供應(yīng)商：上海生物網(wǎng)

貨號(hào)：T3068?

特性：干粉培養(yǎng)基?

滅菌情況：未滅菌?

儲(chǔ)存條件：常溫，避光，干燥

改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基（Modified Steiner's Medium）是一種用于培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis）的特定培養(yǎng)基。它是根據(jù)原始的斯蒂芬遜培養(yǎng)基進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化而來，以提高結(jié)核分枝桿菌的生長(zhǎng)和可觀察性。在使用改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基時(shí)，有一些注意事項(xiàng)需要注意，以確保培養(yǎng)的成功和準(zhǔn)確性。

下面將詳細(xì)介紹改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基的使用方法和注意事項(xiàng)。

1. 培養(yǎng)基的制備： a. 準(zhǔn)備培養(yǎng)基的原料和試劑，包括蛋白胨、酵母提取物、蔗糖、磷酸鹽緩沖液等。確保所有的試劑都是新鮮的、無菌的，并按照配方比例準(zhǔn)確稱量。 b. 將磷酸鹽緩沖液溶解在蒸餾水中，調(diào)整pH值到指定范圍（通常為7.0-7.4）。 c. 加熱蛋白胨、酵母提取物和蔗糖等試劑，使其完全溶解。 d. 將以上步驟得到的溶液混合，并用蒸餾水補(bǔ)足至總體積，充分?jǐn)嚢杌靹颉?e. 將培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)瓶或瓊脂培養(yǎng)板中，密封好并進(jìn)行滅菌處理（如高壓滅菌或自動(dòng)滅菌器）。

2. 樣品的處理和接種： a. 從臨床標(biāo)本（如痰液、尿液等）或培養(yǎng)純種中提取結(jié)核分枝桿菌的樣品。 b. 將樣品經(jīng)過適當(dāng)?shù)奶幚?，如離心沉淀、過濾等，以去除雜質(zhì)。 c. 用無菌的吸管或移液器將樣品接種到改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基中。可以選擇不同的接種方法，如點(diǎn)接種、線接種或均勻接種，以獲得所需的培養(yǎng)結(jié)果。 d. 確保接種時(shí)的操作環(huán)境和工具都是無菌的，以防止其他細(xì)菌的污染。

3. 培養(yǎng)條件和培養(yǎng)期： a. 將接種好的改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基培養(yǎng)瓶或瓊脂培養(yǎng)板密封好，以防止外界細(xì)菌的污染。 b. 將培養(yǎng)瓶或瓊脂培養(yǎng)板置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)箱或培養(yǎng)器中，設(shè)置適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸葪l件。結(jié)核分枝桿菌的最適生長(zhǎng)溫度通常為37℃。 c. 觀察培養(yǎng)物的生長(zhǎng)情況，通常需要持續(xù)培養(yǎng)2-6周，直到結(jié)核分枝桿菌形成可見的典型菌落。在觀察過程中，注意觀察菌落的形態(tài)、顏色、大小和生長(zhǎng)速度等指標(biāo)，以確定是否為結(jié)核分枝桿菌。

4. 結(jié)果的解讀： a. 鑒定結(jié)核分枝桿菌的典型菌落，通常具有粗糙的表面、黏稠的質(zhì)地和象牙色至淡黃色的外觀。 b. 進(jìn)行進(jìn)一步的生化試驗(yàn)或分子生物學(xué)檢測(cè)，以確認(rèn)菌落中是否存在結(jié)核分枝桿菌。這些方法可以包括酸殺菌試驗(yàn)、核酸擴(kuò)增技術(shù)等。

在使用改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基時(shí)，需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：

1. 無菌操作：在制備和使用改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基的過程中，必須保持嚴(yán)格的無菌操作，以防止其他細(xì)菌的污染。使用無菌的工具和試劑，并在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。

2. 培養(yǎng)條件的控制：結(jié)核分枝桿菌對(duì)培養(yǎng)條件比較敏感，因此需要精確控制培養(yǎng)溫度、濕度和氧氣濃度等參數(shù)。適宜的培養(yǎng)溫度為37℃，濕度需保持適當(dāng)?shù)乃趾俊?/p>

3. 觀察和解讀結(jié)果：在觀察菌落生長(zhǎng)和解讀結(jié)果時(shí)，需要具備一定的經(jīng)驗(yàn)和技巧。熟悉結(jié)核分枝桿菌的典型菌落形態(tài)和特征，以避免對(duì)其他細(xì)菌的誤判。

4. 結(jié)果的驗(yàn)證：盡管改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基是一種常用的結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基，但為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，通常需要進(jìn)行進(jìn)一步的生化試驗(yàn)或分子生物學(xué)檢測(cè)，以確認(rèn)菌落中是否存在結(jié)核分枝桿菌。

總結(jié)而言，改良的斯蒂芬遜培養(yǎng)基是一種常用的結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基，用于結(jié)核病的診斷和研究。在使用過程中，需要注意無菌操作、適宜的培養(yǎng)條件、結(jié)果的觀察和解讀，以及結(jié)果的驗(yàn)證，以確保培養(yǎng)的成功和結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些注意事項(xiàng)將有助于提高結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)成功率和診斷的準(zhǔn)確性。

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