獸醫(yī)微生物學復習題

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細菌總論

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一、 解釋概念

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菌落：某個細菌在適合生長的培養(yǎng)基表面或內部，在合適條件下，分裂繁殖出數量巨大的菌體，形成一個肉眼可見的有一定形態(tài)的群體。

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莢膜：某些細菌在其生活中可在細胞壁的外周形成一層包圍整個菌體、邊界清楚地粘液樣物質

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黏液層：有些細菌分泌一層很疏松、與周圍邊界不明顯、易與菌體脫離的黏液樣物質，稱為黏液層

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鞭毛：多數弧菌、螺菌、許多桿菌、個別球菌的菌體表面長有一至數十根彎曲的絲狀物，稱為鞭毛

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培養(yǎng)基：是人工配制的含有細菌生長繁殖必需的營養(yǎng)物質

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殺菌作用：是指某些物質或因素具有在一定條件下殺死微生物的作用。

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抑菌作用: ?是指某些物質或因素具有抑制微生物生長、繁殖的作用。

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抗菌作用:某些藥物具有的抑制或殺滅微生物的作用，統稱為抗菌作用

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滅菌：消滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細菌芽胞、霉菌孢子在內的全部病原微生物和非病原微生物

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消毒：殺滅物體上病原微生物的方法，僅要求達到消除傳染性的目的，而對非病原微生物及其芽胞、孢子并不嚴格要求全部殺死

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防腐：阻止或抑制物品上微生物生長繁殖的方法，微生物不一定死亡

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無菌操作：采取防止或杜絕任何微生物進入動物機體或其他物體的方法的進行的操作稱為無菌操作

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抗生素：某些微生物在代謝過程中產生的一類能抑制或殺死另一些微生物的物質稱為抗生素 植物殺菌素：某些植物中存在有殺菌物質，這種殺菌物質一般稱為植物殺菌素

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細菌素：是某些細菌產生的一種具有殺菌作用的蛋白質，只能作用于與它同種不同菌種的細菌以及與它親緣關系相近的細菌i

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噬菌體：噬菌體是寄生于細菌、真菌、螺旋體、放線菌等的一類病毒，也稱細菌病毒 感染：

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是指病原微生物在宿主體內持續(xù)存在或增殖

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病原菌：是指那些導致機體發(fā)病的細菌，是一群高度特化了的微生物，為了自身的生存，已適應而且必須在宿主生物體內持續(xù)存在或增殖，有時可造成宿主發(fā)病

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半數致死量：是指能使接種的實驗動物在感染后一定時限內死亡一半所需的微生物量或毒素量

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半數感染量：某些病原微生物只能感染實驗動物、雞胚或細胞，但不引致死亡。是指能使接種的實驗動物在感染后一定時限內感染一半所需的微生物量或毒素量

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侵襲力：病原菌在機體內定殖，突破機體的防御屏障，內化作用，繁殖和擴散，這種能力稱為侵襲力

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細菌的遺傳：是指親代細菌與子代細菌的相似性，它使細菌的性狀保持相對穩(wěn)定，是細菌存在的依據

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質粒：質粒是細菌染色體外的遺傳物質，多為環(huán)狀雙螺旋DNA分子。

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轉化：供體菌裂解游離的DNA片段被受體直接攝取，使受體菌獲得新的遺傳性狀的過程稱為轉化

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轉導：以溫和噬菌體為媒介，把供體菌的DNA小片段攜帶到受體菌中，通過交換與整合，使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀稱為轉導

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接合：是兩個完整的細菌細胞通過性菌毛直接接觸，由供體細菌將質粒DNA轉移給受體細菌

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的過程

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二、 繪出細菌的基本結構和特殊結構模式圖。

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三、 試述脂多糖的組成和功能。

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答：為革蘭陰性細菌所特有，位于外膜的最表面，厚8-10nm，由類脂A，核心多糖和側鏈多糖三部分組成。具有控制細胞的透性，提高Mg2+濃度，決定細胞壁抗原多樣性等作用，因而可用于傳染病的診斷和病原的地理定位，其中的類脂A更是G-病原致病物質內毒素的物質基礎。

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四、 試述細菌特殊結構的概念和功能。

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僅在部分細菌中才有的或在特殊環(huán)境條件下才行成的構造稱為特殊構造。主要是糖被，鞭毛，菌毛，性菌毛和芽孢等。

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功能：

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1、 莢膜①抵抗干燥②加強致病力，免受吞噬；③堆積某些代謝廢物；④貯存物。⑤細菌間的信息識別作用 ⑥作為透性屏障和離子交換系統，以保護細菌免收重金屬離子的毒害。

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2、 鞭毛：①鑒定價值，鞭毛是細菌的運動器官，細菌能否運動可用于鑒定。②致病作用：

鞭毛運動能增強細菌對宿主的侵害，因運動往往有化學趨向性，可避開有害環(huán)境或向高濃度環(huán)境的方向移動。③抗原性：鞭毛具有特殊H抗原，可用于血清學檢查。

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3、 菌毛 普通菌毛是細菌的粘附器官，細菌藉菌毛的粘附作用使細菌牢固粘附在細胞上，

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并在細胞表面定居，導致感染

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4、 性菌毛 具有向雌性菌株傳遞遺傳物質的作用，有的還是RNA噬菌體的特異性吸附受體。

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5、 芽孢 其功能是：①芽胞的抵抗力很強；②芽胞在適宜條件可以發(fā)育成相應的細菌；③

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鑒定細菌的依據之一。

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五、試述革蘭氏染色的意義和原理。

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其重要的臨床意義在于：1.鑒別細菌 2.選擇藥物 3.與致病性有關：革蘭氏陽性菌能產生外毒素，革蘭氏陰性菌能產生內毒素，兩者的致病作用不同。

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原理如下：通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄

而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

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六、細菌新陳代謝的特點是什么？

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1、 細菌生長和繁殖地速度極快、超過動物細胞的10~100倍；

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2、 細菌利用各種化合物作為能源的能力遠遠強于動物細胞

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3、 細菌對營養(yǎng)的需求比動物細胞更為多種多樣，因為他們有多種代謝旁路

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4、 細菌可利用超常流水線式生產地方式生成大分子物質

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5、 細菌能產生諸如肽聚糖磷壁酸等特殊物質

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七、細菌群體生長分期和各個期的特點是什么？

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答：遲緩期：菌體增大，代謝活躍，合成并積累所需酶系統。

?????對數期：細菌此時生長迅速，以恒定速度進行分裂繁殖，活菌數以幾何級數增長，達到頂峰，生長曲線接近一條斜的直線。

?????穩(wěn)定期：此時營養(yǎng)的消耗、代謝產物的蓄積等，細菌繁殖速度下降，死亡數逐步上升，新繁殖的活菌數與死菌數大致平衡。

?????衰亡期：細菌開好似大量死忙，死菌數超過活菌數。

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八 、按功能細菌培養(yǎng)基分幾類？

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答：

普通培養(yǎng)基:瓊脂蛋白胨肉水nacl

鑒別培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)和區(qū)分不同種類細菌的培養(yǎng)基，如：伊紅— 美蘭和麥康凱瓊脂。

選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質，如：SS平板。

厭氧培養(yǎng)基：是為培養(yǎng)厭氧菌而設計的，方法是在培養(yǎng)基中加入還原劑如巰基乙酸鈉等

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? 試述主要的細菌生化反應及用途。

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答：氧化酶試驗：在有分子氧或細胞色素存在時，可氧化對二苯二胺出現紫色反應。試驗用于檢驗細胞是否有氧化酶的存在。

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觸酶試驗：觸酶又名接觸酶或過氧化氫酶，滴加過氧化氫能立即出現氣泡，因過氧化氫被催化分解為水和氧氣。乳桿菌等許多厭氧菌為陰性

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氧化發(fā)酵試驗（O/F試驗）：不同細菌對不同糖的分解能力及代謝產物不同，有的能產酸并產氣，有的則不能。而且這種分解能力因是否有氧的存在而異，在有氧條件下稱為氧化，無氧條件下稱為發(fā)酵。試驗時往往將同一細菌接種相同的糖培養(yǎng)基一式兩管，一管用液體石蠟等封口，進行發(fā)酵，另一管置有氧條件下。培養(yǎng)后觀察產酸產氣情況。O/F試驗一般多用葡萄糖進行

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VP試驗：大腸桿菌和產氣腸桿菌均能發(fā)酵葡萄糖，產酸產氣，兩者不能區(qū)別。但產氣腸桿菌能使丙酮酸脫羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在堿性溶液中被空氣中的分子氧所氧化，生成二乙酰與培養(yǎng)基中含胍基的化合物發(fā)生反應，生成紅色化合物，是為陽性。大腸桿菌不能生成乙酰甲基甲醇，故為陰性

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甲基紅試驗:在VP試驗中，產氣腸桿菌分解葡萄糖，產生2分子酸性的丙酮酸轉變?yōu)?分子中性的乙酰甲基甲醇，故最終的酸類較少，培養(yǎng)基PH>5.4，以甲基紅作為指示劑時，溶液呈橘黃色，是為陰性。大腸桿菌分解葡萄糖時，丙酮酸不轉變?yōu)橐阴＜谆状?，故培養(yǎng)液酸性較強，PH≤4.5,甲基紅指示劑呈紅色，則為陽性

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九 、什么是熱空氣滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法？敘述各方法的應用。

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答：熱空氣滅菌法：指利用干熱滅菌器，以干熱空氣進行滅菌的方法。適用于高溫下不損壞、不變質、不蒸發(fā)的物品。在干熱情況下，由于熱空氣的穿透力較低，需在160°C維持2h，才能達到殺死所有微生物及其芽孢、孢子的目的。

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巴氏消毒法：是以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而又不致嚴重損害其

營養(yǎng)成分和風味的消毒方法。目前主要用于葡萄酒，啤酒，果酒及牛乳等食品的消毒。具體方法分三類：低溫維持巴氏消毒法，高溫瞬時巴氏消毒法，超高溫巴氏消毒法。

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高壓蒸汽滅菌法：即用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌的方法，是應用最廣泛的、最有效的滅菌方法。凡是耐高溫、不怕潮濕的物品，如各種培養(yǎng)基、溶液、玻璃器皿、金屬器械、敷料、橡皮手套、工作服和小動物尸體等均可用這種方法滅菌

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十 、敘述紫外線殺菌法及其應用。

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答：波長200-300nm的紫外線（包括日光中的紫外線）具有殺菌作用。紫外線波長：136-400nm，以250-300nm很強，265-266nm最強。但其穿透力弱，紫外線的部分波長與DNA的吸收光譜范圍一致，作用于DNA使同一條DNA鏈上的相鄰的兩個胸腺嘧啶共價結合而形成二聚體，干擾DNA復制與轉錄時的正常堿基配對，導致細菌致病性突變而死亡。此外紫外線還可使空氣中的分子氧變?yōu)槌粞?，釋放氧化能力強的原子氧，具有殺菌作用?/p>

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用于微生物實驗室、無菌室、手術室、傳染病房、種蛋室等的空氣消毒，或用于不能用高溫或化學藥品消毒物品的表面消毒

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十一、試述細菌具有致病性的主要依據（柯赫法則）。

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答：第一，特殊的病原菌應在同一疾病中查見，在健康者不存在。第二，此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種。第三，此純培養(yǎng)物接種易感動物，能導致同樣病癥。第四，自實驗感染的動物體內能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)。

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? 如何從分子水平上解釋柯赫法則？

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答：第一，應在致病菌株中檢出某些基因或其產物，而無毒力菌株中沒有；第二，如有毒力菌株的某個基因被損壞，則菌株的毒力應減弱或消除。或者將此基因克隆到無毒菌株內，后者成為有毒力菌株；第三，將細菌接種動物時，這個基因應在感染的過程中表達；第四，在接種動物檢測到這個基因產物的抗體，或產生免疫保護。

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十二、什么是細菌外毒素？其基本特性是什么？

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細菌外毒素在生長過程中由細胞內分泌到細胞外的毒性物質。能產生外毒素的細菌大多數是革蘭氏陽性菌，少數是革蘭氏陰性菌。將產生外毒素的細菌的液體培養(yǎng)物用濾菌器過濾除菌，即能獲得外毒素。其特點是：

（1）化學成分是蛋白質，分子量為27000～900000道爾頓；（

（2）不穩(wěn)定，易被熱、酸及酶所滅活；

（3）可經甲醛（0.3～0.4％）處理，脫毒成為類毒素；

（4）抗原性強，可刺激機體產生高效價的抗毒素；

（5）具親組織性，但作用于組織有選擇性。一般不引起宿主發(fā)熱，但?？梢种扑拗鞯鞍踪|的合成，對宿主有細胞毒及神經毒性；

（6）毒性極強，極微量就可使實驗動物死亡。

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十三、什么是細菌內毒素？其基本特性是什么？

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內毒素特指革蘭氏陰性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分，細菌在死亡后破裂或人工裂解后釋放。革蘭氏陽性菌細胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性，不致熱。

特性：內毒素耐熱：100℃，1h不破壞；不能被甲醛脫毒成類毒素；抗原性弱，抗體無中和內毒素作用。

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十四、什么細菌的遺傳和變異？

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答：所謂遺傳，系指親子代細菌與子代細菌的相似性，它使細菌的性狀保持相對穩(wěn)定，是細菌存在的根據。所謂變異，系指親代與子代細菌之間的不相似性，它使細菌得以進化。 十五、敘述細菌的遺傳與變異的實際應用意義。PP66-67

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答：微生物學診斷；疾病治療和預防

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病毒總論

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一、解釋概念

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病毒（粒）子：一個形態(tài)和結構上完整的病毒顆粒稱為病毒(粒)子

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核衣殼：由核酸組成的芯髓被衣殼包裹，衣殼與芯髓在一起組成核衣殼

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原代細胞：動物組織經胰蛋白酶等消化、分散，獲得單個細胞，再生長于培養(yǎng)皿中。

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二倍體細胞株：將長成的原代細胞消化分散成單個細胞，繼續(xù)培養(yǎng)傳代，其細胞染色體數與原代細胞一樣，仍為二倍體。

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傳代細胞系：與原代細胞與二倍體細胞株不同，這類細胞在體外可無限制分裂，亦可無限制傳代。

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細胞病變：細菌感染導致的 細胞損傷稱之為細胞病變

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空斑：病毒樣本接種吸附于單層細胞，經一段時間培養(yǎng)，進行染色，原先感染病毒的細胞及病毒擴散的周圍細胞會形成一個近似圓形的斑點，類似固體培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，稱之為空斑。

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包涵體：是某些病毒感染細胞產生的特征性的形態(tài)變化，可通過固定染色而后在光學顯微鏡下檢測。

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隱蔽期：在病毒感染細胞之后的一個短時間內，病毒完全消失，甚至在細胞內也找不到傳染性的病毒顆粒，直至感染數小時后子代病毒出現為止，這階段稱為隱蔽期。

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血凝作用：某些病毒能凝集紅細胞，稱為病毒的血凝作用。

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血凝抑制作用：病毒的特異抗體可抑制其血凝作用，稱為血凝抑制作用。

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二、繪制病毒顆粒結構模式圖。

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三、病毒的核衣殼對稱型有那些？各自的特點是什么？

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答：病毒的核衣殼主要有螺旋狀對稱和20面體對稱兩種對稱類型，少數為復合對稱。各自的特點為：

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（一）螺旋狀對稱 病毒衣殼呈螺旋狀的空心圓筒，衣殼單體直接與螺旋狀的核酸相連接，并不聚集成殼粒。衣殼的直徑因病毒的種類不同而差異。有的盤曲，有的不易彎曲。

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（二）20面體對稱 由20個等邊三角形構成，有20個面、12個角、30條邊。凡是20面體的衣殼必然是2：3：5對稱。在衣殼上排列的圓形顆粒，稱為殼粒子。它是衣殼的形態(tài)單位，每一殼?；旧嫌?個或6個單體組成，前者稱為五鄰體，后者稱為6鄰體。

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（三）復合對稱 其殼粒排列既有螺旋對稱又有立體對稱的型式，如痘病毒、噬菌體。

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四、病毒的基本特征是什么？

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答：1、病毒只含有一種核酸，DNA或RNA，而其他微生物有兩種核酸同時存在。

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2、病毒是嚴格的胞內寄生微生物，它沒有完整的代謝酶系統，也無進行獨立生長、增殖的其他結構。

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3、病毒沒有核糖體和tRNA，也無合成蛋白質所必需的酶。在其mRNA進行轉錄時，完全利宿主細胞的物質。

4、病毒不經過繁殖，而是通過其核酸通過復雜的生物合成，獲得大量不同組分，進行裝配增殖。

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5、病毒對抗生素和作用于微生物代謝途徑的藥物不敏感。絕大多數病毒對干擾素敏感。

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6、有些病毒的核酸能整合到宿主細胞的DNA中去，從而誘發(fā)潛伏性感染。

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五、簡要敘述病毒的復制過程。

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答：病毒的吸附

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第一步是屬于非特異的。

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第二步是與特異性受體結合：細胞上的受體數目：104-105。

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纖突：HI和HA；微叢或多肽。

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病毒的穿入和脫殼

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病毒的穿入與吸附是一個連續(xù)過程，侵入（穿入）是一個依靠能量的過程。

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病毒侵入細胞有3種方式：病毒直接轉入胞漿；

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細胞吞飲病毒；

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病毒囊膜與細胞膜融合。

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無囊膜病毒

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1、吞飲作用：病毒首先被吞入，進入吞噬泡，再與溶酶體融合，脫衣殼（蛋白酶作用），暴露基因組。

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2、結構改變：病毒吸附于細胞后，衣殼就開始解體，失去完整性。如小RNA病毒。主要是受體使殼粒重新安排。隨后病毒被吞噬或直接進入細胞，將基因組釋放到胞漿中。

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3、直接侵入：病毒吸附于細胞受體后，直接穿過細胞膜，衣殼被細胞蛋白酶所消化，釋放核酸，如腺病毒。

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有囊膜病毒

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有些有囊膜病毒在吸附后囊膜與細胞膜融合，核衣殼侵入細胞，完成脫殼程序，如副粘病毒和皰診病毒。也可經過吞噬作用而侵入細胞，如彈狀病毒和披膜病毒。

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六、列舉出動物病毒轉錄mRNA的基本模式。P304

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七、有囊膜的病毒如何成熟與釋放？

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答：有囊膜的病毒以出芽的方式成熟，有細胞膜出芽及胞吐兩種形式

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八 、病毒病的微生物學檢驗程序。

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答：(一)、樣品采集和遞送及處理

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????(二)、鏡檢

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1、光學顯微顯鏡檢查 包涵體：內基氏小體；細胞的病變特征：非化膿性腦炎。

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2、電子顯微鏡檢查：主要有：形態(tài)、大小、構造；目前尚難培養(yǎng)的病毒；免疫電鏡等。 優(yōu)點是：快速、肯定、無需培養(yǎng)，可以檢查到混合感染；

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缺點是：不敏感（106／ml）、判別困難、效率低。成本昂貴。

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常用的技術：負染法、超薄切片法和免疫電鏡法等。

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(三)、病毒分離培養(yǎng)鑒定

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分離培養(yǎng)：

動物接種——原動物/實驗動物

雞胚接種——尿囊腔、卵黃囊、尿囊膜、羊膜腔等

細胞培養(yǎng)——原代細胞

二倍體細胞 技術克隆/擴增

傳代細胞

組織塊培養(yǎng)——腸管、氣管環(huán)等

鑒定：生物學特性鑒定；血清學鑒定（對病毒）；病毒特性：

如血凝性；分子生物學技術等

(四)、血清學檢查： 雙份血清法（檢抗體）

HA、HI、補反、

放射元素\熒光\酶標記

中和試驗

(五)、分子生物學技術

核酸酶切圖譜

核酸探針

PCR技術等

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其他病原微生物

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螺旋體：是一類菌體細長，柔軟、彎曲呈螺旋狀、能活潑運動的原核單細胞微生物

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鉤端螺旋體：菌體纖細、螺旋致密，一端或兩端彎曲呈鉤狀的螺旋體

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支原體： 支原體是一類無細胞壁的細菌，具多形性，可通過細菌濾器

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立克次氏體：立克次氏體是一類專性細胞內寄生的小型革蘭陰性原核單細胞微生物 衣原體：是一類形態(tài)相似，能通過濾器、營嚴格細胞內寄生，有獨特生活周期的革蘭氏陰性的原核生物

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真菌：真菌是一大類真核微生物，不含葉綠素，無根、莖、葉、營腐生或寄生生活；僅少數

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類群為單細胞，其余為多細胞；大多數呈分支或部分支的死狀體；能進行有性和無性繁殖。 菌絲：是單條管狀細絲，為大多數真菌的結構單位

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孢子：孢子是生物所產生的一種有繁殖或休眠作用的細胞，能直接發(fā)育成新個體

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一、 支原體的一般特性是什么？

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答：支原體屬是一類能營獨立生活的最小、最簡單的原核生物。特征是生長時需要外源脂肪酸和甾醇。

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支原體細胞柔軟，高度多形性，基本形態(tài)為球形和絲狀。

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支原體無細胞壁。由細胞膜、細胞質、核糖體和原核細胞核組成。

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革蘭氏染色陰性，但不易著色，姬姆薩染色呈淡紫色。

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支原體可在人工培養(yǎng)基上繁殖，營養(yǎng)要求較高。生長適宜PH7.6～8.0。5%CO2可促進其生長。固體培養(yǎng)基上生長緩慢,2-6天長出微小“荷包蛋”樣菌落。支原體也可在雞胚絨毛尿囊膜和細胞培養(yǎng)中生長。在動物血清和雞蛋黃培養(yǎng)基上生長后，形成“薄膜”及“斑

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點”?！氨∧ぁ痹诰浔砻?，內含膽固醇和磷脂；“斑點”位于菌落下方或周圍，由鈣鎂等鹽類組成。

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支原體廣泛分布于污水、土壤、植物、動物和人體中，腐生、共生、寄生，常污染實驗

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室的細胞培養(yǎng)及生物制品，有30多種對人或畜禽有致病性。

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二、簡述真菌中毒的毒素來源。

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答：來源于青霉菌屬、鐮刀菌屬、葡萄穗霉菌屬、麥角菌屬、甘薯黑斑病霉菌曲霉菌屬 病毒和細菌的各論部分按總結表復習。

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