艾美捷CompTech丨人補(bǔ)體C3c蛋白說(shuō)明書(shū)
艾美捷CompTech人補(bǔ)體C3c蛋白:
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名稱:?C3c
編號(hào):?A116
規(guī)格:?250 μg/vial
濃度:?1.0 mg/mL (實(shí)際濃度見(jiàn)分析證書(shū))
類型?冷凍液體
純度:?>90%由SDS-PAGE
緩沖區(qū):?10 mM磷酸鈉,145 mM氯化鈉,pH 7。2
消缺系數(shù)。?A280 nm在1.0 mg/mL時(shí)的=為1. 10
分子量:?139000Da (3鏈)
防腐劑:?無(wú),0.22μm過(guò)濾
存儲(chǔ):?- 7 0oC或以下。避免凍融。
根源?正常人血清?(經(jīng)認(rèn)證的HBsAg和HCV、HIV1和HIV-II抗體檢測(cè) 均為陰性) 。
預(yù)防措施?在處理人體血液制品時(shí)要采取常規(guī)的預(yù)防措施。
一般說(shuō)明
C3c是由iC3b?(失活的C3b) 通過(guò)蛋白裂解(Law,S。K.A.和里德,K。
B.?M. (1995)).在因子H、因子CR1或MCP存在下,I因子將C3b裂解C3b產(chǎn)生的。如果???iC3b與CR1結(jié)合,C3c可以通過(guò)因子I的額外裂解產(chǎn)生。因子H不能作為這種分裂的輔助?因子。C3c也可以通過(guò)胰蛋白酶樣蛋白酶對(duì)iC3b的作用而產(chǎn)生。如果C3b前體附著在一?個(gè)表面上,那么iC3b將繼續(xù)附著在該表面上,當(dāng)iC3b被裂解時(shí),C3c被釋放到周圍的?溶液中,而C3dg/C3d片段則保留在該表面上。流體相C3b的分解情況相似,但在這種?情況下,C3c和C3dg/C3d都是可溶性片段。
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物理特性和結(jié)構(gòu)
分子量:??139,000道爾頓, 由三個(gè)二硫鍵連接鏈 (75,000?Da、39,000?Da和?25,000?Da) 組成。C3c是糖基化的。C3c的結(jié)構(gòu)可能存在相當(dāng)大的異質(zhì)性,因?yàn)樗?由蛋白酶的作用形成的,而且它對(duì)額外的蛋白水解消化極其敏感。ofiC3b消化的初始?階段?(75,000、63,000和39,000?Da) 產(chǎn)生C3c?(75,000、25,000和39,000?Da) 和???C3dg?(38,900?Da) 。25000Da的片段來(lái)自n端,39000Da的片段來(lái)自C3b的alpha鏈的c?端。C3dg的額外裂解產(chǎn)生C3d?(33,800?Da) 。C3c的兩個(gè)較小的片段?(25000和??????39000Da) 通過(guò)一個(gè)二硫鍵相互連接,而較小的片段 (25000Da) 通過(guò)一個(gè)二硫鍵連接?到beta鏈?(75000Da) (Morley,B。J.和沃爾波特,M。J. (2000) ;法律,S。K.A.?和里德,K。B.M. (1995) ;多茲,A。W.和Sim,R。B.編輯 (1997) ;摩根,B。
P.ed. (2000)).一些鏈有一個(gè)c端精氨酸殘基,它可能被血清羧基肽酶部分裂解,導(dǎo)致?額外的異質(zhì)性。
功能
目前還沒(méi)有已知的C3c的生物學(xué)功能。它通過(guò)CR1作為輔助因子的作用或胰蛋白?酶樣蛋白酶的作用(Lambris,J。D. (1988)).它很快被從循環(huán)中清除。
測(cè)定
目前還沒(méi)有針對(duì)C3c的功能檢測(cè)方法。ELISA和濁度法用于定量血漿中的?C3c,但C3、C3b和iC3b可能會(huì)干擾某些檢測(cè)。SDS凝膠的蛋白印跡可用于鑒定和定?量的蛋白質(zhì)和確定鏈結(jié)構(gòu)。
Iu體內(nèi)
在補(bǔ)體激活過(guò)程中,C3b產(chǎn)生于C3的蛋白水解裂解。在侵襲性補(bǔ)體激活過(guò)程中??(在膿毒癥和感染部位) 可能會(huì)形成高濃度的C3b,但大部分是液體期C3b。在血液中?,因子H和I迅速裂解C3b形成iC3b。雖然iC3b對(duì)胰蛋白酶樣酶非常敏感,但它在血漿?或血清中的壽命很長(zhǎng)?(半衰期數(shù)小時(shí)) 。由于血漿中含有過(guò)量的蛋白酶抑制劑,因此?游離凝血酶、纖溶酶或其他活性蛋白酶很少,iC3b仍然是iC3b。然而,在血液中,人?類紅細(xì)胞上的CR1受體誘導(dǎo)了因子I的第三次切割,從而從C3dg中釋放C3c(Dodds,a。?W.和Sim,R。B.編輯 (1997) )。
參考文獻(xiàn)
Dodds, A.W. and Sim, R.B. editors (1997) Complement. A Practical Approach (ISBN 019963539) Oxford University Press, Oxford.
Lambris, J.D. (1988) The multifunctional role of C3, the third component of complement. Immunol Today. 9:387-93.