關(guān)鍵詞：PCR實(shí)驗(yàn)室核酸氣溶膠污染 比林科漢核酸去除儀 諾沃賽德核酸去除液 避免假陽性

PCR反應(yīng)具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性等優(yōu)點(diǎn)，在操作過程中，極其微量的污染即可造成假陽性結(jié)果的產(chǎn)生。

PCR實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)污染的原因：

1、 標(biāo)本間交叉污染：主要有收集標(biāo)本的容器被污染，或標(biāo)本放置時(shí)，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有標(biāo)本 而造成相互間交叉污染；標(biāo)本核酸模板在提取過程中，由于 吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染；有些微生物標(biāo)本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴(kuò)散，導(dǎo)致彼此間的污染。

2、 PCR試劑的污染：在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被 PCR核酸模板污染。

3、 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物污染：這是PCR反應(yīng)中最主要最常見 的污染問題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大(一般為 10^13拷貝/ML)， 遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽性結(jié)果。

4、 氣溶膠污染：在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管，開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48000拷貝，因而，氣溶膠污染是一個(gè)值得特別重視的問題。

5、 實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染：在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽性對(duì)照的檢驗(yàn)室，因?yàn)榭寺≠|(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高，另外在純化過程中需用較多的用具及試劑，而且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒，由于活細(xì)胞的生長繁殖的簡便性及具有很強(qiáng)的生命力，其污染可能性也很大。

防止污染的方法

1、 合理分隔實(shí)驗(yàn)室

2、 吸樣槍：吸樣要慢，吸樣時(shí)盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染

3、 預(yù)混和分裝PCR試劑

4、 防止操作人員污染

5、 設(shè)立適當(dāng)?shù)年栃詫?duì)照和陰性對(duì)照

6、 減少PCR循環(huán)次數(shù)

如何去除PCR實(shí)驗(yàn)室核酸污染？

? ? ? 諾沃賽德核酸污染去除液，能夠強(qiáng)力高效的去除實(shí)驗(yàn)室中核酸污染問題。諾沃賽德Novocide是國內(nèi)唯一一款可以用于空間噴霧的核酸去除劑，試劑特點(diǎn)：不含過氧化氫，PH值接近中性，不含酶，強(qiáng)效的DNA片段捕捉粘合劑，腐蝕性極低。搭配比林科漢核酸污染清除儀能夠達(dá)到1+1>2的效果。比林科漢核酸污染清除儀采用獨(dú)特的干霧發(fā)散原理，超高速噴射，可以將核酸清除劑發(fā)散成小于1微米的顆粒，均勻擴(kuò)散到空氣中，以氣溶膠的形式捕獲核酸片段并分解掉污染源。其優(yōu)點(diǎn)是覆蓋面積廣，納米級(jí)干霧滲透性好，氣溶膠均勻擴(kuò)散，智能化系統(tǒng)，單位用量少成本低。