艾美捷測序級 II,純化胰蛋白酶用途和相關研究方案
測序級?II,純化胰蛋白酶背景:
胰蛋白酶是一種胰絲氨酸蛋白酶,基于帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側鏈,具有底物特異性。它來源于34kDa的無活性前體酶原胰蛋白酶原,在酶促去除N-末端6-氨基酸前導序列后產生23.8kDa胰蛋白酶分子。最適pH為8.0。胰蛋白酶被有機磷化合物如二異丙基氟磷酸鹽和來自胰腺的天然抑制劑抑制。大豆、利馬豆和蛋清也是天然抑制劑的來源。胰蛋白酶裂解精氨酸和賴氨酸的酰胺和酯鍵。沃辛頓測序級胰蛋白酶已被進一步純化,以去除可能干擾胰蛋白酶消化實驗的微量污染蛋白酶和自溶產物,并在PAGE上顯示出單一條帶。
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艾美捷測序級?II,純化胰蛋白酶用途:
在組織培養(yǎng)工作中,許多研究人員使用了沃辛頓胰蛋白酶,TRSEQZ、TRSEQII和TRTPCK通常用于蛋白質測序、定位和結構研究。沃辛頓改良測序級胰蛋白酶,SequeENZ?,TRSEQZ經過廣泛純化以去除可能影響消化過程特異性的污染蛋白酶和胰蛋白酶自溶副產物。隨后,對酶進行化學修飾以最小化自溶過程并增加穩(wěn)定性。進一步處理改性的胰蛋白酶以去除殘留的自降解產物?;瘜W修飾后,常規(guī)檢查酶的特異性。
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穩(wěn)定性/儲存:大多數等級的沃辛頓胰蛋白酶在2-8°C下儲存時可穩(wěn)定2-3年。防止受潮。
注:1mg胰蛋白酶≥180個TAME單位,10350個BAEE單位,3450個USP/NF單位。
TAME單元:一個單元在25°C,pH 8.2,10mM鈣存在下,每分鐘水解1μmol對甲苯磺酰基-L-精-氨-酸甲酯(TAME)。
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技術說明:病毒和支原體游離胰蛋白酶(TRTVMF)已通過0.22微米孔徑的膜過濾,凍干,接受γ射線照射,并測試病毒和支菌體。
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艾美捷測序級?II,純化胰蛋白酶相關研究:
糜蛋白酶(CDAG/CDS/CDI)
膠原酶(CLS1-4/CLSPA)
脫氧核糖核酸酶I(DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
透明質酸酶(HSE/HSEP)
中性蛋白酶(Dispase,NPRO)
蛋白酶K(PROK)
胰蛋白酶抑制劑(LBI/OI/SI/SIC)
細胞分離優(yōu)化系統(tǒng)(CIT)
肝細胞分離系統(tǒng)(HIS)
新生兒心肌細胞隔離系統(tǒng)(NCIS)
木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)(PDS/PDS2)