

為此，我們做了什么技術突破

成功在體外培養(yǎng)了原位卵巢癌，算不算

并且使該卵巢癌在體外可增殖哦

后期還會用于藥物藥敏篩選呢

悄悄告訴你，我們培養(yǎng)細胞有一套

采用新型3D細胞培養(yǎng)技術

養(yǎng)好細胞不再難

有人會說，不就養(yǎng)個細胞，有什么難的

真的挺難的~不信你看~

[實例展示]

獲得2例卵巢癌患者的捐贈組織，進行了2D培養(yǎng)與3D培養(yǎng)。

經培養(yǎng)發(fā)現：2例卵巢細胞在傳統(tǒng)的平面培養(yǎng)上，細胞形態(tài)并未發(fā)現明顯的差異，在一周內還具有卵巢癌荷包蛋特征樣細胞形態(tài)，同時也含有一些貼壁生長的間質細胞，隨著培養(yǎng)時間的增長，卵巢癌細胞逐漸退化或死亡，其生長空間被間充質細胞所占據（見圖1）。這是目前原位腫瘤細胞體外培養(yǎng)的一道瓶頸。

圖1. 2例捐獻者分離細胞在2D培養(yǎng)條件下的生長情況

在三維培養(yǎng)條件下，可見細胞密度隨培養(yǎng)時間的增加在逐漸增多且生長良好，隨著培養(yǎng)時間的延長并未出現平面培養(yǎng)上的纖維狀細胞逐漸增多的現象，可見三維培養(yǎng)更有利于腫瘤細胞的生長（見圖2）。同時，我們還通過MTT法檢測了細胞在材料中的增殖情況（見圖3）發(fā)現：細胞的增殖活性與細胞狀態(tài)呈正相關，患者1較患者2組織分離獲得的細胞活性低，這可能是卵巢癌的種類與分級有關。

圖2. 2例捐獻者分離細胞在3D培養(yǎng)條件下的生長情況

圖3. 2例捐獻者分離細胞在3D培養(yǎng)條件下的增殖情況

從三維培養(yǎng)的增殖檢測數據也不難發(fā)現，在體外三維培養(yǎng)條件下癌細胞的增殖速度逐漸減緩，這也更契合生物體內腫瘤的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，腫瘤細胞雖較正常細胞增殖迅速，但在體內腫瘤潛伏期及腫瘤灶轉移等均是一個隱秘而漫長的過程。

針對實驗室條件培養(yǎng)的2例卵巢癌細胞的三維形態(tài)，我們對照卵巢癌組織的病理分型特征，對此2例卵巢癌腫瘤進行了初步診斷，獲得以下結論：?

1.?患者2的卵巢癌腫瘤分級高于患者1；

2. 從三維細胞培養(yǎng)形態(tài)上，患者1分離獲得的卵巢癌細胞呈荷包蛋樣且細胞大小不一，在分離處理過程中有大量黃色黏液流出，且在分離初期細胞多聚團，考慮為黏液性卵巢癌；

3. 從三維細胞培養(yǎng)形態(tài)上，患者2分離獲得的卵巢癌細胞細胞個大，呈顯著的荷包蛋樣且增殖速度較快，腫瘤細胞惡性程度較高，可能為上皮性囊腔腫瘤，可能存在轉移灶。

實驗取得了令人振奮的結果：

經與患者病理檢測報告對比，最終發(fā)現我們根據三維培養(yǎng)的細胞形態(tài)得到的初步判斷結果與最終病理檢測結果基本一致。

特別說明：本實驗由華中科技大學同濟醫(yī)院·陳剛教授團隊，提供卵巢癌組織材料及技術指導。

到此我們不得不提

本項研究最關鍵的技術——3D細胞培養(yǎng)

成功解決細胞培養(yǎng)這一技術難題

3D細胞培養(yǎng)是一種模擬體內三維生長環(huán)境的細胞培養(yǎng)方式。通過讓細胞聚集成3D球體或者將細胞在成分結構類似于實體組織的三維結構載體上粘附、伸展和生長，從時間和空間上共同調控細胞的增殖和分化，使組織結構和功能得以較大程度保留。

與2D培養(yǎng)相比，3D培養(yǎng)更真實地再現了細胞與細胞之間以及細胞與細胞間微環(huán)境的相互作用，更準確地模擬組織在正常生理狀態(tài)下情況及反應，突破了傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)耗時繁瑣，細胞產量微小等局限性。

應用：隨著3D細胞培養(yǎng)技術不斷完善，以此為基礎的新型高通量藥物檢測及篩查系統(tǒng)正在成為生物醫(yī)藥領域的技術新熱點，并逐漸在藥物研發(fā)、療效評估，毒性檢測及臨床檢測等方面發(fā)揮著越來越廣泛的作用。

重磅出擊

(Atagenix—3D細胞培養(yǎng))

我們的3D細胞培養(yǎng)技術秘籍

——新型的3D細胞培養(yǎng)材料AccuraMatrix

國際領先、自主知識產權的新型生物構架，用于體外細胞3D培養(yǎng)及類組織器官（Organoid）的建立。

普健生物3D培養(yǎng)材料優(yōu)點

1高純度、低免疫原性；

2多層氣孔基質：與生理細胞外基質相似；

3細胞附著的可質子化表面：增強細胞附著；

4可調節(jié)物理和化學性質的基質材料：滿足不同類型細胞生長的特定要求；

5使用廣泛，可應用于細胞生長和分化、干細胞研究、代謝和毒理學研究、體內外血管生長研究、體外腫瘤細胞生物學特性研究、腫瘤異種移植模型研究等領域。