20200512-基因工程第一部分





應(yīng)該是cDNA文庫




通過大小粗略地看看。凈電荷數(shù)是單位片段帶有的電荷數(shù)。


Ⅰ型酶要得多,要ATP、Mg離子、SAM;干活不行,識別位點(diǎn)之后1000到5000個堿基隨機(jī)開始切
Ⅲ型酶切割的方式是識別位點(diǎn)之后7到8個以后,一個七個一個八個,只留一個堿基突出來,不利于后期操作,Ⅱ型粘性末端好

形成3’羥基和5’磷酸基是本來的樣子。本來的核苷酸是3‘羥基和5’磷酸基,限制性內(nèi)切酶給他切回自然的樣子。如圖切1位的磷酸二脂鍵。


回文結(jié)構(gòu)從5‘到3’讀兩條鏈都一樣

稀切酶是識別的序列比較少見,很長的序列出現(xiàn)概率低,富含GC或者富含AT的序列少(GCAT分布不均)
同裂酶是識別同樣序列的不同限制酶,注重識別一樣,之后切哪里不管。識別的一樣就是同裂酶
同裂酶是產(chǎn)生相同的粘性末端,有可能之前的過程不一樣


甲基化保護(hù)自身的DNA片段使限制性內(nèi)切酶不切自己的DNA

催化的連接位點(diǎn)也是自然的

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