細(xì)胞污染
細(xì)胞污染是新手實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的操作問(wèn)題，更為嚴(yán)重的問(wèn)題就在于一個(gè)細(xì)胞的污染可能會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞，再者會(huì)造成許多珍貴的細(xì)胞死亡。
一、細(xì)菌污染（較容易被發(fā)現(xiàn)）
二、霉菌感染 （較容易被發(fā)現(xiàn)）
三、支原體污染（難被發(fā)現(xiàn)）
四、黑膠蟲(chóng)污染
五、病毒污染
六、交叉感染
一、菌類污染
菌類污染通常是操作不規(guī)范或無(wú)菌措施不到位等引起的，這類污染通常容易觀察。
1、細(xì)菌污染：
細(xì)胞污染后的變化：
①污染后由于有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生，因此培養(yǎng)基會(huì)短時(shí)間內(nèi)由紅色變?yōu)辄S色；
②由于細(xì)菌大量增殖，培養(yǎng)基變渾濁，稍微震蕩后可見(jiàn)培養(yǎng)基表面有漂浮物；
③普通倒置顯微鏡高倍鏡觀察，胞漿內(nèi)可見(jiàn)大量顆粒；
④細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，逐漸變圓脫落。
細(xì)菌污染種類：白色葡萄球菌，大腸桿菌，假單胞菌、枯草桿菌等。
應(yīng)對(duì)措施：通常，我們?cè)谂囵B(yǎng)基中添加青鏈霉素預(yù)防細(xì)菌污染。細(xì)胞一旦污染后，應(yīng)立即排查污染源，更換所有的試劑耗材。細(xì)胞遭受污染后一般不具有搶救價(jià)值，滅活后予以丟棄。
二、霉菌污染
細(xì)胞污染后的變化：
①一般來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)液不會(huì)變渾濁；
②比較容易發(fā)現(xiàn)，肉眼可見(jiàn)點(diǎn)狀菌落（淡黃色或者白色）漂浮在培養(yǎng)基表面；
③普通倒置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)絮狀交錯(cuò)的菌絲或菌團(tuán)生長(zhǎng)在細(xì)胞之間；有時(shí)真菌并不是直接分布于細(xì)胞貼壁層，需要通過(guò)調(diào)整顯微鏡仔細(xì)觀察尋找菌絲或菌團(tuán)。
應(yīng)對(duì)措施：由于真菌和細(xì)胞的生理特性類似，通常不在培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的抗生素進(jìn)行預(yù)防。細(xì)胞一旦發(fā)現(xiàn)被真菌污染，應(yīng)立即查找污染源，進(jìn)行清理消毒。在無(wú)法控制的時(shí)候，需對(duì)整個(gè)培養(yǎng)室進(jìn)行全面消毒。
三、支原體污染
支原體污染是最麻煩的，通常來(lái)源有這幾個(gè)1、已受污染的細(xì)胞2、操作人員的疏失3、已受污染的培養(yǎng)基、血清4、操作環(huán)境不良、實(shí)驗(yàn)器具不潔等。由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實(shí)驗(yàn)室之操作人員的污染亦可能為污染源，須十分注意。而萬(wàn)一細(xì)胞已受支原體污染時(shí)，最佳的處理原則為將細(xì)胞高壓滅菌后丟棄，以免污染其它潔凈的細(xì)胞株。
細(xì)胞污染后的變化：
①培養(yǎng)液不變渾濁，但會(huì)很快變成黃色；
②多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)方面少有明顯變化；
③在倒置顯微鏡下可見(jiàn)胞漿出現(xiàn)小顆?；蚩张?/p>
細(xì)胞證實(shí)支原體污染后，應(yīng)立即查找污染源，進(jìn)行排除。細(xì)胞建議直接丟棄。若想挽救，可利用支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，對(duì)四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮抗生素敏感的特點(diǎn)來(lái)去除。
四、黑膠蟲(chóng)污染
引起原因：往往來(lái)源于血清；
細(xì)胞污染后的變化：
①低倍鏡下觀察時(shí)可見(jiàn)黑色小點(diǎn)，高倍鏡下可見(jiàn)到其做布朗運(yùn)動(dòng)，像小蟲(chóng)游來(lái)游去；
②細(xì)胞培養(yǎng)液仍然清亮，污染較輕時(shí)對(duì)細(xì)胞無(wú)影響；若太多就會(huì)對(duì)細(xì)胞造成影響。
應(yīng)對(duì)措施：建議不是很珍貴的細(xì)胞，就直接丟棄。
五、病毒污染
引起原因：病毒可能來(lái)自于血清；
細(xì)胞污染后的變化：
①污染后培養(yǎng)液無(wú)明顯變化；
②大部分細(xì)胞也不會(huì)有明顯的形態(tài)變化；
應(yīng)對(duì)措施：對(duì)于黑膠蟲(chóng)的預(yù)防，只能采用高品質(zhì)的血清。
六、交叉污染
引起原因：兩種或兩種細(xì)胞以上的實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)器具、試劑等混用而易造成的污染，這就純屬個(gè)人原因了，所以我們?cè)谠囼?yàn)的時(shí)候一定要做好防護(hù)，按標(biāo)準(zhǔn)操作
應(yīng)對(duì)措施：為了避免細(xì)胞間的交叉污染，培養(yǎng)過(guò)程中，所有器具和試劑要嚴(yán)格區(qū)分，不能混用。細(xì)胞按照生長(zhǎng)特性進(jìn)行順序、單獨(dú)操作。所有細(xì)胞株在早期保存種子。
總：細(xì)胞發(fā)生污染后，任何一種挽救細(xì)胞的處理都可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生未知的影響。因此，不到萬(wàn)不得已，不必施救。
