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色譜法簡(jiǎn)介

2023-03-03 17:03 作者:sousepad材料檢測(cè)  | 我要投稿

????????色譜又稱色層法或?qū)游龇?,是一種物理化學(xué)分析方法,它利用不同溶質(zhì)(樣品)與固定相和流動(dòng)相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當(dāng)兩相做相對(duì)移動(dòng)時(shí),各溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行多次平衡,使各溶質(zhì)達(dá)到相互分離。

????????1906年Tswett 研究植物色素分離時(shí)提出色譜法概念;他在研究植物葉的色素成分時(shí),將植物葉子的萃取物倒入填有碳酸鈣的直立玻璃管內(nèi),然后加入石油醚使其自由流下,結(jié)果色素中各組分互相分離形成各種不同顏色的譜帶。按光譜的命名方式,這種方法因此得名為色譜法。以后此法逐漸應(yīng)用于無(wú)色物質(zhì)的分離,“色譜”二字雖已失去原來(lái)的含義,但仍被人們沿用至今。

????????在色譜法中,靜止不動(dòng)的一相(固體或液體)稱為固定相(stationary phase) ;運(yùn)動(dòng)的一相(一般是氣體或液體)稱為流動(dòng)相(mobile phase)。

分類

柱色譜

????????為向玻璃管中填入固定相,以流動(dòng)相溶劑浸潤(rùn)后在上方倒入待分離的溶液,再滴加流動(dòng)相,因?yàn)榇蛛x物質(zhì)對(duì)固定相的吸附力不同,吸附力大的固著不動(dòng)或移動(dòng)緩慢,吸附力小的被流動(dòng)相溶劑洗下來(lái)隨流動(dòng)相向下流動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)分離。

紙色譜

????????以濾紙條為固定相,在紙條上點(diǎn)上待分離的混合溶液的樣點(diǎn),將紙條下端浸入流動(dòng)相溶劑中懸掛,溶劑因?yàn)槊?xì)作用沿濾紙條上升,樣點(diǎn)中的溶質(zhì)從而被分離。

薄層色譜

????????是在玻璃板上涂以固定相涂層,然后點(diǎn)樣,下端浸入溶劑,同樣自下而上分離。常用于探索柱色譜實(shí)驗(yàn)條件,溶劑和固定相的選擇等。

????????常用固定相有石膏、氧化鋁、蔗糖、淀粉等,常用流動(dòng)相為水、苯等各種有機(jī)溶劑。

其他分類方法

????????色譜法的分類方法很多,最粗的分類是根據(jù)流動(dòng)相的狀態(tài)將色譜法分成四大類。

色譜法的四種分類

色譜法的應(yīng)用

色譜法的應(yīng)用可以根據(jù)目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。

????????制備性色譜的目的是分離混合物,獲得一定數(shù)量的純凈組分,這包括對(duì)有機(jī)合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。相對(duì)于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術(shù)如重結(jié)晶,色譜法能夠在一步操作之內(nèi)完成對(duì)混合物的分離,但是色譜法分離純化的產(chǎn)量有限,只適合于實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。

????????分析性色譜的目的是定量或者定性測(cè)定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等,定量的分析性色譜有氣相色譜、高效液相色譜等。色譜法應(yīng)用于分析領(lǐng)域使得分離和測(cè)定的過(guò)程合二為一,降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期,是比較主流的分析方法。在中華人民共和國(guó)藥典中,共有超過(guò)約600種化學(xué)合成藥和超過(guò)約400種中藥的質(zhì)量控制應(yīng)用了高效液相色譜的方法。

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