蛋白定量與磷酸化組
蛋白定量與磷酸化組就是將磷酸化蛋白質進行定量分析,即磷酸化定量蛋白組分析,用于檢測某一磷酸化蛋白的含量水平。?
磷酸化定量蛋白組分析的大致流程如下:首先將含磷酸化修飾的蛋白樣品進行酶切;然后利用TiO2、抗體或IMAC技術富集磷酸化肽段;將富集得到的磷酸化肽段進行串聯(lián)質譜分析;最后利用質譜數(shù)據(jù)結合生物信息學分析對磷酸化蛋白質的含量進行鑒定。?
在進行磷酸化蛋白定量分析時,由于很多樣品是磷酸化和非磷酸化蛋白的混合物,磷酸化肽段豐度較低,因此對磷酸化蛋白質或肽段的富集是有效鑒定的關鍵一步,直接影響著鑒定結果的準確性。?
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