7-氨基放線菌素D(7-AAD);熒光DNA染料
7-Aminoactinomycin D (7-AAD,7-氨基放線菌素D) 是一種熒光 DNA 染料,通常用于流式細(xì)胞儀分析中檢測(cè)或排除非活細(xì)胞,因?yàn)樗ǔ1换罴?xì)胞排除。它顯示 488、546 的激發(fā)光譜 , 和 578 nm,發(fā)射光譜為 650 nm。由于 7-AAD 在光譜的遠(yuǎn)紅色范圍內(nèi)被檢測(cè)到,它與常用探針的光譜重疊最小,因此可以與FITC等探針結(jié)合使用。 7-AAD 已被用于評(píng)估細(xì)胞凋亡和細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性,并對(duì)已通過多種方法固定和透化的細(xì)胞中的 DNA 進(jìn)行染色。
圖1.7-Aminoactinomycin D化學(xué)結(jié)構(gòu)
7-Aminoactinomycin D基礎(chǔ)信息
中文名:7-氨基放線菌素D;
英文名:7-AAD;7-Aminoactinomycin D;7-Amino-AMD; Actinomycin D;Fluorescent DNA dye;NSC 239759;
CAS號(hào):7240-37-1SMILESC[C@@H]1[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N(CC(=O)N([C@H](C(=O)O1)C(C)C)C)C)C(C)C)NC(=O)C3=CC
分子式 :C62?H87?N13?O16
分子量:1270
閃點(diǎn) :801.0±34.3 °C
熔點(diǎn):252-253° C
沸點(diǎn):~1400.8° C at 760 mmHg (預(yù)計(jì))
密度:1.4±0.1 g/cm3
蒸汽壓:0.0±0.3 mmHg at 25°C
溶解度:溶于DMSO(20毫克/毫升)、乙醇、氯仿(1毫克/毫升)和二氯甲烷(20毫克/毫升)。
性狀:固體
儲(chǔ)藏條件 : -20° C。
圖2.7-Aminoactinomycin D熒光光譜
使用案例(搭配Annexin?V-APC檢測(cè)喜樹堿誘導(dǎo)的Jurkat細(xì)胞凋亡效果)
圖3.Jurkat細(xì)胞用5 μM喜樹堿?(Camptothecin) (右) 或未加藥 (左) 處理4 h,7-AAD搭配Annexin?V-APC染色后,流式細(xì)胞儀熒光檢測(cè)。Annexin V-APC單陽細(xì)胞為早期凋亡細(xì)胞,Annexin V-APC和7-AAD雙陽細(xì)胞為壞死或晚期凋亡細(xì)胞,7-AAD單陽細(xì)胞為裸核細(xì)胞。