喜樹(shù)堿（Camptothecin，CPT）為吡咯喹啉細(xì)胞毒性生物堿，是除紫杉醇之外研究最多的天然抗腫瘤藥物之一，存在于在我國(guó)特有的珙桐科植物喜樹(shù)的果實(shí)或根中。《浙江民間常用草藥》中記載，喜樹(shù)的根皮具有清熱解毒，散結(jié)消腫之功效，果實(shí)具有活血化瘀之功效，常用來(lái)煎湯內(nèi)服或者是研末吞服，治療牛皮癬、瘡腫等癥狀。

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1966年，美國(guó)國(guó)家癌癥研究所的Monreoe E. Wall?和Mansukh C. Wani?從原產(chǎn)于中國(guó)中部的喜樹(shù)樹(shù)皮和樹(shù)干中分離得到一種五環(huán)單萜生物堿，這是對(duì)喜樹(shù)堿的最早研究。

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1967年到1970年，研究者發(fā)現(xiàn)該五環(huán)單萜生物堿在體外對(duì)Hela細(xì)胞（宮頸癌細(xì)胞的細(xì)胞系）、L1210細(xì)胞（小鼠淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞）及嚙齒類(lèi)動(dòng)物顯示出較強(qiáng)的抗腫瘤活性，同時(shí)還表明對(duì)胃癌、直腸癌和白血病等多種惡性腫瘤均有一定的療效，這引發(fā)了科學(xué)界對(duì)植物喜樹(shù)和喜樹(shù)堿類(lèi)化合物的研究熱潮，陸陸續(xù)續(xù)發(fā)現(xiàn)了更多的喜樹(shù)堿類(lèi)化合物。但因多種原因，喜樹(shù)堿藥物的臨床應(yīng)用卻未取得有效推進(jìn)。

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1985年，Hsiang和其同事發(fā)現(xiàn)喜樹(shù)堿及其衍生物是以拓?fù)洚悩?gòu)酶I（Topoisomerase I，Topo I）為靶點(diǎn)，通過(guò)TopoI-DNA可裂解復(fù)合物可逆結(jié)合，形成的CPT-Topo I-DNA三元復(fù)合物可抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞的死亡。相比TopoII抑制劑，Topo I抑制劑療效高，抗瘤譜廣，喜樹(shù)堿對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶I有專(zhuān)一抑制性，引發(fā)了新一輪的關(guān)注。

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經(jīng)過(guò)多年的技術(shù)積累和發(fā)展，藥物遞送被廣泛應(yīng)用于抗腫瘤領(lǐng)域，提高藥物有效性，降低藥物毒性，改善藥物安全性。已有多種技術(shù)應(yīng)用于喜樹(shù)堿藥物的開(kāi)發(fā)，例如脂質(zhì)體、抗體偶聯(lián)藥物、樹(shù)枝狀大分子、膠束等技術(shù)。

喜樹(shù)堿為不溶于酸不溶于水的中性生物堿，也很難溶于一般的有機(jī)溶劑。對(duì)光和熱敏感，光照會(huì)影響喜樹(shù)堿的吸光度，避光則保持穩(wěn)定，而加熱則會(huì)使喜樹(shù)堿分解。室溫下經(jīng)稀堿處理，容易開(kāi)環(huán)成水溶性羧酸鹽，酸化則又重新內(nèi)酯化成環(huán)。

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喜樹(shù)堿物化性質(zhì)：

中文名：喜樹(shù)堿

外文名：Camptothecin

別????名：(+)-喜樹(shù)堿

化學(xué)式：C20H16N2O4

分子量：348.34

CAS登錄號(hào)：7689-03-4

EINECS登錄號(hào)：444-280-6

熔????點(diǎn)：260?°C (dec.)(lit.)

沸????點(diǎn)：757.0±60.0?°C at 760 mmHg

水溶性：極難溶于水

外????觀：淺黃色針狀結(jié)晶

閃????點(diǎn)：411.6±32.9?°C

應(yīng)????用：抗癌藥

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艾美捷喜樹(shù)堿是一種具有抗腫瘤特性的細(xì)胞毒性植物生物堿，是一種原型DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑。在凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中使用喜樹(shù)堿創(chuàng)建陽(yáng)性對(duì)照。

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艾美捷喜樹(shù)堿(Camptothecin)基本操作：

1、將喜樹(shù)堿粉末溶解在組織培養(yǎng)級(jí)DMSO中，以獲得2mg/mL喜樹(shù)堿儲(chǔ)備濃度。

2、制備50–100μL的DMSO增溶喜樹(shù)堿等分試樣，并將其冷凍保存在<-20°C。一瓶冷凍的喜樹(shù)堿可在丟棄前再解凍2次。應(yīng)標(biāo)記已解凍1X的小瓶，以表明這一點(diǎn)，以便它們?cè)趤G棄前只經(jīng)過(guò)一次解凍。

3、喜樹(shù)堿濃度范圍為2–4μg/mL的刺突細(xì)胞培養(yǎng)物，產(chǎn)生6–12μM的細(xì)胞培養(yǎng)物喜樹(shù)堿濃度。該喜樹(shù)堿濃度范圍適用于誘導(dǎo)Jurkat或HL 60細(xì)胞懸浮液，其濃度范圍通常為1 x 105–1 x 106細(xì)胞/mL。在此濃度范圍內(nèi)，培養(yǎng)4小時(shí)（37°C）后成功誘導(dǎo)凋亡。

4、對(duì)特定細(xì)胞系進(jìn)行時(shí)間歷程研究，以確定合適的喜樹(shù)堿濃度和暴露時(shí)間，從而為實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)良好的凋亡誘導(dǎo)水平。

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喜樹(shù)堿(Camptothecin)學(xué)術(shù)論文參考：

王洋，戴紹軍，閻秀峰. ???光強(qiáng)對(duì)喜樹(shù)幼苗葉片次生代謝產(chǎn)物喜樹(shù)堿的影響． 《?CNKI;WanFang?》 ，?2004 ?

閻秀峰，王洋，于濤，張玉紅等. ???喜樹(shù)葉中喜樹(shù)堿含量的高效液相色譜分析． 《?CNKI?》 ，?2002 ?

楊時(shí)成，朱家壁，梁秉文等. ???喜樹(shù)堿固體脂質(zhì)納米粒的研究． 《 藥學(xué)學(xué)報(bào) 》 ，?1999 ?

劉鍵. ???羥基喜樹(shù)堿類(lèi)藥物作用機(jī)制及在合并治療中機(jī)理的研究． 《 中國(guó)腫瘤臨床 》 ，?1998 ?

張志榮，路偉. ???肝靶向羥基喜樹(shù)堿緩釋毫微粒的研究． 《?CNKI?》 ，?1997