一.柱子的平衡時(shí)間跟填料關(guān)系大嗎？哪種最快，哪種最慢？因?yàn)槲以谧鲭x子交換柱的時(shí)候平衡是相當(dāng)?shù)穆?/p>

? ? ? ?答：根據(jù)色譜速率理論，粒徑越小，柱效越高，而且當(dāng)粒徑小到亞2微米左右時(shí)，線速度的提高，其分離度就不再降低，從而改變了許久以來(lái)人們不得不在 “速度和分離度之間取舍”的局面。

二.關(guān)于配置流動(dòng)相，有機(jī)相我們可以甲醇乙腈同時(shí)用，這個(gè)是基于什么考慮的？是不是根據(jù)甲醇乙腈選擇性不同、樣品在這個(gè)兩者的溶解度的差異以及調(diào)節(jié)洗流動(dòng)相脫能力來(lái)考慮的？

? ? ? ?答：甲醇和乙腈同時(shí)用，可以獲得單純的甲醇或者乙腈不一樣的選擇性，而且洗脫能力也會(huì)改變，根據(jù)多元流動(dòng)相的強(qiáng)度因素Sab.....=Saψa+Sbψb=...Sa和Sb純?nèi)軇゛和b的溶劑強(qiáng)度因素；ψa、ψb分別為a和b的體積分?jǐn)?shù)，所以在藥典中有很多體系都使用甲醇乙腈體系；

三.三乙胺磷酸鹽緩沖液作流動(dòng)相，柱壓一天比一天高，該怎么樣解決？

? ? ? ?答：把柱子再生下，再生的方法搜一下有很多反沖對(duì)絕大部分色譜柱都是可行的,效果不錯(cuò)。

四.新出廠液相色譜柱，保護(hù)溶劑一般是什么？怎樣進(jìn)行平衡清洗比較好，一般要平衡多長(zhǎng)時(shí)間比較好？

? ? ? ?答：柱子類(lèi)型不同，保存溶劑也會(huì)不一樣吧，具體要看說(shuō)明書(shū)的說(shuō)明。對(duì)于反相柱，一般用甲醇（乙腈）保存，也有用80%左右甲醇濃度的甲醇/水保存的。一般用流動(dòng)相平衡沖洗10-20個(gè)柱體積即可（注意：柱體積不等于空柱管體積，4.6x250mm的色譜柱空柱管體積是4.15 ml，而柱體積只有約2.5ml）。

五.據(jù)說(shuō)液相色譜柱柱壓達(dá)到一定高度就不能使用了，請(qǐng)問(wèn)一般達(dá)到多高，用甲醇和乙腈是不是不一樣？

? ? ? ?答：柱壓不是色譜柱不能使用的唯一因素，分離度才是最重要的。柱壓只要沒(méi)高到儀器不能承受的地步，例如超過(guò)300bar，就可以一直使用。甲醇的粘度比乙腈高，同樣狀況的柱子，如果用甲醇做流動(dòng)相，柱壓可能超了，換用乙腈會(huì)使柱壓下降不少，儀器還能承受。不過(guò)盡管柱壓還沒(méi)上升到接近400Bar的限定，如果發(fā)現(xiàn)柱壓上升速度較快，也需要及早對(duì)柱子進(jìn)行清洗維護(hù)，從根本上排除導(dǎo)致柱壓上升的源頭。

總結(jié)

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