流式多因子介紹
隨著流式細(xì)胞術(shù)和固相化技術(shù)的普及和基于微球的多指標(biāo)檢測(cè)技術(shù)的革命式發(fā)展,采用流式細(xì)胞術(shù)同樣可以對(duì)可溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。與傳統(tǒng)ELISA 技術(shù)只能檢測(cè)一個(gè)指標(biāo)相比,流式多因子檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)從一份標(biāo)本中同時(shí)檢測(cè)多種指標(biāo),大大提高了科研人員的工作效率以及實(shí)現(xiàn)了對(duì)稀少珍貴樣品的多指標(biāo)分析。其中代表技術(shù)是Luminex和BD CBA (cytometric bead array system, CBA), 以及eBioscience公司旗下的FlowCytomix技術(shù)。百泰派克公司采用BD公司的CBA技術(shù)以及FlowCytomix技術(shù)為廣大科研人員提供多參數(shù)細(xì)胞因子或其它可溶性分子檢測(cè)服務(wù)。
檢測(cè)原理:
該技術(shù)的檢測(cè)原理與夾心法免疫測(cè)定相同。熒光微球被選擇的抗原特異的抗體包被。已包被了抗體的微球混合物與樣本進(jìn)行孵育。樣本中的待檢物(如細(xì)胞因子等)與微球上包被的抗體結(jié)合。生物素標(biāo)記的抗體混合物,與結(jié)合于捕獲抗體(微球)的待檢物特異性結(jié)合。最后加入Streptavidin-PE,與生物素結(jié)合進(jìn)行熒光檢測(cè)。流式細(xì)胞儀根據(jù)微球大小和熒光標(biāo)記強(qiáng)弱來區(qū)分微球群。2種大小的微球(4.4μm, 5.5μm)內(nèi)部分別標(biāo)記 9、11種不同強(qiáng)度的熒光染料(遠(yuǎn)紅熒光,可被氬、氦氖甚至紫外光源激發(fā),發(fā)射波長(zhǎng)690nm),構(gòu)成了20種可以同時(shí)被流式細(xì)胞儀識(shí)別和區(qū)分的不同微球故可以同時(shí)在一份標(biāo)本中進(jìn)行多達(dá)20種指標(biāo)的檢測(cè)。
